上海市临检中心 地中海贫血基因检测的道与术

地中海贫血基因检测的道与术亚能生物马于雷道1地中海贫血简介2地中海贫血基因检测产品应具备安全特点什么是地中海贫血？定义：珠蛋白基因缺陷（缺失或/和点突变）导致珠蛋白肽链合成减少或不能合成，致使血红蛋白组分发生改变而引起的常染色体单基因隐性遗传病。血红素成人血红蛋白示意图分类α-地中海贫血β-地中海贫血特点具有明显的种族差异地区差异危害重型地贫致死中型地贫致残地中海贫血全球分布地中海贫血是全球最大的单基因遗传病之一，中国南方地区是地中海贫血的主要分布区域。估算中国每年新增中间型和重型地贫患儿约3万例。地贫在我国南方高发，分布在南方10个省（区、市）中国南方人群地贫基因携带率地区携带率（%）地贫地贫合计广西17.66.424.0云南9.87.317.1海南12.72.715.4广东8.52.511.0贵州4.25.19.3台湾7.31.28.5江西（南部）3.52.96.4福建4.11.55.6湖南2.22.04.2四川1.92.24.1重庆1.02.33.3JClinPathol,2004;ClinGenet,2010;中华医学遗传学杂志，2012.夫妇双方若无携带地贫基因，出生地贫患儿的概率为0；夫妇一方携带地贫基因，下一代有50%的概率携带地贫基因；夫妇双方均携带同型地贫基因，下一代有25%的概率为重症地贫患儿地贫的遗传机制（常染色体隐性遗传病）α-地中海贫血分子基础缺失型α-地贫：占α-地贫的95%以上；由α-基因缺失引起，中国人群中主要类型有--SEA/、-α3.7/、-α4.2/

非缺失型α-地贫：占α-地贫的约5%；由α-基因点突变引起，中国人群中主要类型有αCSα/、αQSα/、αWSα/分类静止型α地贫标准型α地贫HbH病HbBart’s胎儿水肿综合征Normal(αα/αα)

正常无任何α基因缺失或功能丧失α+

地贫(αα/-α3.7)(αα/-α4.2)

静止型－单一α基因缺失或丧失功能临床无任何症状，一般血液学检查无异样，仅平均红细胞体积(MCV)位于正常值下限。α-地贫的基因型与表现型HbHdisease(-α

3.7/--SEA)(-α

4.2/--SEA)αo

地贫(αα/--SEA)(-α/-α)血红蛋白H病－3个α基因缺失或丧失功能肝脾肿大，中度贫血。小细胞，低色素，HbH含量较高，易发生溶血，有些病例需不定期输血，症重者甚至需切除脾脏。标准型－2个α基因缺失或丧失功能临床无明显症状，血液学检查出现轻微贫血，红细胞大小不均一，平均红细胞体积(MCV)及平均血红蛋白含量(MCH)明显偏低。α-地贫的基因型与表现型HbBart'sHydrops(--SEA/--SEA)

巴氏水肿胎儿综合症－4个基因缺失或丧失功能患胎于妊娠晚期或产后数小时内死亡，全身水肿，肝脾肿大。由于胎儿无法合成珠蛋白，脐血血红蛋白（HbBart’s，4）含量高。α-地贫的基因型与表现型β-地中海贫血分子基础绝大多数β地贫是由于β-基因点突变所致，突变涉及基因内及侧翼序列。目前在全世界已发现了近200种突变类型，包括绝大部分β-基因点突变和少部分β-基因缺失。在中国人群中共发现约40余种，其中常见的有：CDs41-42,CD654,CDs71-72,-29,-28,CD17,HbE,CDs27-28,CD43，占95%以上。分类β0地贫

β基因突变导致β链完全不能合成β+地贫β基因突变导致β链部分不能合成β-地贫的基因型与表现型基因型基因型描述表现型0/00地贫纯合子或双重杂合子（如17M/17M）重型地贫0/+0地贫和+地贫双重杂合子重型地贫+/++地贫纯合子中间型地贫0/0地贫杂合子（71-72M/N）轻型地贫+/+地贫杂合子（654M/N）轻型地贫/正常（N/N）正常人中间型/轻型β-地中海贫血轻型β地贫中间型β地贫β+地贫纯合子或β0/β+地贫杂合子介于轻型和重型之间，中度贫血，肝、脾轻中度肿大，可能有黄疸，骨骼改变轻。预后：可能需要输血，病人可活至成年甚至老年。临床表现β0地贫杂合子（β0/β）、β+地贫杂合子（β+/β）无症状或仅有轻度贫血，可能有轻度脾大。多在家系调查时发现。预后：寿命与正常人相似。临床表现重型β-地中海贫血特殊外貌头颅大颧骨突眼距宽临床表现β0或β+地贫纯合子或β0/β+地贫杂合子出生时正常，半岁左右（3-12月）发病.慢性进行性贫血：苍白、轻度黄染、生长发育迟缓。鼻梁低道2地中海贫血基因检测产品应具备安全特点1地中海贫血简介患儿治疗三级防控产前筛查和产前诊断二级防控孕前检查一级防控世界卫生组织的出生缺陷“三级预防”策略孕前和孕期干预是我国出生缺陷预防的重点有效预防重症地贫儿出生卫计委引发地贫防控项目相关文件《关于做好2014年地海贫血防控试点项目全覆盖工作的通知》《地中海贫血防控试点项目技术服务规范（试行）》2014年妇幼司印发《关于2015年进一步扩大地中海贫血防控试项目实施范围的通知》《地中海贫血防控试点项目技术服务规范》2015年国家卫生计生委印发•明确工作目标、服务内容、服务流程、服务机构和职责

•目的——改变传统地贫预防模式构建地贫群体预防模式地中海贫血防控试点项目技术服务规范明确检测突变α-地贫基因检测：三种缺失型--SEA、-α3.7、-α4.2三种非缺失型CS、QS、WSβ-地贫基因检测：

17种非缺失型基因突变

10个省（区、市）

35个地市

126个试点县（市、区）

地贫防控项目目前实施区域地贫出生缺陷群体干预工作实施方案新婚、计划怀孕或孕期夫妻双方健康教育知情同意、信息采集血常规检查一方MCV<80fl或MCH<27pg或MCV<80fl和MCH<27pg血红蛋白分析HbA2降低、出现异常血红蛋白区带HbF升高HbA2升高α地贫基因检测β地贫基因检测α+β地贫基因检测生育过重型或中间型地贫的夫妇夫妻双方均为同一型地贫基因携带者夫妻一方为β地贫基因复合α地贫基因携带者，另一方为任何一型地贫基因携带者夫妻双方均为β地贫基因复合α地贫基因携带者产前诊断重型α地贫或重型β地贫静止型α地贫或轻型α地贫及β地贫HbH病或中间型β地贫继续妊娠经遗传咨询，当事人知情同意后采取干预措施经遗传咨询，由当事人在充分知情的基础上自主选择决定地贫对患者及家庭影响大父母文化程度低，大多数为初中以下父母职业以外出务工和务农为主90%以上的家庭年收入低于6万元，近80%家庭有负债，借债额度在1-5万元.1、患者家庭收入低下，因病致贫现象突出调查显示，59.4%患者不能报销纳入药品报销目录的药品少当地药物储备不足4、去铁费用月均超3000元，六成不能报销，自费为主地贫造血干细胞移植医疗资源相对集中，排队现象严重一般家庭很难负担相关治疗费用2、配型困难、移植费用高地贫家庭经济困难约占四成，接受社会救助的家庭仅有16.3%3、接受救助家庭不足两成来源于《中国地中海贫血蓝皮书》地贫基因检测产品应具备的特点安全准确性稳定性术1亚能生物安全的地中海贫血基因检测整体解决方案地贫产品

国家标准起草单位，企业排名第一

国家参考品设计、制备单位建立国内第一个遗传疾病国家参考盘

α/β-地中海贫血联合检测试剂获科技部“863项目”资助α-地中海贫血基因检测试剂盒获得国家重点新产品奖广东省科学技术奖整体方案行业新标杆亚能地中海贫血基因检测产品行业地位及荣誉地贫基因检测整体解决方案倡导者（亚能生物）常规联检产品：AB精准分项检测产品：α、αT和β少见地贫检测产品罕见地贫检测服务地贫基因检测整体解决方案包含98%的地贫基因检测产品解决方案分项检测常规联检3种α-缺失型3种α-非缺失型17种β-突变α-和β-地贫23种方法GAP-PCR法+电泳基因芯片法基因芯片法基因芯片法检测基因类型--SEA、α3.7、α4.2

αCS、αQS、αWS

CD41-42、654M、-28M、71-72M、17M、βEM、IVS-I-1M、IVS-I-5M、27/28M、43M、-29M、-30M、31M、-32M、14-15M、IntM和CAPM--SEA、α3.7、α4.2；αCS、αQS、αWS；CD41-42、654M、-28M、71-72M、17M、βEM、IVS-I-1M、IVS-I-5M、27/28M、43M、-29M、-30M、31M、-32M、14-15M、IntM和CAPM技术方法：GAP-PCR法检测基因缺失型：-α3.7

、-a4.2、--SEA覆盖率：95%基因型条带大小αα1.7kb-α3.72.0kb-α4.21.4kb--SEA1.2kb分项检测产品1（缺失型α-地中海贫血基因检测试剂盒）技术方法：基因芯片法检测基因突变型：

αCS、αQS、αWS点突变覆盖率：98%分项检测产品2（非缺失型α-地中海贫血基因突变检测试剂盒）核心技术：基因芯片法检测突变点：17个突变位点覆盖率：98%分项检测产品3

（β-地中海贫血基因检测试剂盒）27/28M14-15MCAMP41-42N654N－28N71-72N17NβEN31N27/28M41-42M654M－28M71-72M17MβEM31MIVS1-1M43M－32M－29M－30M14-15MCAPMIntMIVS1-5M常规联检产品（三合一，α-和β-地中海贫血基因诊断试剂盒）核心技术：基因芯片法高通量：23种基因突变快速：6小时出检测报告3.7杂合4.2-QSSEA-654M产品优势快速检测，6小时出检测报告，符合地贫防控项目的时效要求操作简便，多种类型样本检测同时检测23种地贫（3种缺失型α地贫、3种非缺失型α-地贫、17种突变型β-地贫）阳性、阴性符合率均达100%、特异性100%全面简易快速精准AB试剂盒产品优势稀有型（2%）地贫基因检测产品和服务少见型地贫检测产品罕见型地贫检测服务少见型α地贫产品少见型β地贫产品罕见α-点突变罕见β-点突变香港型α-地贫(HKαα)泰国型α-地贫(Thai)anti4.2α-27.6地贫α-21.9地贫α-fusiongene地贫αααanti3.7β-中国型β-东南亚型β-台湾型CD74、CD78、CD118、CD13、CD30、CD31、CD43/44、CD49、CD59等。-90、-73、-50、-31、-28、Cap+8、Cap+39、CD19、CD30、IVS-I-2、IVS-I-128、IVS-II-2、IVS-II-5、CD40-41、TermCD+32、CD53、CD13-14、CD15-16、CD37、CD38、CD41-43、CD54-58、CD71-72、CD89-93、CD95、CD112、PolyA等。PCR-RDB方法保证准确性多重PCR扩增靶标基因芯片识别多靶标高灵敏度、高特异性高特异性、高通量、靶标可拓展性强地贫基因检测产品稳定性2014-2018年全国地中海贫血基因分型室间质量评价总成绩均为满分。核酸提取PCR扩增目的靶标分子杂交显色，肉眼即可判读结果高通量、自动化的地贫基因检测产品仅1