标准解读

《GB/T 25876-2010 牛早期胚胎性别的鉴定 巢式PCR法》是一项国家标准，旨在提供一种通过巢式聚合酶链反应（Nested PCR）技术来鉴定牛早期胚胎性别的方法。该标准适用于实验室条件下对牛早期胚胎进行性别鉴定。

根据此标准，首先需要从牛的早期胚胎中提取DNA。然后，采用特定引物通过两轮PCR扩增目标序列，第一轮使用一对外部引物扩增较大片段，第二轮则利用内部引物对第一轮产物中的特定区域进一步放大。这种方法能够提高检测灵敏度和特异性，从而更准确地识别胚胎性别相关基因片段。

整个过程包括样品准备、DNA提取与纯化、设计合适的引物序列、执行巢式PCR反应以及最后的结果分析等步骤。其中，选择恰当的引物对于确保实验成功至关重要。此外，还需注意控制实验条件如温度循环参数等，以保证扩增效率和准确性。

本标准还详细规定了质量控制措施和技术要求，比如如何避免污染、怎样设置阳性对照和阴性对照实验等，确保每次测试结果可靠有效。通过遵循这些指导原则，研究人员可以有效地利用巢式PCR技术来进行牛早期胚胎性别鉴定工作。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2011-01-10 颁布
  • 2011-06-01 实施
©正版授权
GB/T 25876-2010牛早期胚胎性别的鉴定巢式PCR法_第1页
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文档简介

ICS6502030

B43..

中华人民共和国国家标准

GB/T25876—2010

牛早期胚胎性别的鉴定巢式PCR法

MethodofnestedPCRforsexidentificationofearlycattleembryo

2011-01-10发布2011-06-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

牛早期胚胎性别的鉴定巢式PCR法

GB/T25876—2010

*

中国标准出版社出版发行

北京复兴门外三里河北街号

16

邮政编码

:100045

网址

电话

:6852394668517548

中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷

各地新华书店经销

*

开本印张字数千字

880×12301/160.57

年月第一版年月第一次印刷

2011220112

*

书号

:155066·1-41599

如有印装差错由本社发行中心调换

版权专有侵权必究

举报电话:(010)68533533

GB/T25876—2010

前言

本标准的附录为规范性附录附录为资料性附录

B,A。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口

。

本标准起草单位华中农业大学

:。

本标准主要起草人张淑君杨利国李翔刘辉刘文举胡修忠

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T25876—2010

牛早期胚胎性别的鉴定巢式PCR法

1范围

本标准规定了牛早期胚胎性别鉴定的巢式方法

PCR。

本标准适用于奶牛和肉牛胚胎或胎儿的性别鉴定

。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款凡是注日期的引用文件其随后所有

。,

的修改单不包括勘误的内容或修订版均不适用于本标准然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究

(),,

是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本标准

。,。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

。

31

.

巢式PCRnestedpolymerasechainreaction

利用两套引物巢式引物对进行两轮扩增反应在第一轮扩增中外引物用以产

PCR(PCR)PCR,,

生扩增产物此产物在内引物的存在下作为模板进行第二轮扩增

,,DNA,。

32

.

SRY基因SRYgene

哺乳动物染色体上决定雄性性别的基因

Y。

33

.

HBB基因HBBgene

珠蛋白基因位于常染色体上

β,。

4原理

利用巢式反应的敏感性高和特异性强的特性对少量胚胎细胞的SRY基因片段进行扩增以

PCR,,

HBB基因的扩增作为阳性参照电泳检测扩增产物根据扩增产物电泳条带鉴定胚胎性别

,PCR,。

5引物

SRY

15′CTACTCCCCAACCGTCAGAAC3′

5′AGCCCAAACCCATCAACCTA3′

SRY

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