标准解读
《GB/T 40251-2021 牡蛎单孢子虫病诊断规程 原位杂交法》是一项国家标准,旨在规范使用原位杂交技术对牡蛎中单孢子虫病进行检测的方法。该标准适用于海洋养殖环境中牡蛎的单孢子虫病监测及研究工作。
标准详细描述了从样品采集到结果分析的全过程。首先,在样品准备阶段,规定了如何正确收集、保存以及处理待检牡蛎样本,确保后续实验能够准确无误地进行。接着,对于探针的设计与合成也给出了明确指导,要求选择特异性高且能有效识别目标序列的DNA或RNA片段作为探针,并通过化学方法将其标记上可以被显微镜观察到的颜色或荧光物质。
在操作流程部分,标准列出了具体的实验步骤,包括但不限于组织切片制备、脱蜡复水、预杂交处理、加标有探针的杂交液并保温一定时间以促进结合反应发生等环节。此外,还强调了洗涤条件的选择对于去除非特异性结合的重要性,并提供了推荐参数供参考。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2021-05-21 颁布
- 2021-12-01 实施
文档简介
ICS6502030
CCSB.41.
中华人民共和国国家标准
GB/T40251—2021
牡蛎单孢子虫病诊断规程
原位杂交法
CodeofdiagnosisforMSXdiseaseofoysters—Insituhybridizationmethod
2021-05-21发布2021-12-01实施
国家市场监督管理总局发布
国家标准化管理委员会
GB/T40251—2021
前言
本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规
GB/T1.1—2020《1:》
定起草
。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任
。。
本文件由中华人民共和国农业农村部提出
。
本文件由全国水产标准化技术委员会归口
(SAC/TC156)。
本文件起草单位中国水产科学研究院黄海水产研究所全国水产技术推广总站
:、。
本文件主要起草人白昌明杨冰王崇明黄倢李清万晓媛辛鲁生李晨余卫忠
:、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T40251—2021
牡蛎单孢子虫病诊断规程
原位杂交法
1范围
本文件规定了牡蛎单孢子虫病诊断规程中病原定位方法的要求针对主要病原尼氏单孢子虫
,
Halosoridiumnelsoni给出了原位杂交检测法所需试剂或材料仪器设备样品试验步骤和结果
(pp),、、、
判定
。
本文件适用于尼氏单孢子虫在牡蛎中感染程度的评估和确诊其他贝类也可参照执行
;。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文
。,
件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于
,;,()
本文件
。
牡蛎包纳米虫病诊断规程第部分组织印片的细胞学诊断法
SC/T7205.1—20071:
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义
。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件
。
碱性磷酸酶
AP:(alkalinephosphatase)
溴氯吲哚磷酸甲苯胺盐
BCIP:5--4--3--(5-bromo-4-chloro-3-indolylphosphatep-toluidinesalt)
戴维森氏乙醇福尔马林乙酸固定液
DAFA:--(davidson’salcohol-formalin-aceticacidfixative)
地高辛
DIG:(digoxigenin)
二水合乙二胺四乙酸二钠
EDTA-Na2·2H2O:(Ethylenediaminetetraaceticacid,disodiumdi-
hydrate)
六水合氯化镁
MgCl2·6H2O:(magnesiumchloridehexahydrate)
氯化钠
NaCl:(sodiumchloride)
十二水合磷酸氢二钠
Na2HPO4·12H2O:(sodiumphosphatedibasicdodecahydrate)
二水合柠檬酸三钠
Na3C6H5O7·2H2O:(sodiumcitratedihydrate)
氯化硝基四氮唑蓝
NBT:(4-Nitrobluetetrazoliumchloride)
磷酸二氢钾
KH2PO4:(potassiumphosphatemonobasic)
氯化钾
KCl:(potassiumchloride)
磷酸盐缓冲液
PBS:(phosphatebuffersalinebuffer)
枸橼酸钠缓冲液
SSC:
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