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ICS65.120天津市地DB12方标准DBT946—2020离子交换色谱法DeterminationofaminoacidsinfeedsIonexchangechromatography天津市市场监督管理委员会发布前言GBT1.1-2009给出的规则起草。。草单位：天津市畜牧兽医研究所。饲料中氨基酸的测定离子交换色谱法、测定步骤和结果计算。适用于饲料原料、配合饲料及浓缩饲料中氨基酸含量的测定。范性引用文件(包括所有的修改单)适用于本文件。GBT603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GBT682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GBT0195动物饲料试样的制备理常规酸水解法氧化酸解法将饲料蛋白中的含硫氨基酸(胱氨酸和蛋氨酸)用过甲酸氧化，使之转变为对酸稳定的氧化物，再碱水解法4试剂和材料GBT。molL酸500mL，用水稀释至1000mL，混匀。仪器说明书配制或购买。pH生液：按仪器说明书配制或购买。nmolL盐酸600mL，用水稀释至1000mL，混匀。molL称取一水合氢氧化锂167.8g，用水溶解并稀释至1000mL，混匀。4.11氢溴酸(48%)：分析纯。 mg水溶解并定容至250mL,浓度均为2.50µmol/mL，2℃~8℃保存，有效mg0.1mol/LL仪器设备5.1样品粉碎机。5.4恒温鼓风干燥箱。5.5氮吹仪。5.6旋涡混合仪。的采集与制备按GB/T14699.1采集样品；按GB/T20195制备样品，要求样品粉碎至过0.18mm孔径(80目)样品样品的水解常规酸水解法称取试样30mg~70mg(约含蛋白质5mg~20mg，精确至0.1mg)于25mL水解管中，准确加入10结果计算氧化酸解法称取试样50mg~100mg(约含蛋白质7.5mg~25mg，精确至0.1mg)于25mL水解管中，冰水浴盐酸溶液，充氮气约1min后拧紧瓶盖，将水解管放入110℃±1℃恒温干燥箱，水解22h~24h。冷却碱水解法称取试样50mg~100mg(约含蛋白质7.5mg~25mg，精确至0.1mg)于10mL聚四氟乙烯水解管h冷却至室温，用水将内容物转移到25mL容量瓶中，用盐酸溶液中和至pH值为6~7，定容，混匀。水解液的制备干2次~3次。准确加入2mL~5mL柠檬酸钠缓冲液，旋涡混合仪混匀，用0.22µm水系过滤器过滤到上测定按照仪器使用说明书放置茚三酮溶液与pH系列缓冲液、再生液，设置仪器色谱条件，将混合氨基积对比，计算分析，得出各氨基酸的含量，见图1。1计算方法氨基酸含量计算见式(1)。W(%)=..................................(1)A——每毫升上机水解液氨基酸的含量，ng；D稀释倍数；M——试样质量，mg。8.2允许差，相对偏差不大于4%。对于色氨酸，当含量小于0.2%时，两

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