GMP质量管理体系文件 LC-10AD型高效液相色谱仪使用SOP

PAGELC-10AD型高效液相色谱仪使用SOP适用范围适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪使用与维护保养。职责检验员：严格按照SOP进行操作、维护，并作好记录。QC主管：监督检查SOP执行情况。主要技术指标波长范围：190～600nm波长准确度：±1nm带宽：8nm波长重复性：±0.1nm基线漂移：≤2×10-4AU/h基线噪声：≤±0.35×10-5AU光源：氘灯泵压力范围：0.1～39.2Mpa泵流量范围：0.001～5ml（0.1～39.2Mp）/min柱温箱温度范围：4～80℃使用环境环境温度：10～30℃，8小时内温度波动不超过±3℃。相对湿度：≤80%。电源电压：220±22V，电源频率：50±0.5Hz。使用方法接通电源，依次按检测器、泵、柱温箱的“power”键，开启仪器；打开计算机，启动CLASS-VP5.0。设定LC条件LC参数的设置默认方法文件（Defaultfile）读入启动CLASS-VP5.0，双击Instrument1，从菜单间选择File-Method-Open，然后读入Instrument1/DefaultMethod（默认文件）LC参数的变更选择菜单间的[Method]/[Instrument]，打开<InstrumentSetup>窗口，进行确认或变更各单元参数的设定。在通常分析中必设定的参数有：泵：送液方式、流速、最大、最小保护压力。检测器：检测波长、确认AcquisitionChannelOn设定Run时间，此时间的设定必须满足所有色谱峰。柱温箱：温箱温度（应在室温的基础上加10℃，以确保柱温箱温度的准确）。将做成的方法文件保存为了便于今后方法文件的调用，事先起好文件名字，下次，若打开此文件，则调出相对应的参数。保存方法如下：设定参数后，选择File/Method/SaveAs…输入名字后，击[保存]。直接控制（快捷键）选择菜单间的[Control]/[DirectControl]，使画面上表示直接控制钮。此键可进行SCL-10Avp的ActOn/Off检测器的零校正自动进样器的清洗等各单元的直接控制。设定报告书写方式分析开始前，设定报告书写方式，按如下2个步骤进行：设定即使不使用模板也可以制作报告书写方式，Report＞Print＞Area%(DetA)。（此报告模板不可修改）。设定能在分析完成后进行报告输出在CLASS-VP5上，可以设定是否分析后马上进行报告打印。从菜单间选择[Method]/[Properties]后,选择[Options]；确认[Analyzeafteracquisition]以及[Printafteranalyse]。标准试样的分析样品注入条件设定/开始分析（以单波长分析为例）触发方式的设定以启动方式设定[Method]/[Instrumentsetup]窗口中SCL-10Avp表的触发方式。选择[Manual]或[External]，前者适用于7725（手动）进样器方式，以CRT上的钮启动；后者适用于7725i（自动）进样器方式，用SCL-10Avp前面的[RUN]钮或背后的Inj.IN端子（使用位置读出开关时等）进行启动。定量分析击[Control]/[SingleRun]或“”图标，打开＜SingleRun＞窗口。设定MethodDatapathDatafile，击[Start]。Method等参数由SCL-10Avp向下输入后，Manual触发启动时，CRT画面上出现启动钮。注：在CLASS-VP5中，对于既存的数据文件禁止换写保存，但保存在“public”名目的数据文件夹下的数据则可以换写。变更有关数据处理参数如果目的峰未被正确识别时，有必要变更数据处理参数，进行再分析。CLASS-VP5的数据处理关联参数，有以下几种，分别设定在下述菜单处。参数区分设定地点波形处理参数方法波形处理指令图表(Method/IntegrationEvents)(对于方法文件的设定)手动波形处理图表(Data/Manual/IntegrationFixes)(只对于其数据进行设定)ID图表和检量线参数ID/集团图表波形处理参数波形处理有关参数，有几个分类，但通常设定在Default状态下，不必进行变更。并且，在Default状态下，设定了以下值。WIDTH：5；SLOPE：200；DRIET：0；T.DBL：1000需要变更设定时，在Method/IntegrationEvents或Data/ManualIntegrationFixes上以时间方式分别设定参数（Event）时间数值。Method/IntegrationEvents和Data/Manual/IntegrationFixes在波形处理中，两者的设定都适用，但方法波形处理表被记忆于方法文件中，而手动波形处理只适用于当前所表示的数据文件。ID组表数据表Method/Peaks/Groups变更数据处理参数后，选择菜单间的Analysis→Analyze，则可以用新的参数进行数据处理。制作ID（峰识别）图表选择对象峰在分析标准式样后的色谱图画面上击右手键，拉下菜单，选择[GraphicalProgramming][DefinePeaks]。在色谱图上点击所要定义的组份的开始点，然后点击所要定义峰的结止部分。〈DefinePeaks〉窗口显示出来,确定保留时间的时间带宽用于定量的数据（面积或高度最小峰面积）后按[OK]钮。标准峰的信息就被自动设定在ID图表上。作成ID图表从菜单间选择[Method]/[Peaks/Groups]，ID图表则被显示出来。在设定ID图表之前，为了使图表易看，击右标，在出现的拉下菜单的Properties上，只选择必要的项目。另外，关于最大水平数（工作点数），击项目名，可以变更水平数。在工作曲线上，设定必要的参数。因以GraphicalProgramming（图表设定）参数时，已设定了保留时间以及时间带宽，所以设定其他的参数（〈Units〉〈FirType〉〈Zero〉〈Level〉），一点工作曲线时，进行以下设定：〈FirType〉：直线；〈Zero〉：通过原点；〈Level〉：标准试料的对象成分浓度。定量分析和工作曲线的报告输出单浓度级别的校正曲线计算。如下进行定量分析和工作曲线的报告输出：调节器入标准色谱图，从菜单间选择Analysis-Analyse/SingleLerelCalibration；打开DataPath，打开DataFile找到采集的标准品文件名，击[Calibrate]后，再击[Clearallcalibration]。未知试样的分析只进行样品注入条件/分析开始的操作，同5.2.1。单一浓度级别的外标工作曲线法当以一个级别标准物质进行定量分析时，需先采集其色谱图，对其标准物质定义；在色谱图按右手键DefineSinglePeak或按快捷键DefineSinglePeak；按Next键找到标准物质的峰（标准物质的保留时间）输入峰名、标准浓度、相对应的单位；击DoneMethodPeaks/Groups，在FitType中确认Liner，zero确认过零点。将方法保存。从文件Date中调出未知样品Le-UV-Level-2-pac.dat；Analysis→Analyse，通过Report→View→Externalstandard显示报告。多组份、多级别物质的计算从File→Date中找到标准物质色谱图。选择所定义的最小峰面积，并确认Replaceexistingpeaksintable＞ok。填写ID表：Method→Peaks/Group，输入Name，Units，FitTypezero及Level浓度，并保存于方法文件中。编写Sequence（顺序表）＞Edit（编写）制定报告格式：Method→CrutomReport→File→ReportTemplate→Open→ExternalStandard，此报告模板为标准设制。如需添加删除可以人为自定义方式完成，在CustomReport下击右手键可InsertGraph→calibrationCurve等，也可以加入InsertReport→RunReport左右选择框中选择所要显示的内容。用左键将光标点入所需显示的框内，再击右键击ShowDateatDesignTime。内标工作曲线法调入标准品色谱图，并对其定义DefinePeaks（与外标法相同）在ID表（P