GMP质量体系虫草头孢菌粉检验操作规程

PAGE4PAGE1目的：为检验虫草头孢菌粉规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。范围：适用于虫草头孢菌粉的检验。职责：检验室主任、检验员。规程：1． 性状 本品为黄棕色至深棕色的粉末。2．鉴别2.1 试剂与仪器2.1.1 无水乙醇 2.1.2 茚三酮试液2.1.3 冰醋酸 2.1.4 醋酐2.1.5 硫酸 2.1.6 亚甲蓝试液2.1.7 玻片 2.1.8 滴管2.1.9 刻度移液管 2.1.10 试管2.1.11 显微镜 2.1.12 漏斗，漏斗架2.1.13 滤纸 2.1.14 烧杯2.1.15 电子天平(万分之一克)2.2 项目与步骤2.2.1 取本品涂片加亚甲蓝试液染色，镜检可见有隔，多核，分枝的菌丝体。2.2.2 称取本品约0.5g置试管中加无水乙醇5ml，振摇提取20分钟，滤过，取滤液1ml，加茚三酮试液1ml水浴加热数分钟后，即显蓝紫色。2.2.3 取鉴别⑵项下的滤液1ml，蒸干，残渣加冰醋酸1ml溶解，加醋酐1ml加硫酸1滴。初现黄色，渐变红色，紫色，蓝色，墨绿色。2.2.4 在腺苷含量测定项下记录的色谱图中，供试品中应有与对照品峰的保留时间一致的峰。3．检查3.1 试剂与仪器3.1.1 称量瓶 3.1.2 恒温干燥箱3.1.3 坩埚 3.1.4 茂福炉3.1.5 电子天平(万分之一克)3.2 项目与步骤3.2.1 干燥失重 称取本品置称量瓶中，精密称定，按干燥失重（SOP-QC-325-00）测定，在105℃干燥到恒重，减失重量不得过7.0%为符合规定。3.2.2 炽灼残渣：取本品约1g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，照炽灼残渣检查(SOP-QC-327-00)，在700～800℃炽灼至恒重为符合规定。4．含量测定4.1 试剂与仪器4.1.1 C18硅胶色谱柱 4.1.2 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液4.1.3 0.01mol/L磷酸钠溶液 4.1.4 腺苷对照品4.1.5 高碘酸钠溶液 4.1.6 碘化钾试液，淀粉指示液，硫醇4.1.7 硫代硫酸钠滴定液 4.1.8 容量瓶(50ml)，碘瓶(250ml)4.1.9 酸式滴定管 4.1.10 电子天平(万分之一克)，称量瓶4.1.11 注射器(10ml)，过滤器，滤膜 4.1.12 高效液相色谱仪4.1.13 水浴箱4.2 腺苷按高效液相色谱法（SOP-QC-306-00）检测4.2.1 色谱条件和系统适用性试验 用C18硅胶色谱柱(PH适应范围应大于8)，流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇(85:15)。流速为1.0ml/min；检测波长为260nm。量取腺苷对照溶液[※]20μl；注入液相色谱仪，理论板数按腺苷峰计算应不低于20004.2.2 腺苷对照溶液和样品溶液的制备以及测定 [※]腺苷对照溶液的制备 精密称取腺苷对照品0.25g置50ml量瓶中，加0.01mol/L磷酸钠溶液适量，充分振摇后，超声提取20分钟，放冷，用0.01mol/L磷酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。 样品溶液的制备与测定 取本品约0.25g精密称定置50ml量瓶中，加0.01mol/L磷酸钠溶液适量，充分振摇后，超声提取20分钟，放冷，用0.01mol/L磷酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，作为样品溶液。量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，将腺苷对照溶液按同法测定。按下式计算本品中腺苷（C10H13N5O4）的折干含量，不得少于0.2%为符合规定。 Cd：本品的折干含量 CW：本品的湿品含量 B%：本品的含水百分数 A1：样品溶液中腺苷色谱峰面积或峰高； A2：腺苷对照溶液中土霉素的色谱峰面积或峰高； W1：样品的称样量(g)； W2：腺苷对照品的称样量(g)； C2：腺苷对照品中腺苷的含量(%)； 允许差：本法的相对偏差不得超过2.0%。4.3 甘露醇类物质4.3.1 高碘酸钠(钾)溶液的制备：取硫酸溶液（1-20）90ml与高碘酸钠（钾）溶液（2.3→1000）110ml混匀即得。4.3.2 碘化钾试液的制备：取碘化钾16.5g加水使溶解成100ml即得。4.3.3 硫代硫酸钠（0.02mol/L）滴定液的制备：按硫代硫酸钠滴定液（SOP-QC-10-353-00）的制备方法配制，即得。4.3.4 淀粉指示液的制备：取可溶性淀粉0.5g加水5ml搅匀后，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。4.3.5 供试品溶液的制备：精密量取腺苷含量测定项下的供试品溶液10ml置碘瓶中，精密加入高碘酸钠（钾）溶液50ml，置水浴上加热15分钟，放冷，加碘化钾试液10ml，密塞放置5分钟，即得。4.3.6 空白试液的制备：精密量取高碘酸钠（钾）溶液50ml置碘瓶中，置水浴上加热15分钟，放冷，加碘化钾试液10ml密塞放置5分钟，即得。4.3.7 滴定：供试品溶液及空白试液用硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液1ml，继续滴定至蓝色消失，每1ml硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L）相当于0.3643mg的C6H14O6。按干燥品计算含甘露醇类物质以