线粒体疾病课件

第八章线粒体遗传病（MitochondrialgeneticsandDiseases）GermlineInheritanceSomaticInheritanceExtrachromosomalInheritance染色体外遗传最初由Correns（1909）在紫茉莉中发现，之后在其它高等生物、微生物中都有发现，包括动物细胞中的线粒体、植物中的叶绿体、细菌的质粒等。核外遗传的共同特点：（1）无有丝分裂和减数分裂的周期变化，遗传上不符合孟德尔定律；（2）杂交或正反交后，子代仅表现母方特性细胞质遗传（3）遗传物质是DNA人线粒体的结构每个线粒体可含2－10条DNA链，单个细胞内可存在多个线粒体。线粒体的核糖体与原核生物相似，对一些抗生素敏感，线粒体可能是细胞内处于共生状态的微生物独立进化而来LynnMargulis线粒体的复制、转录、翻译都不依赖于细胞核DNA,但是细胞核和线粒体在功能上相互依赖。人线粒体DNA的结构人类mtDNA—一种较小闭环双链DNA,含16,569个核苷酸，编码37个基因,包括不同氧化磷酸化复合物的蛋白亚基（13个），rRNA(2个）、tRNA（22个）基因等。mtDNA的突变可见于各种编码基因。mtDNA的几个特点有助于解释其致病机理：mtDNA半自主复制，没有内含子；mtDNA所用的遗传密码与核基因通用密码存在差异。mtDNA为母系遗传；mtDNA在有丝分裂和减数分裂期间都要经过复制分离；mtDNA具有阈值效应；暴露于氧化磷酸化所产生的氧自由基中,突变发生风险较核DNA大10－20倍。基因多态性—基因突变在人群中的一种表现形式多态性（polymorphism）:群体中同一基因座上有两个或两个以上的等位基因同时存在。单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism,SNP）:人类基因组序列中最常见的变异形式是SNP，这种多态包括单个碱基的替换、单个碱基的插入和缺失（后两者主要在非表达序列）。GAGCTCGAACTTGAG,GAGGAG,GAAGAA,GAA人群中出现三种基因型RFLP分析DNA

限制性内切酶MstII的识别序列CCTNAGG

ACTCCTGAGGAG（可酶切）ACTCCTGTGGAG（不能切）N代表任一核苷酸ACTCCTGAGGAG1350bp1150b/p>

AAATTT分析mtDNA取自5个地理区域（Africa、Asia、Australia、NewGuinea、Europe）的147人；使用12种不同的限制性内切酶消化；通过RFLP分析mtDNA的限制性酶谱；共获得133种限制性酶谱型；通过mtDNA的演化，分析人类的起源。（1）线粒体遗传病（2）核基因突变引起的线粒体疾病线粒体疾病分类Leber遗传性视神经病（Leberhereditaryopticneuropathy,LHON）LHON是人类母系遗传病的代表。以急性或亚急性眼球后神经炎，导致双侧视神经萎缩和大片中心暗点而突然丧失视力为特征，同时伴色觉障碍。发病高峰年龄20－30岁，但任何年龄均可发病。急性发作后视力可进一步衰退，但通常可维持0.02－0.5。无特殊并发症，有些家系出现其它神经异常，如智力障碍。1988年Wallace等确认线粒体呼吸链复合物遗传性异常是LHON的病因。Leber遗传性视神经病（LHON）的遗传异质性在编码线粒体呼吸链蛋白（多肽）的线粒体基因中，至少有18种错义突变直接和间接地导致LHON表型出现。LHON分为两种类型：（1）单一突变导致LHON表型（2）需要2次突变或其它变异才能产生临床表型第一种类型中，90％以上病例存在有下列突变之一：MTND1*LHON3460A、MTND4*LHON11778A、MTND6*LHON14484C，LHON家族中存在同质性和异质性，而异质性LHON中突变线粒体DNA的阈值水平70%。Kearns-Sayre

Syndrome，KSS特征性症状：眼外肌麻痹、视网膜变性、心传导阻滞、脑脊液蛋白含量增高。患者临床表现可有：虚弱、乳酸酸中度、听力丧失、痴呆、个头矮小等发病年龄一般<20岁，大多数病人在确诊几年后死亡。病因学基础：线粒体DNA大片段缺失和复制（重复），缺失多大于1000bp。约1/3的Kearns-Sayre病例与线粒体存在4977bp大小的DNA缺失有关Kearns-Sayre

SyndromeKSS的病情严重程度依赖于异质性的程度和突变线粒体的组织分布。当肌细胞中有缺失的线粒体基因组大于85%时，可发生所有KSS的临床特征。在异质性处于较低水平时，进行性眼外肌麻痹是主要症状。当突变线粒体基因组在造血干细胞中大量存在时就会出现造血功能障碍，血细胞不能利用铁进行血红蛋白的合成，引起致命性的贫血—缺铁性贫血。机制：突变线粒体DNA在某组织中高比例出现时，部分基因，包括tRNA的丧失，能量产生急剧下降，使组织功能出现障碍。线粒体碱基替换疾病的命名例：MTTK

*MERRF8344G包含三个部分：1.MTTK:MT，指线粒体；T,代表转运RNA;

K，表示赖氨酸2.MERRF：描述疾病临床特征的字母缩略词3.8344G：表示碱基改变的位置疾病编号MIM----：MendelianInheritanceinManMERRF8344GMELASSyndrom（mitochondrialencephalomyopathywithlacticacidosisandstroke-likeepisodes）—线粒体肌病脑病伴乳酸中毒及中风样发作综合症临床特征：复发性休克，肌病，共济失调，肌阵发性痉挛，痴呆，耳聋等。乳酸酸中毒：由于异常线粒体不能代谢丙酮酸，导致大量丙酮酸生成乳酸，使后者在血液和体液中积累。

特征性的病理变化：脑和肌肉的小动脉和毛细血管管壁中有大量形态异常的线粒体聚集MELAS3243GmtDNA突变与非综合征型耳聋GeneMutationReference12SrRNA1555A>GJaberetal,199312SrRNA1494C>TZhaoetal,200412SrRNA961(differentM)Bacinoetal,1995tRNASer7445A>GReidetal,1994tRNASer7510T>CTirantietal,19953.底物利用缺陷：线粒体参与物质代谢的多种酶类由核基因编码，突变失活将影响相应功能。4.铁运输缺陷：Friedreich共济失调是由三核苷酸重复序列的拷贝数增多导致铁运输缺陷所引起的致死性疾病，呈常染色体隐性遗传，基因产物定位于线粒体内膜和基质。5.电子传递链缺陷线粒体遗传病的传递和发病规律mtDNA具半自主性：能独立地复制、转录、翻译，但核基因编码大量维持线粒体结构和功能的蛋白质，以及编码大多数氧化磷酸化酶的蛋白亚单位，因此mtDNA功能又受核DNA影响。密码子与核基因有差异：mtDNA中，UGA色氨酸。而非stop.3.mtDNA为母系遗传：人类受精卵中的线粒体几乎都来自卵母细胞，即来自母系——母系遗传（maternalinheritance)。疾病的家族分析中如发现疾病从受累女性传递规律，可考虑线粒体DNA突变致病的可能。4.mtDNA在有丝分裂和减数分裂期间均经过复制、分离：细胞分离过程中，线粒体随机分布。因此在胚胎发育过程中，一些干细胞可能接受携带大量的突变基因的线粒体，随后形成的成体组织细胞会具有高比例的携带突变基因的线粒体，进而影响组织的功能，特别是对高需能的组织。5.mtDNA的阈值效应：导致疾病状态的突变型mtDNA的比值。

纯质（homoplasmy）：细胞或组织中所有线粒体具有相同的基因组，野生型或突变型；