GMP质量体系利福平检验操作规程

PAGE3PAGE1目的：为检验利福平规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。范围：适用于利福平的检验。职责：检验室主任、检验员。规程：1.性状：本品为鲜红色或暗红色的结晶性粉末；无臭，无味。本品在氯仿中易溶，在甲醇中溶解，在水中几乎不溶。2.鉴别：2.1试剂与仪器2.1.1盐酸溶液(0.1mol/L)2.1.2甲醇乙腈2.1.3亚硝酸钠溶液(0.1mol/L)2.1.4利福平对照品2.1.5烧杯(50ml) 2.1.6电子天平(万分之一克)2.1.7红外分光光度计 2.1.8高效液相色谱仪2.2项目与步骤显色反应：称取本品约5mg，加0.1mol/L盐酸2ml溶解后，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液2滴，即由橙色变为暗红色为符合规定。高效液相色谱鉴别：在含量测定项下的色谱图中，样品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致为符合规定。红外光吸收图谱的鉴别：称取本品约1.5mg，照红外分光光度法(SOP-QC-302-00)检测，本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致为符合规定。3．检查3.1试剂与仪器3.1.1液体石蜡 3.1.2硝酸硫酸3.1.3标准铅溶液(10µl/Ⅰ) 3.1.4注射器(1ml)3.1.50.1%阿拉伯胶溶液3.1.6 烧杯（10ml）3.1.7扁形称量瓶3.1.8 载玻片3.1.9酸度计 3.1.10电子天平(万分之一克)3.1.11偏光显微镜 3.1.12马福炉3.1.13烘箱 3.1.14研钵3.2项目与步骤3.2.1结晶性：取本品约0.1mg，置载玻片上，加液体石蜡1滴，使悬浮，在偏光显微镜下，按结晶性检查法(SOP-QC-345-00)检测，应呈双折射和消光位现象为符合规定。3.2.2酸度：称取本品约0.5g，置100ml烧杯中，加新沸过冷水50ml振摇使溶解，按PH值测定法(SOP-QC-312-00)测定，PH值应为4.0-6.5为符合规定。3.2.3干燥失重：精密称取本品约1.0g，置已干燥至恒重的扁形称量瓶中，在105℃干燥至恒重，按干燥失重测定法（SOP-QC-325-00）测定，减失重量不得过1.0%为符合规定。3.2.4炽灼残渣：精密称取本品约1.0g，按炽灼残渣检查法（SOP-QC-327-00）测定，样品遗留残渣不得过0.1%为符合规定。3.2.5重金属：取炽灼残渣项下遗留的残渣,按重金属检查法（SOP-QC-322-00）第二法测定，含重金属不得过百万分之二十为符合规定。4．含量测定4.1试剂与仪器4.1.1利福平对照品、醌式利福平对照品 4.1.2 甲醇4.1.3甲醇-乙腈-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0mol/L枸椽酸溶液(30：30：26：4)4.1.4辛基硅烷键合硅胶柱 4.1.5 容量瓶(50ml,250ml)4.1.6单标移液管(25ml) 4.1.7 电子天平(万分之一克)4.1.8注射器(10ml),过滤器，滤膜 4.1.9 高效液相色谱仪4.2检验步骤按高效液相色谱法（SOP-QC-306-00）检测。4.2.1色谱条件和系统适用性试验用辛基硅烷键合硅胶柱，流动相为甲醇-乙腈-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液-1.0mol/L枸椽酸溶液(30：30：26：4)，流速为1.0ml/min，检测波长为254nm。量取利福平对照品与醌式利福平对照品等体积混合液[*]10μl，注入液相色谱仪，利福平峰与醌式利福平峰的分离度应大于4.0。理论板数按利福平峰计算应不低于1500。4.2.2利福平对照品、醌式利福平对照品溶液和样品溶液的制备以及测定利福平对照品溶液和醌式利福平对照品溶液的制备: 精密称取利福平对照品约20mg，置250ml容量瓶中，加甲醇10ml溶解后，加流动相稀释至刻度，摇匀，此为对照品溶液。精密称取醌式利福平对照品约20mg，置250ml容量瓶中，加甲醇10ml溶解后，加流动相稀释至刻度，摇匀。[*]精密吸取利福平对照品溶液和醌式利福平对照品溶液各25ml，置同一50ml容量瓶中，摇匀。样品溶液的制备与测定:精密称取本品约20mg，置250ml容量瓶中，加甲醇10ml溶解后，加流动相稀释至刻度，摇匀，此为样品溶液。立即取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；将利福平对照品溶液按同法测定，按下式计算本品中利福平（C43H58N4O12）折干含量，不得少于90.0%为符合规定。Cd：本品的折干含量；CW：本品的湿品含量；B%：本品的含水百分数；A1：样品溶液中利福平色谱峰面积或峰高；A2：利福平对照品溶液中