碱性蛋白酶(Alkalineprotease,AKP)活性测定试剂盒说明书_第1页
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第第1页，共3页： 样碱性蛋白酶（ ）活性测定试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择 个预期差异大的样本做预测定。义：是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类，属于丝氨酸蛋白酶。此外，该酶还能够水解酯键、酰胺键，具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一，广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。原理：在碱性条件下， 在 定 算 自备仪器和用品：计皿 可式、水。试剂组成和配制：试剂一：×瓶，℃保存。试剂二：粉剂×瓶，℃保存。临用前加 水溶解。试剂三：粉剂×瓶，℃避光保存。临用前加入 试剂一，沸水中溶解。试剂四：粉剂×瓶，℃保存。临用前加 水溶解。试剂五：×瓶，℃保存。标准品：×支， μ 标准酪氨酸溶，℃保存。粗酶液提取：组织：按照组织质量（）：试剂一积 为： 的比例（建议称取约 组织，入 试剂一）冰匀浆， ，℃离心 ，取上清，即粗酶。血清或培养：直接测定。细菌、真菌：按照细胞数量（ 个）：试剂一积（为 ：的比例（建议入 率 声隔间 ；然后 ，℃，离心 ，取上清置于冰上待测。操作：分光光度计酶标仪预热，节波长到，水零。试剂二、试剂三试剂四置于℃水保温。对照取 加入μ 粗酶，μ试剂二，混匀后置于℃水保温；加入μ试剂三，混匀后，℃离心；取μ上清，加入新的，再加入μ试剂四，μ试剂五，混匀后置于温 μ于测定光吸收，记为。：取μ，μ试剂三，混匀后置于℃水保温；加入μ 后 ，心 取 μ 的入μ 试剂四，μ 试剂五，混匀后置于℃水保温 ，吸取 μ 于 测定取μ μ μ μ 取μ μ μ 温μ 公式：（ ×－对照÷－×÷ －－÷（ ×－对照÷－×稀释倍数÷× ÷ ÷ ×－对照÷－÷照液体体积升样（ ×－－÷÷ －－生（ －－×稀释倍数÷细胞数×÷÷ ×－对照÷－空÷细胞数量μ （÷ ；量；粗液质该粗液能直接质含另外；μ×；粗液总体积；反应时间孔板（ －－×÷ －－÷（ ×－对照÷－×稀释倍数÷× ÷ ÷ ×－对照÷－÷照液体体积升样（ ×－－）÷÷ －－）： 每 生 为（ －－）： μ （÷ ；；：粗酶液蛋白质浓度注意该粗酶液不能直接用于蛋白质含量测定需要另外测定；建议称取同样质量的样加入蒸馏水匀浆提取离心后用本公司蛋

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