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文档简介

全血细胞分析WBC散点图检测办法、检测原理及常见常见异常散点图全血细胞分析仪都带有WBC散点图,散点图可以提供很多信息。WBC散点图运用流式细胞计数法和其它生物粒子的物理和化学性质进行检测。血液标本经吸取稀释后,进行化学染色,血细胞在鞘流内的试剂包裹下排成一行通过检测小孔,并有半导体激光束照射到血细胞上。当血细胞经过激光通路时,光束在每个血细胞的不同方向上产生光散射,通过检测散射光,将光信号转化为电脉冲,可以得到有关细胞体积大小和材质的信息,进而描画出二维的散点图。

WBC散点图怎么看当一束激光照射到血细胞颗粒上时,产生光散射,散射光的强度取决于诸如颗粒直径和观察角度等因素。仪器对前向散射光(FSC)进行检测,提供有关血液细胞体积大小的信息;同时对侧向散射光(SCC)进行检测,提供细胞内部(如细胞核、颗粒)的信息。当光照射到经过荧光染色的血细胞等的荧光材料上时,就会产生比入射光波长更长的光。随着染液浓度的增加,荧光强度也随之增长。通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色程度的信息。荧光向所有方向散射,本仪器检测侧向荧光(SFL)。

图1.白细胞散点图横坐标:SSC轴,代表侧向散射光的信号强度

纵坐标:SFL轴,代表侧向荧光的信号强度

散点图中,利用侧向散射光SSC和荧光SFL将白细胞分成五类:中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞。

侧向散射光SSC通常反映细胞内部颗粒结构的复杂程度。例如,嗜酸性粒细胞由于内部颗粒特征明显,其侧向散射光(SSC)信号最强,落在散点图的最右方。

荧光染料通常和细胞中的DNA/RNA核酸结合,所以侧向荧光信号SFL通常反映核酸含量多少,反映细胞发育的成熟程度。占白细胞最大比例的粒细胞完整的生长要历经原粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞进而分化为成熟的杆状核和分叶核粒细胞。在粒细胞的成熟过程中,其细胞中的核酸含量逐步减少。由于嗜碱性粒细胞的比例很小,而且通常和中性粒细胞混在一起,很难区分。通常采用另外一个专用的通道(WNR通道)进行检测。所以五分类通道(WDF通道)通常提供白细胞的四种分类(中性、单核、淋巴、嗜酸)。

图2.嗜碱性粒细胞散点图

常见异常散点图

疑似异常淋巴细胞增多(WDF通道)

在单核细胞散点图(绿色)的上方出现异常均匀分布的呈长椭圆形或近似长方形的散点图(图中所圈位置),可能是由于病原体对淋巴细胞刺激下,核酸与染液结合加强,侧向荧光(SFL)染色强度增加,侧向荧光(SFL)加强,而出现在散点图上方,需进行血涂片复检。

图3.疑似淋巴细胞增多(WDF通道)疑似有核红细胞增多(WNR检测通道)出现于嗜碱细胞散点图(蓝色)左上方,颗粒增多,区域扩大(图中所圈位置),需进行血涂片复检。

图4.疑似有核红细胞增多(WNR检测通道)

疑似嗜碱粒细胞增多(WNR通道)

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