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纸片扩散法药敏试验纸片扩散法药敏试验纸纸片扩散法(K-B法)药物敏感试验是在涂有细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有抗菌药的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈大小，并根据相关解释标准进行结果分析，从而得出受试菌株药物敏感性的结论。验敏感性的结论....1234基本信息论试验原理纸片扩散药敏试验的原理：将含有定量的抗菌药物的纸片贴在接种有待测菌的固体培养基上，通过抗菌药物在培养基上的扩散，观察是否出现抑菌环，推断是否抑制细菌的生长。药物扩散的距离越远，药物浓度越低抑菌能力越的抑制作用强弱。试验步骤(1)通用情况：从过夜孵育的平板，优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落，直接接25922大肠埃希菌(1-2)*1012CFU/mL浓度。(2)特殊情况：嗜血杆菌属(本程序中所指的嗜血杆菌仅包括流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌)：从过夜液中含有相当于ATCC25922大肠埃希菌(1-2)*1012CFU/mL浓度。(1)调整好悬液的浊度后，用无菌棉签浸入悬液内，紧贴试管内壁在液体上方旋转拭子数次，除去棉签上(2)用拭子划线整个琼脂表面，从平板顶部到底部，均匀涂布，重复两次此过程(一共三次)每次旋转平)，以便在放置含有药物的纸片前使琼脂吸收表面纸片完全接触无论是单独放置的纸片或有纸片分配设备纸片必须分布均匀，两纸片之间圆心的距离不少(1)通用情况：在放置好纸片后，15分钟内，将MH琼脂倒置于号孵箱(35℃)中，孵育16~18小时 (2)延长时间培养：①测试苯唑西林、头孢西丁对葡萄球菌的敏感性时，孵育时间必须达到24h，才能满径测量近的毫米数(读取一个整数)。没有肉眼可见的明显的生长的部位即是抑菌环的边缘。一般情况下，在抑菌环边缘出MH若出现单个菌落稀疏生长的情(2)特殊情况：①苯唑西林对葡萄球菌的抑菌环：抬起平皿，对向光源，利用透射光观察苯唑西林纸片周制剂的拮抗剂，会导致测试菌轻微的生长，因此，在测量复方新诺明的抑菌环直径时应当忽略细微的生长情况(约20%)，而将明显

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