维生素类药物分析课件

第九章维生素类药物

的分析主要内容维生素A维生素D维生素E维生素B维生素C脂溶性水溶性维生素维持人体正常生理机能所必须的生物活性物质40%谷类和麦类主食12%水果18%蔬菜10%肉类、蛋类制品10%乳类制品10%油、脂肪及甜品人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。例如：VA——夜盲症VB1——脚气病VD缺乏——佝偻病按溶解性分类脂溶性：VA、VD、VE、VK等水溶性：B族，VC、烟酸、叶酸、泛酸等维生素A的分析结构特点：具有共轭多烯侧链的环己烷，有多种异构体性质：有强紫外吸收，易被氧化，脂溶性维生素A醇维生素A醋酸酯维生素A棕榈酸酯鉴别试验三氯化锑反应：维生素A+三氯化锑→显蓝色→渐变成紫红色紫外吸收光谱：维生素A的无水乙醇-盐酸溶液在326nm波长处有单一吸收峰，将该溶液加热后再测定，在348，367，389nm处出现3个尖锐吸收峰。这是维生素A在盐酸催化下加热，发生脱水反应所致含量测定紫外分光光度法（三点校正法）维生素A醋酸酯的环己烷溶液在328nm有最大吸收，吸收系数E=1530维生素A醇的异丙醇溶液在325nm有最大吸收，吸收系数E=1820由于维生素A中稀释用油和有关杂质也具有紫外吸收，干扰测定，故采用三点校正法测定含量等吸收差法中国药典收载方法第一法（维生素A醋酸酯的测定）将维生素A溶于环己烷，在规定波长测定吸收度，计算吸收度比值（A/A328）数据处理如果λmax在326-329nm之间，且A/A328比值未超过规定值的±0.02，可直接按下式计算含量：数据处理如果λmax在326-329nm之间，且A/A328比值超过规定值的±0.02，需按校正公式计算校正值：是否需要校正值的判断如果λmax不在326-329nm之间，也用第二法测定第二法（维生素A醇的测定）不能用第一法的样品采用第二法测定方法：维生素A醇→皂化→提取→滤过→浓缩→干燥→维生素A酯→制成异丙醇溶液，在规定波长测定吸收度数据处理：讨论干扰物质主要由异构体、氧化产物、合成中间体及溶剂油校正公式的推导假定这些杂质在310-340nm处吸收呈直线，根据吸收度加和性原则，选择三个波长，用数学方法，即维生素B1的分析又称盐酸硫胺，结构特点：有两个碱性基团，有紫外吸收，在水中易溶嘧啶环噻唑环鉴别反应沉淀反应氯化物反应——本品为盐酸盐，显氯化物反应硝酸铅反应——与氢氧化钠共热，分解产生硫化钠，与硝酸铅生成黑色沉淀含量测定非水溶液滴定法用于原料药测定加醋酸汞消除盐酸干扰1mol维生素B1与2mol高氯酸相当紫外分光光度法片剂、注射剂采用此法以吸收系数法计算含量硫色素荧光法对照品对照法计算含量，方法专属，不受氧化产物干扰硅钨酸重量法维生素B1+硅钨酸→白色沉淀，趁热过滤沉淀依次用热盐酸、水、丙酮洗涤80℃干燥至恒重样品%=（沉淀重×0.1939）/取样量×100%式中0.1939为重量换算因子，维生素B1的M=337.27，沉淀的M=3479.22，由于糖类性质维生素C+HCl（三氯乙酸）→水解成戊糖→失水→糠醛+吡咯→蓝色杂质检查澄清度与颜色——控制氧化变色产物，以测定一定波长下吸光度控制有色杂质原料——溶液应澄清无色，若有色，在420nm处测定吸光度，不得过0.03片剂——在440nm处测定吸光度，不得过0.07注射剂——在420nm处测定吸光度，不得过0.06铁、铜离子——采用原子吸收分光光度法测定含量测定碘量法——维生素C分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量的氧化成二酮基测定方法取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100mL与稀醋酸10mL，振摇使溶解，加淀粉指示液1mL，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6讨论：滴定前加入稀醋酸可减缓维生素C受空气氧化，用新沸过的冷水做溶剂，除去水中溶解氧对测定的影响维生素C片也采用碘量法测定含量，但需过滤除去辅料维生素C注射液含量测定精密量取本品适量（约相当于维生素C0.2g）加水15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5min，加稀醋酸4mL与淀粉指示液1mL，用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续30s不褪。每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6：滴定前加丙酮是用来消除注射液中含有的抗氧剂亚硫酸钠对测定的干扰，丙酮与亚硫酸钠形成加成物而消除影响2,6-二氯吲哚酚法以2,6-二氯吲哚酚为滴定剂，终点时，过量一滴的滴定剂在酸性溶液中显玫瑰红色而指示终点，无需另加指示剂此法较碘量法专属性强，但滴定剂不稳定维生素D的分析为一类抗佝偻病的维生素总称，都是甾醇的衍生物，ChP收载维生素D2（Ergocalciferol），D3有多个烯键，不稳定，易氧化变质，使毒性增加，多个手性碳，具旋光性鉴别试验显色反应（甾类化合物的反应）D2+醋酐-浓H2SO4→黄→红→紫→绿色D3+醋酐-浓H2SO4→黄→红→紫→蓝绿→绿色比旋度[α]tD测定D2无水乙醇液：+102.5°～+107.5°D3无水乙醇液：+105°～+112°D2、D3区别反应维生素D的醇溶液+85%H2SO4

含量测定采用正相HPLC法根据样品纯度，ChP采用三种方法第一法（适用于无VitA醇及其它杂质干扰）对照品（D2、D3）+异辛烷→超声助溶，充氮，避光0℃保存内标液：邻苯二甲酸甲酯-正己烷溶液色谱柱：硅胶柱流动相：正己烷-正戊醇（997：3）检测波长：254nm测定方法光照：使产生前维生素D3，反式维生素D3，速甾醇D3，连同维生素D3，进行系统适用性试验重复进样，维生素D3的峰值RSD≤2.0%分离度R>1.0采用校正因子法计算维生素D总量维生素E分析结构特征：具有苯并二氢吡喃结构，苯环上有1个乙酰化的酚羟基，易被水解、氧化；为脂溶性维生素。有四种异构体，其中α型活性最强鉴别与硝酸反应——维生素E与硝酸共热，显橙红色（生育红）水解后氧化反应——维生素E在碱性条件下水解，与联吡啶和三氯化铁作用，显血红色。在该反应中，维生素E水解游离出生育酚，还原Fe2+→Fe3+，后者与联吡啶生成血红色配位离子杂质检查合成型——检查有关物质（GC）天然型——检查生育酚生育酚——采用硫酸铈滴定法生育酚限量计算规定：0.1g维生素E消耗硫酸铈滴定液（0.01mol/L）不得过1.0mL含量测定采用GC法色谱条件色谱柱：硅酮（OV-17），载气：N2检测器：FID内标：正三十二烷（正己烷溶液）系统适用性试验以维生素E峰计算应不低于500（毛细管柱5000），维生素E与内标的分离度应大于2测定方法校正因子测定：取正三十二烷适量，加正己烷溶解并稀释成每1mL中含1.0mg的溶液，摇匀，作为内标溶液。另取维生素E对照品约20mg，精密称定，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取1-3L注入气相色谱仪，计算校正因子样品测定：取本品约