GB/T 42470-2023纳米技术基于斑马鱼胚胎的纳米材料毒性评价

ICS07120

CCSC.04

中华人民共和国国家标准

GB/T42470—2023

纳米技术基于斑马鱼胚胎的

纳米材料毒性评价

Nanotechnologies—Assessmentofnanomaterialtoxicityusing

dechorionatedzebrafishembryo

ISO/TS220822020MOD

(:,)

2023-03-17发布2023-10-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T42470—2023

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………2

材料

5………………………2

生物体斑马鱼Daniorerio

5.1(,)………………………2

储备液

5.2………………3

阳性对照

5.3……………3

设备

6………………………3

技术设备

6.1……………3

分析仪器

6.2……………3

步骤

7………………………4

养殖

7.1…………………4

产卵刺激

7.2……………4

胚胎破膜

7.3……………5

纳米材料储备液的制备

7.4……………6

试验浓度

7.5……………6

纳米材料的分散

7.6……………………6

阳性对照化学物二氯苯胺

7.7:3,4-……………………6

试验方法

7.8……………7

数据分析

7.9……………8

试验报告

8…………………8

试验步骤

8.1……………8

报告中包含的信息

8.2…………………8

附录资料性机械破膜法

A()……………10

附录资料性斑马鱼胚胎产卵步骤

B()…………………11

附录资料性结果验证

C()………………12

参考文献

……………………13

GB/T42470—2023

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件修改采用纳米技术基于斑马鱼胚胎的纳米材料毒性评价文件类

ISO/TS22082:2020《》,

型由的技术规范调整为我国的国家标准

ISO。

本文件与的技术差异及其原因如下

ISO/TS22082:2020:

原图不符合描述中雌鱼大雄鱼小的形态特征因此更改了图中雄性及雌性斑马鱼图

———15.1,1

片见图

(1);

在中增加了注释内容引用国家标准对纯净水的质量做了说明见

———5.2,(5.2);

在中增加了对后文储备液配置方法部分的引用见

———5.2(5.2);

中光照周期不符合常规实验及国内惯例故引用相关国家标准更改了光照周期的数值

———6.1.2,,

见

(6.1.2);

按照国内惯例在增加了分析纯来界定化学品的纯度级别见

———,7.3.2“”(7.3.2);

中试验步骤需顺序进行因此更改了各步骤前的符号将其修改为英文字母编号见

———7.8.3,“—”,(

7.8.3)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中国科学院提出

。

本文件由全国纳米技术标准化技术委员会归口

(SAC/TC279)。

本文件起草单位首都医科大学中国医学科学院基础医学研究所

:、。

本文件主要起草人孙志伟李阳段军超陈月月李艳博许海燕孟洁

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T42470—2023

引言

鱼类试验是广泛应用于评价水环境中化学物毒性的重要手段然而使用包括鱼在内的脊椎动物

。,

对化学物进行测试存在动物福利问题用已发育完全的幼鱼进行测试会给动物带来明显不适如使用

。(

使用生命早期的鱼胚胎而不是成鱼或幼鱼进行测试是一种更符合动物福利的替代

OECDTG203),

方法

。

纳米技术正在诸多领域发挥积极作用但人们仍然对纳米产品的环境潜在危害有所担忧经济合

,。

作与发展组织使用鱼胚胎评估急性毒性的试验指南见指出有些化学物可能

(OECD)(OECDTG236),

不适用这一方法进行试验如分子量的大分子结构物质和引起孵化延迟的物质卵膜是鱼胚

,≥3kDa。

胎最外层的非细胞包膜其屏障作用会妨碍化学物或纳米材料生物活性的评价目前尚无法预测哪些纳

,,

米材料受到该屏障的影响使用去卵膜胚胎进行毒性评估尽管不能提供直接的生态毒理学信息但可

。,

能有助于更好地识别具有潜在危害的纳米材料因此世界各国的研究人员已开发了很多方法去除生

。,,

命早期阶段斑马鱼胚胎的卵膜[4][5]去除胚胎卵膜有两种方法酶破膜法和机械破膜法与机械破膜

。:。

法相比酶破膜法具有如下优点见附录节省时间和劳动力可避免胚胎的机械损伤同时能提供大

,(A):、,

量破膜胚胎进行高通量测试但酶破膜法的一个不足之处在于链霉蛋白酶活性的变化可能影响卵膜去

。

除的成功率许多研究小组已经使用去卵膜胚胎进行化学物和纳米材料的毒性评价[6]-[9]但方法尚未

。,

完全标准化[10]-[13]

。

去卵膜斑马鱼胚胎可作为其他脊椎动物系统的替代系统用于检测纳米材料的潜在危害随着高

,。

等动物模型毒性试验的不断优化对替代试验方法的需求在持续增加生命早期阶段的斑马鱼独立摄

,。(

食前即受精后内是一种非常好的体内毒性试验替代模型[23]-[28]与其他动物模型相比斑马鱼

,120h)。,

模型有许多优势包括相对容易饲养和繁殖繁殖力强体外受精一条雌鱼可产个个胚胎

,、(、200~300)、

发育周期短约个月成年基因组资源的可获得性完整的斑马鱼基因组序列以及基因与人类的相

(3)、()

似性与人类基因组的比对表明大约的人类基因在斑马鱼中存在至少一个同源基因[14]因此斑

。,70%,

马鱼已经越来越多地应用于化学物毒性评价

。

本文件提供了使用去卵膜斑马鱼胚胎进行毒性评价的方法推荐了去除斑马鱼胚胎卵膜的一种优

,

化程序同时讨论了采用去卵膜胚胎进行鱼类毒性评价的优点

,。

Ⅱ

GB/T42470—2023

纳米技术基于斑马鱼胚胎的

纳米材料毒性评价

1范围

本文件规定了一种快速评价纳米材料毒性的方法鱼类生命早期阶段包括

(,0HPF~120HPF),

去除卵膜的详细操作步骤和使用去卵膜斑马鱼胚胎评价纳米材料毒性的完整方案本文件的重点是测

。

试纳米材料的毒性

。

本文件适用于商业化及非商业化纳米材料的毒性检测

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682—2008

纳米技术材料规范纳米物体特征指南

ISO/TS12805(Nanotechnologies—Materialsspecifi-

cations—Guidanceonspecifyingnano-objects)

注纳米技术材料规范纳米物体特性指南

:GB/T37156—2018(ISO/TS12805:2011,IDT)

纳米技术纳米材料毒理学评价前理化性质表征指南

ISO/TR13014(Nanotechnologies—Guid-

anceonphysico-chemicalcharacterizationofengineerednanoscalematerialsfortoxicologicassess-

ment)

注纳米技术纳米材料毒理学评价前理化性质表征指南

:GB/T39261—2020(ISO/TR13014:2012,IDT)

纳米技术粉体纳米颗粒表征和测量

ISO/TS17200(Nanotechnology—Nanoparticlesin

powderform—Characteristicsandmeasurements)

纳米技术纳米物体表征用测量技术矩阵

ISO/TR