GB/T 18638-2021流行性乙型脑炎诊断技术

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T18638—2021

代替

GB/T18638—2002

流行性乙型脑炎诊断技术

DiagnostictechniquesforJapaneseencephalitis

2021-03-09发布2021-10-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T18638—2021

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

缩略语

3……………………1

临床诊断

4…………………1

实验室诊断样品采集及处理

5……………2

病毒分离鉴定

6……………3

病毒检测方法

7RT-PCR…………………5

补体结合试验检测方法

8…………………7

血凝抑制试验检测方法

9…………………9

间接抗体检测方法

10ELISA……………11

间接免疫荧光试验检测方法

11(IFA)…………………13

病毒中和试验检测方法

12………………14

综合判定

13………………16

附录规范性附录病毒检测方法试验用试剂配制

A()RT-PCR……17

附录规范性附录补体结合试验检测方法和血凝抑制试验检测方法用试剂配制

B()………………18

附录规范性附录补体结合试验检测方法的预备试验

C()……………20

附录资料性附录补体结合试验检测方法及血凝抑制试验检测方法结果判定示意图

D()…………23

附录规范性附录间接抗体检测方法试验用试剂配制

E()ELISA…………………24

附录规范性附录间接免疫荧光试验检测方法试验用试剂配制

F()(IFA)…………26

GB/T18638—2021

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准代替流行性乙型脑炎诊断技术与相比除编辑

GB/T18638—2002《》,GB/T18638—2002,

性修改外主要技术变化如下

,:

增加了规范性引用文件见第章

———“”(2);

增加了缩略语见第章

———“”(3);

增加了病毒检测方法见第章

———“RT-PCR”(7);

增加了间接抗体检测方法见第章

———“ELISA”(10);

增加了间接免疫荧光试验检测方法见第章

———“(IFA)”(11);

增加了病毒中和试验检测方法见第章

———“”(12);

增加了病毒检测方法试验用试剂配制见附录

———RT-PCR(A);

增加了补体结合试验检测方法及血凝抑制试验检测方法结果判定示意图见附录

———(D);

增加了间接抗体检测方法试验用试剂配制见附录

———ELISA(E);

增加了间接免疫荧光试验检测方法试验用试剂配制见附录

———(IFA)(F)。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所温州大学华中农业大学吉林

:、、、

大学

。

本标准主要起草人金宁一肖朋朋鲁会军曹胜波黄少梅张英田明尧李霄李昌

:、、、、、、、、。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为

:

———GB/T18638—2002。

Ⅰ

GB/T18638—2021

引言

流行性乙型脑炎又称日本乙型脑炎是由流行性乙型脑炎病毒引起的一种

(Japaneseencephalitis),

蚊媒性人兽共患传染病马呈现脑炎症状猪表现流产死胎和睾丸炎其他家畜和家禽大多呈隐性感

。,、,

染有明显的季节性于夏秋季多发本病分布很广主要存在亚洲地区给人畜健康和国民经济造成

。,、。,,

很大的危害和损失

。

引起本病的病原体为流行性乙型脑炎病毒Jaaneseencehalitisvirus该病毒属于黄病毒科

(pp),

Flaviviridae黄病毒属Flavivirus是一种单股病毒病毒粒子呈球形有脂蛋白的囊膜具

()(),RNA,,,

有血凝活性能凝集鸡鸭鹅及绵羊红细胞该病毒对外界抵抗力不强对化学药品较敏感常用消毒

,、、。,,

药都有良好的灭活作用对胰酶乙醚三氯甲烷等亦敏感

,、、。

世界动物卫生组织推荐采用病毒分离鉴定免疫荧光试验血凝抑制试验补体结合试验血

(OIE)、、、、

清中和试验等方法进行诊断我国对该病的研究报道较多目前比较常用的诊断方法仍是本标准规定

。,

的临床诊断病毒分离鉴定血凝抑制试验补体结合试验试验间接试验间接免疫

、、、、RT-PCR、ELISA、

荧光试验和病毒中和试验进行病毒分离鉴定时要求所有样品处理应在可保证生物安全的相应级别

。,

实验室内进行操作处理样品使用过的容器物品实验材料均应经有效消毒处理后方可运离实验室

;、、。

本标准的修订参考了陆生动物诊断试验和疫苗标准手册版

OIE《》2018(ManualofDiagnostic

并结合了我国相关技术研究新成果本标准的实施

TestsandVaccinesforTerrestrialAnimals,2018),。,

对提高流行性乙型脑炎的诊断和疫情预测水平及时采取防制措施保证人畜健康将起到重要作用

,,,。

Ⅱ

GB/T18638—2021

流行性乙型脑炎诊断技术

1范围

本标准规定了流行性乙型脑炎的临床诊断和实验室诊断的技术要求

(Japaneseencephalitis,JE)。

本标准适用于猪马骡驴牛羊狗鸭鹅和鸟等动物的流行性乙型脑炎的诊断和检疫

、、、、、、、、。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

出入境动物检疫采样

GB/T18088

实验室生物安全通用要求

GB19489

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

硼酸盐缓冲液

BBS(boratebufferedsaline)

补体结合试验

CFT(complementfixationtest)

细胞病变效应

CPE(cytopathiceffect)

焦碳酸二乙酯

DEPC(diethylpyrocarbonate)

脱氧核糖核酸

DNA(deoxyribonucleicacid)

脱氧核糖三磷酸

dNTP(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

酶联免疫吸附试验

ELISA(enzymelinkedimmunosorbentassay)

异硫氰酸荧光素

FITC(fluoresceinisothiocyanate)

辣根过氧化物酶

HRP(horseradishperoxidase)

流行性乙型