hplc分析方法的验证方案

PAGEPAGE9XXX产品HPLC分析方法确认方案XXX制药有限公司确认方案审批表审批部门签名日期程序起草审批部门签名日期程序起草检验室检验室主任审核质量保证部批准人质量负责人1概述2确认目的1概述2确认目的3确认范围3确认范围4确认小组成员与职责5确认方案的审核与批准6进度计划7确认内容8变更与偏差9确认结果与评价报告10确认合格证书概述XXX2010ABC的检验均使用高效液相色谱仪进行检验，两个检验项目检验参数等条件完全相同，且20102010LC-2010AHXXX2010BC”GMP（制实验室与物料系统）》分册要求，“含量”、“有关物质”及“A、B、C”项需确认项目如下：确认项目含量有关物质A、B、C是否否是是是是是是否是是确认目的XXXA、B、C司实验室的适用性。确认范围本确认方案适用于XXX产品含量及有关物质A、B、C、的检验方法进行确认。确认小组成员与职责部门及职务部门及职务确认工作中职责确认执行人：负责起草确认方案，执行确认方案，负责验检验员证过程中相关的检验操作，收集整理数据，起草确认报告。负责确认方案、确认报告审核；审核确认过程中发生偏差的解质量保证部决方案，以及采取纠正行动。确认小组组长：组织确认实施，负责确认方案的审核、组织起检验室主任草确认报告并审核。质量负责人确认总负责人：负责确认方案、报告的批准确认方案的起草与审批确认方案的起草与审批：确认方案由检验室起草，确认小组会审，质量负责人批准实施。确认方案的培训：确认方案经批准后，实施前由确认方案的起草部门组织确认方案的参与者进行培训。确认方案的修改：确认方案如需修改，由质量负责人批准实施，在确认报告中体现。进度计划整个确认活动实施时间：确认时间：从 年 月 日至 年 月 日起草报告：从 年 月 日至 年 月 日确认内容确认前仪器及材料检查确认前，对下列试验用仪器和材料进行检查岛津 高效液相色谱仪TG-332A7.1.1.3色谱柱：C18（*250㎜）XX羟苯甲酯对照品、羟苯乙酯对照品、羟苯乙酯对照品、庚烷磺酸钠，乙腈（色谱级，甲醇（色谱级，磷酸二氢钾、三乙胺、磷酸、蒸馏水其他一些辅助的玻璃仪器（如量瓶、移液管等）证要求且在效期内；色谱柱使用状态正常。1确认涉及文件检查确认前，对与此次确认相关的文件进行检查7.2.1.1XXX（KY-ZL-SOP-CP-00400）型高效液相色谱系统标准操作及维护保养规程（KY-SB-SOP-JY-03700）型高效液相色谱系统维护保养及清洁操作规程（KY-WS-SOP-JY-03700）TG-332A（KY-SB-SOP-JY-02300）TG-332A（KY-WS-SOP-JY-02300高效液相色谱法标准操作规程（KY-ZL-SOP-ZK-03300）7.2.1.7XXXHPLC（KY-YZ-SOP-JY-00400）7.2.1.8XXX（KY-SC-JB-GY-00400）7.2.1.9（确认）管理程序（KY-ZL-SMP-05800）可接受标准：所有文件都应为现行版本，且经过批准。2人员培训确认检查并确认所有参与执行确认的人员是否已得到培训，并在培训记录上签字。可接受标准：验证小组成员均已经过培训，并在培训记录上签字。3《人员培训、参与情况确认记录》中。确认项目“含量”项确认重复性/准确度7.4.10.5g按照XXX产品生产工艺规程（KY-SC-JB-GY-00400）配制加注射用水至1000ml。7.4.1X1ml1ml2S-1、S-2（100%。7.4.1X80%、100%、120%3A-1、A-2、A-3、A-4A-5、A-6、A-7、A-8、A-9。7.4.1.照《高效液相色谱仪标准操作规程》测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为L庚烷磺酸钠缓冲溶（取磷酸二氢钾用L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至再加三乙胺5ml，混匀，用磷酸调节PH值至，流动相B为甲醇；检测波长为277nm；按下表进行线性梯度洗脱。另取产品X对照品、产品X二醇物对照品、对硝基苯甲醛对照品、羟苯甲酯、羟苯乙酯与羟苯丙酯对照品各适量，加甲醇适量（产品X每10mg加甲醇1ml）使溶解，用流动相定量稀释成每1ml中含产品、产品X二醇物40ug与对硝基苯甲醛3ug、羟苯甲酯40ug、羟苯乙酯50ug和羟苯丙酯20ug的混合溶液。精密吸取该溶液10 l注入色谱仪，作为系统适用性溶液。记录色谱图。各相邻峰间的分离度均应符合要求（应大于。时间（分钟）流动相A(%)流动相B(%)068321568324035655068326068327.4.1A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-91ml10ul，录色谱图。S-110ul，2S-210ul，1A-1A-2A-3A-4A-5A-6A-7A-8A-9注入液相色谱仪，记录色谱图。S-1S-2FA-1、A-2A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9结果计算含量（cx）=CR×Ax/ARcx 为供试品的浓度；CR 为对照品的浓度；Ax 为供试品的峰面积；AR 为对照品的峰面积。7.4.1A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9度的含量均应在标示量的±3%，RSD%值应≤%。7.4.1.确认记录和数据确认数据和结果记录于附件4《含量精密度/准确度确认数据和结果》中。专属性7.4.1.测试方法：7.4.117.4.1.（用成品即可）A-B（68：32）1mlX0.1mg10ul，1X7.4.1X1mlX0.1mg1XXX确认记录和数据57.4.2“有关物质”及“A、B、C”项确认专属性精密量取样品（用成品即可）用流动相1ml产品的溶液，作为供试品溶液。7.4.2.XX（X10mg1mlX40ug3ug40ug50ug20ug项下的色谱条件，取对照品溶液10ul，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使产品X二醇物的峰高约为满量程的64%。7.4.2.10ul，1记录色谱图。7.4.2.可接受标准：供试品图谱中产品XX羟苯乙酯和羟苯丙酯各峰的保留时间与系统适用性图谱中相对峰的保留时间一致。溶剂空白相应位置无峰的干扰。7.4.2.确认记录和数据确认数据和结果记录于附件5《专属性确认数据和结果》中。精密度7.4.27.4.2D-2。7.4.21ml6B-1～B-6。7.4.2.D-12，D-21B-1～B-67.4.2.各相邻峰之间的分离度应≥7.4.2D-1D-2FB-1、B-2、B-3B-4、B-5、B-6X

×C二醇物

/S二醇物对照

×C二醇物对照

×100%供试品对硝基苯甲醛（%）=S

×C对硝基苯甲醛

/S对硝基苯甲醛对照

×C对硝基苯甲醛对照

供试品

×100%羟苯甲酯羟苯乙酯

×C羟苯甲酯×C

/S羟苯甲酯醛对照/S

×C羟苯甲酯对照×C

×100%供试品×100%羟苯丙酯（%）=S

羟苯乙酯×C羟苯丙酯

羟苯乙酯对照/S羟苯丙酯对照

羟苯乙酯对照×C羟苯丙酯对照

供试品×100%供试品7.4.2.可接受标准：6个样品B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6含量的RSD%值应≤%。7.4.2.确认记录和数据确认数据和结果记录于附件6《有关物质及A、B、C精密度确认数据和结果》中。v1.0可编辑可修改定量限7.4.2X1mlX40ug10（即产品X10，对应的浓度为该组分的最小定量浓度(Cm)，重复进样3次，记录色谱图。27.4.21ml3ug10（10，对应的浓度为该组分的最小定量浓度(Cm)，重复进样3次，记录色谱图。27.4.2.因本公司产品中加入的是羟苯乙酯，故只做羟苯乙酯的定量限，上述色谱条件1ml50ug10（10(Cm32记录色谱图。7.4.2.计算公式式中：h：测试溶液中产品X二醇物、对硝基苯甲醛的峰高；ih：基线噪声的峰高；bh：空白溶液的色谱图中基线的峰高。07.4.2.可接受标准：上述杂质的定量限应小于产品中各类杂质限度标准的10%。7.4.2.确认记录和数据确认数据和结果记录于附件7《定量限确认数据和结果》中。变更与偏差若确认方案需要变更，须按方案制定时的审批程序进行批准；若系统发生重大变更，应重新制定确认方案。10PAGEPAGE22确认过程中应严格按照本确认方案执行，出现个别项目不符合标准结果时，应按偏差管理规程进行处理，有异常事项未解决时，不得进行下一步的工作。所有偏差、异常情况处理过程均应记录备案，并登记到附件8中。确认的结果与评价报告由质量保证部和检验室主任对分析方法确认的结果进行审核，检查所有测试项目已经完成；变更和偏差都已经得到解决和批准；每个项目均应符合它们的确认可接受9确认合格证书确认的结果与评价报告经批准人批准签字后，质量受权人签发验证合格证书。附件10。附件目录附件附件1 确认前仪器及材料检查附件2 确认前文件检查表

附件名称名称仪器编号证书编号有效期至附件3 人员培训、参与情况确认记录附件4 含量精密度/准确度确认数据和结果附件5 专属性验证数据和结果附件6 有关物质及A、B、C精密度确认数据和结附件7 定量限确认数据和结果附件8 变更偏差情况确认记录附件9 确认结果与评价报告附件10确认合格证书附件1确认前仪器及材料检查表2

文件名称

文件编号

是否现行文本检验方法验证（确认）管理程序TG-332A

KY-ZL-SMP-05800KY-SB-SOP-JY-02300确认标准确认所用的仪器经过校验且在有效期内，试药、试液均在有效期内，标准滴定液经过标定且在有效期内。确认标准确认所用的仪器经过校验且在有效期内，试药、试液均在有效期内，标准滴定液经过标定且在有效期内。确认结论：确认结果/日期/日期LC-2010AHT型高效液相色谱系统标准操作规 程LC-2010AHT型高效液相色谱系统维护保养及LC-2010AHT型高效液相色谱系统维护保养及清洁标准操作规程高效液相色谱法标准操作规程KY-SB-SOP-JY-03700KY-ZL-SOP-ZK-03300XXXKY-ZL-SOP-CP-00400XXXKY-SC-JB-GY-00400XXXHPLCKY-YZ-SOP-JY-00400检查人检查日期检查结果附件3部门检验室

人员培训、参与情况确认记录日 期职务检验室主任

培训人部门检验室检验室质量保证部质量保证部

职务检验员检验员质监处处长质量授权人

受培训并参与方案实施人员确认标准确认标准确认结果到培训，并在培训记录中签字。确认结论：/日期/日期附件4含量精密度/准确度确认数据和结果1S-1No123平均值RSD产品X峰面积2S-2No12平均值RSD产品X峰面积380%浓度NoA-1A-2A-3平均值RSD含量产品X峰面积4100%浓度产品X峰面积NoNoA-4A-5A-6平均值RSD含量X5120%浓度NoNoA-7A-8A-9平均值RSD含量X6确认结论可接受标准RSD%各浓度的含量均应在标示量的±3%确认结论：

验证结果 是否符合检查人/日期 复核人/日期附件5确认项目对照品确认项目对照品样品保留时间检验结果检验人检验日期含量专属性XX对硝基苯甲醛专属性羟苯甲酯羟苯乙酯羟苯丙酯检验人/日期复核人/日期备注附检验原始记录确认结论：确认结论：/日期/日期有关物质及A、B、C精密度确认数据和结果1 D-1NoNo123RSD平均值X羟苯乙酯的峰面积羟苯丙酯的峰面积2 D-2No

1 2 RSD 平均值X羟苯甲酯的峰面积NoNoX的峰面积对硝基苯甲醛的峰面积羟苯甲酯的峰面积羟苯乙酯的峰面积羟苯丙酯的峰面积B-1B-2B-3B-4B-4B-5B-6RSD平均值含量4确认结论可接受标准可接受标准验证结果是否符合RSD%值应≤%确认结论：/日期/日期附件7定量限验证数据和结果1.定量限测定结果项目项目名称信噪比（ g/mL）X对硝基苯甲醛羟苯乙酯检验人/日期复核人/日期2确认结论确认结论：确认结论：检查人/日期复核人/日期8

变更偏差情况记录序号序号发生日期偏差/变更内容描述处理措施签名/日期确认