标准解读

《GB/T 38481-2020 微生物超低频突变测定 双重测序法》是一项国家标准，旨在提供一种准确检测微生物中发生的超低频率突变的方法。该标准详细描述了如何通过双重测序技术来识别和量化这些罕见的基因变异。

在标准文件中，首先定义了一些关键术语，比如“超低频突变”指的是在群体中的发生率低于常规测序方法检测限值（通常为<0.1%）的遗传变化。“双重测序”则是一种能够提高检测灵敏度的技术手段，它通过两次独立地对同一DNA片段进行测序，并比较结果来发现其中存在的差异点，从而实现对极低丰度突变体的有效捕捉。

接着，《GB/T 38481-2020》规定了一系列实验操作步骤，包括样本准备、文库构建、高通量测序以及数据分析等过程。特别强调了在整个流程中需要采取严格的质量控制措施以确保数据准确性与可靠性。例如，在样本处理阶段要求使用无菌技术和条件；文库制备时需注意避免交叉污染；而在数据分析环节，则推荐采用特定算法过滤掉可能由测序错误或PCR扩增偏倚引起的人工变异信号。

此外，该标准还提出了针对不同应用场景下选择合适对照品的重要性，以及如何合理设置实验参数以优化检测效率等方面的指导建议。通过遵循这些建议，研究者可以获得更精确的结果，进而支持科学研究或临床应用中对于微生物遗传多样性的深入理解。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2020-11-19 颁布
  • 2020-11-19 实施
©正版授权
GB/T 38481-2020微生物超低频突变测定双重测序法_第1页
GB/T 38481-2020微生物超低频突变测定双重测序法_第2页
GB/T 38481-2020微生物超低频突变测定双重测序法_第3页
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文档简介

ICS07080

A21.

中华人民共和国国家标准

GB/T38481—2020

微生物超低频突变测定双重测序法

Determinationofultralow-frequencymutationsformicroorganisms—

Duplexsequencing

2020-11-19发布2020-11-19实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

微生物超低频突变测定双重测序法

GB/T38481—2020

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100029)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

:400-168-0010

年月第一版

202011

*

书号

:155066·1-63938

版权专有侵权必究

GB/T38481—2020

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中国标准化研究院提出并归口

。

本标准起草单位清华大学洛阳华清天木生物科技有限公司江汉大学中国标准化研究院

:、、、。

本标准主要起草人张翀邢新会李梅剪兴金王立言郭肖杰张乐乐彭海马爱进

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38481—2020

微生物超低频突变测定双重测序法

1范围

本标准规定了用双重测序法测定微生物超低频突变的方法

。

本标准适用于微生物基因组或基因片段超低频突变的测定

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

超低频突变ultralow-frequencymutations

化学物理或生物因素导致微生物发生的频率低于-5的永久性改变

、DNA1×10。

32

.

条形码标签barcodelabel

接在待测片段两侧的核苷酸片段用以标示同一扩增家族的协助进行突变位点的

DNA,DNA,

确认

。

33

.

互补标签家族complementarytagfamily

所有含两端互补条形码标签的片段

DNA。

34

.

双链同源序列double-strandconsensussequencesDCSs

;

带有相同条形码标签的双链序列包含反向互补链

DNA,。

4原理

在待测片段两端接上一段随机且互补的双链核苷酸条形码标签然后对所有带有条形

DNA12nt,

码标签的序列进行双重的高通量测序利用随机互补标签排除掉测序文库制备过程中所引入

。12nt,

的突变进而准确检测突变位点和突变率

,。

5试剂

除非另有规定仅使用分析纯试剂

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 各类标准

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