上海市临检中心 HPV分型检测及呼吸道病原体检测的自动化解决方案

HPV分型检测及呼吸道病原体检测的自动化解决方案技术部主管：苏立喜厦门安普利XIAMENAMPLLY厦门安普利

XIAMENAMPLLY主要内容：1、HPV与宫颈癌2、上呼吸道感染简介3、实验室检测的自动化解决方案1、HPV与宫颈癌厦门安普利

XIAMENAMPLLY2018年全世界新发宫颈癌病例约57万人，约有31.1万妇女死于宫颈癌，其中发展中国家占85%，发达国家占15%中国（106430）约18.7%厦门安普利

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XIAMENAMPLLY1、宫颈癌的“元凶”是人乳头瘤病毒，全球99%以上宫颈癌病例与其相关。HPV与宫颈癌3、宫颈癌是唯一可以进行早期筛查和早期治疗的癌症。2、HPV高危型的持续感染是宫颈癌发生的必要条件。厦门安普利

XIAMENAMPLLY高危型HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68中危型HPV26、53、66、73、82低危型HPV6，11，42、43、44、83、CP8304HPV致病种类厦门安普利

XIAMENAMPLLY短暂性的HPV感染大部分妇女都是短暂性的HPV感染，通常在6-12个月消失，只有少数妇女会持续感染乃至最终发展成宫颈癌。同一高危型HPV持续感染同一高危型HPV持续感染是激发宫颈上皮恶性转化的最重要危险因素。正常宫颈感染HPV子宫颈浸润癌子宫颈原位癌（CCIS）宫颈上皮内轻度癌变（CINⅠ）宫颈上皮内高度癌变（CINⅢ）宫颈上皮内中度癌变（CINⅡ）发展逆行自行消退6-18个月02年后10-15年后HPV发展成宫颈癌厦门安普利

XIAMENAMPLLYHPV预防：疫苗注射2017年8月，二价HPV疫苗国内上市2017年11月，四价HPV疫苗国内上市2018年4月，九价HPV疫苗国内上市厦门安普利

XIAMENAMPLLY疫苗不能替代筛查覆盖率美国疾病控制中心CDC推荐9-12岁女孩和男孩注射HPV疫苗，只有这部分的满足需求了，才考虑为15岁以上的男女接种。我国HPV疫苗覆盖率还远远不够。型别覆盖率二价和四价疫苗均能预防16和18型，占宫颈癌的66%；九价疫苗包含另外5种高危型别，占宫颈癌的15%。覆盖宫颈癌风险为81%疫苗有效性在包含HPV感染人群接种的临床随访中发现疫苗的临床保护力仅为45%，未感染人群接种随访后对HPV16、18引起的CIN3保护力接近100%厦门安普利

XIAMENAMPLLY美国疾病控制中心CDC推荐的筛查方案HPV-&Pap-HPV-&ASC-HPV+&Pap-HPV&Pap联合间隔5年筛查间隔3年筛查HPV16/18分型立即HPV16/18-HPV16/18+重复联合检测，间隔12个月重复联合检测，间隔12个月HPV+或≧ASCHPV-&Pap-间隔3年筛查阴道镜厦门安普利

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XIAMENAMPLLY人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒（荧光PCR法）FAMHEXROXCY56型11型82型βactingβacting内标，可以有效的防止扩增假阴性厦门安普利

XIAMENAMPLLY一次检测实现24种基因型分型厦门安普利

XIAMENAMPLLY参与卫生部临检中心的HPV分型室间质评，保证检测结果的质量控制。作为室间质量评价。厦门安普利

XIAMENAMPLLY设置室内质控：1、名称：HPV阳性对照HPV阴性对照2、组成：HPV24种型别质粒、人基因组质粒

生理盐水3、范围：HPV阳性对照：17种高危（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82）和7种低危（6、11、42、43、44、83、CP8304）。HPV阴性对照：生理盐水厦门安普利

XIAMENAMPLLY主要内容：1、HPV与宫颈癌2、呼吸道感染简介3、实验室检测的自动化解决方案2、上呼吸道感染简介厦门安普利

XIAMENAMPLLY什么是上呼吸道感染？包括鼻腔、咽或喉部急性炎症的总称；主要可分为普通感冒、流行性感冒以及以咽炎为主要表现的其他上呼吸道感染（病毒性咽炎、喉炎、疱疹性咽峡炎、咽结膜热、细菌性咽-扁桃体炎等）是最常见的多发感染性疾病，可引起局部流行甚至世界范围内大流行；由于病毒、细菌、支原体等病原微生物侵入机体造成呼吸道感染；与患者的免疫系统功能下降，环境因素及机体部分维生素缺乏等有关。厦门安普利

XIAMENAMPLLY冠状病毒和流感病毒等重症呼吸道病毒变异、重组加快，加大了病毒检测和控制的困难，大规模、跨种族的传播严重威胁人类健康。可诱发慢性病急性加重，包括心脏病、哮喘糖尿病等，对有基础心肺疾病和老年人患者存在着极大的威胁，经常性地引发死亡。上感可导致多种多种严重并发症，急性中耳炎最常见，其他还包括肺炎、脑膜炎、急性心肌炎、肾炎、风湿热等。发病率很高。小儿反复感冒可导致营养不良，肺功能降低甚至生长发育落后等直接或间接后果。1423上呼吸道感染的危害000030-50%鼻病毒10-15%冠状病毒5-15%流感病毒5%肠道病毒+腺病毒<5%呼吸道合胞病毒10-40%人偏肺病毒等其他病原体

上呼吸道感染约90%原发病原体是病毒，少部分由细菌及其他病原体引起的。细菌感染多继发于病毒感染之后。建立快速准确的检测技术正确诊断病原体，对预防和控制上呼吸道感染具有重要意义。厦门安普利

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XIAMENAMPLLY主要病原体病毒人鼻病毒(hRV)人肠道病毒(hEV)甲型流感病毒(IAV)乙型流感病毒(IBV)冠状病毒(CoV)呼吸道合胞病毒(RSV)人偏肺病毒(hMPV)副流感病毒(PIV)腺病毒(AdV)人博卡病毒(hBoV)细菌肺炎链球菌(S.pneumoniae)流感嗜血杆菌(H.influenzae)金黄葡萄球菌(S.aureus)卡他莫拉菌(M.catarrhalis)肺炎克雷伯菌(K.peneumoniae)大肠埃希菌(E.coli)酿脓性链球菌(S.pyogenes)其他肺炎支原体(MP)沙眼衣原体(CP)什么是普通感冒？普通感冒是最常见的急性呼吸系统疾病。多呈自限性，但发病率高，成年人每年患感冒2-4次，

儿童则为6-8次。通常由病毒引起，最常见的病原体是鼻病毒，其他病毒包括冠状病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒等。感冒病原体种类过多、且不断变异限制了药物的有效性，无法明确病原体会使治疗缺乏针对性。厦门安普利

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XIAMENAMPLLY据世界卫生组织（WHO）估计，季节性流感平均每年可使全球5%-15%的人发病，造成300万-500万重症病例，导致30万-50万人死亡。流感不同于普通感冒，是引起的急性呼吸道感染，全身症状较重，同时也是一种传染性强、传播速度快的疾病，所引起的并发症和死亡现象非常严重。什么是流行性感冒？流感病毒我们通常所说的流感病毒指的是甲型流感病毒厦门安普利

XIAMENAMPLLY中国疾病预防控制中心的研究数据显示，季节性流感每年可导致大量的呼吸和循环系统疾病死亡。在我国北方城市，每年由流感引起的非自然性死亡率为18/10万，在南方城市为11.3/10万。研究显示，我国超额死亡率与欧美国家和亚热带地区类似，其中，86%以上的流感相关超额死亡发生于65岁及以上人群。中国人对流感不易感？！就在2017年，据香港卫生署介绍，自2017年5月5日至至8月6日期间，香港H3N2流感共造成327人死亡。错！中国公众对流感危害性认识相当不足。厦门安普利

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XIAMENAMPLLY实验室检查：1、外周血常规：白细胞总数一般不高或降低，重症病例淋巴细胞计数明显降低。2、血生化：部分病例出现低血钾，少数病例肌酸激酶、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酐等升高。3、病原学检查：（1）病毒核酸检测：以实时荧光PCR技术法检测呼吸道标本（鼻咽拭子、鼻咽或气管抽取物、痰）中的病毒核酸。其特异性和敏感性最好。（2）病毒抗原检测：敏感度低于核酸检测，易出现非特异性。（3）血清学检测：检测IgM和IgG抗体水平。在窗口期或者部分免疫低下的患者灵敏度较低。（4）病毒分离培养：从呼吸道标本中分离流感病毒培养，时间长，灵敏度低。厦门安普利

XIAMENAMPLLY病例确诊：出现流感样临床表现，同时有以下一种或者几种实验室检测结果：—甲型流感病毒核酸检测阳性（采用实时荧光PCR技术）—分离到甲型流感病毒株—血清甲型流感病毒的特异性中和抗体水平呈4倍或者以上升高“流感下的北京中年”就是对感冒危害性认识不足的典型案例：戊医院的诊断结果！！

正如“流感下的北京中年”文章中的描述，是大部分中国人对感冒治疗的基本方案，1、多喝水，2、到医院打点滴，3、吃抗生素类药物。并没有明确病原体，然后对症用药治疗。

文章中指到丁医院做了甲乙流的初筛，显示阴性，但是在戊医院的“鼻咽拭子甲型流感病毒核酸测定”中显示阳性。是因为大部分初筛实验都是用抗原检测，抗原检测最常见的是金标法，特点是简单快速，只需要患者的鼻咽拭子就可以检测，半个小时左右就可以出结果。但是其与流感病毒核酸检测相比，敏感性较低，与核酸检测的阳性符合率较低，这也是为什么乙医院检测阴性，而戊医院检测阳性的原因。厦门安普利

XIAMENAMPLLY2、PCR技术的临床应用为临床呼吸道病原体的诊断提供解决方案厦门安普利

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厦门安普利自主研发生产的“呼吸道病毒联合检测试剂盒（荧光PCR法）”，可以检测22种常见呼吸道病毒、细菌和其他病原体。

病毒：甲型流感病毒、乙型流感病毒、人副流感病毒Ⅰ型、人副流感病毒Ⅱ型、人副流感病毒Ⅲ型、腺病毒、呼吸道合胞病毒、人冠状病毒229E组、人冠状病毒OC43组、人冠状病毒NL63组、人冠状病毒HKUI组、人偏肺病毒、鼻病毒、风疹病毒、流行性腮腺炎病毒、肺炎支原体及肺炎衣原体。

细菌：溶血性链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、百日咳杆菌、肺炎克雷伯氏菌。

其他：沙眼衣原体、肺炎支原体、嗜肺军团菌厦门安普利

XIAMENAMPLLY荧光PCR法多重检测病原体核酸快速灵敏特异经济便捷多种病原体在同一反应管内同时检出，配合全自动检测平台，将大大的节省时间。荧光PCR保证方法的灵敏度，能检测出低丰度的病原体。直接检测各种病原体核酸，特异性高，鉴定病原体并能明确分型。检测覆盖了所有常见的上呼吸道18种病原体，多重检测大大降低成本。样本仅需要采集一次咽拭子样本，无需多次采样。厦门安普利

XIAMENAMPLLY临床应用：1、上呼吸道和下呼吸道感染性病原体全面筛查；2、肺炎、流感、结核等多种细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体感染早期诊断，替代血常规无法提示病原体类型，弥补痰培养速度慢的弊端。3、98%以上的高特异性和敏感度，尤其针对反复发作不明原因发热、咳嗽等检测，对老年人或小孩具有快速辅助诊断的意义。4、为临床提供有效的抗生素使用参考。厦门安普利

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XIAMENAMPLLY随着分子诊断技术的不断发展，现代基因诊断实验室的要求是？？快：检测速度快，当天报告结果准：实验结果要准确稳：实验稳定性好厦门安普利

XIAMENAMPLLY全自动核酸提纯及荧光PCR分析系统Anadas9850充分考虑中国临床实验室检测特点；一种流水线式核酸检测平台从标本录入到PCR定量出报告全程自动化，检测通量大，检测效率高。生物安全性高：仪器采用全外排层流净化通风系统，内置紫外灯消毒装置，更好的保证实验室的生物安全。厦门安普利

XIAMENAMPLLY稳1.样本管取样2.核酸提取纯化3.PCR扩增4.结果分析全程自动化，无需人工干预，真正实现自动化检测，避免了因手工操作而产生的误差。厦门安普利

XIAMENAMPLLYHPV16型重复性结果厦门安普利

XIAMENAMPLLY自动化检测采用磁珠法对核酸进行提取纯化。磁珠法1.超顺磁纳米磁珠2.多微孔表面修饰3.进入反应体系4、无需标本前处理硫氰酸胍裂解磁珠特异性吸附核酸磁珠进入扩增体系厦门安普利

XIAMENAMPLLY磁珠不洗脱进入扩增体系检测结果比磁珠洗脱后进行扩增能提高检测的敏感度，能保证检测结果的稳定可靠，特别是对低浓度样本的检测结果。厦门安普利

XIAMENAMPLLY准污染一直是PCR实验室质量控制的重点实验室分区物品专用单向行走产物专管。。。我们在污染防控上做了哪些解决方案？？？厦门安普利

XIAMENAMPLLY打破传统的实验室分区！厦门安普利

XIAMENAMPLLY并不是所有的一体化设备都适用于区域的合并。Anadas9850采用全外排层流净化系统，内置紫外消毒防污染，生物安全性高，是市场上唯一采用全外排层流净化系统的自动化检测设备。内部气流保持单向流动，确保扩增区气流不倒灌。厦门安普利

XIAMENAMPLLY试验全程采用一次性tip头，实现固废分离。废液采用含有