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文档简介
专项3课题1菊花组织培养第1页第1页一、细胞全能性1、植物学家将胡萝卜韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放在特定培养基中培养,取得了许多完整植株,这些植株特点是()A.彼此性状极为相同 B.都是单倍体植株C.植株变异频率较高 D.都是纯合体植株2、依据分裂潜能,干细胞可分为全能干细胞(可发育成完整个体)、多能干细胞(可发育成各种组织和器官)和专能干细胞(发育成专门组织和器官),则这些细胞在个体发育中分化顺序是()A.全能——专能——多能 B.全能——多能——专能C.多能——全能——专能 D.专能——全能——多能Ⅰ、所谓细胞全能性,是指细胞如受精卵一样,含有经过度裂、分化形成各种组织和细胞,最终发育成一个完整个体能力;细胞核全能性则指细胞虽不具备发育成一个完整个体能力,不过当将其细胞核经过核移植等方法导入去核卵细胞或受精卵,经过受体卵细胞质诱导去分化、体细胞核和受体卵细胞质共同作用,依然可能发育成一个完整个体。因此,细胞全能性和细胞核全能性是两个完全不同概念,不能混为一谈。细胞核全能性并不代表细胞含有全能性。Ⅱ、植物体细胞含有全能性低等动物细胞和高等动物早期胚胎细胞含有发育全能性高等动物体细胞核含有发育全能性高等动物体细胞是否含有全能性?——一个还没有最终结论话题第2页第2页第3页第3页二、植物组织培养过程离体植物组织或细胞愈伤组织根和芽完整植物体脱分化再分化第4页第4页三、影响植物组织培养原因1、外植体选取不同植物组织培养难度不同同一个植物不同组织培养难度不同2、培养基配制(MS培养基)大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等3、植物激素生长素<细胞分裂素有利于芽形成生长素>细胞分裂素有利于根形成4、消毒在培养整个过程中,都需要是一个无菌环境原因:5、pH、温度、光照菊花:pH=5.8温度控制在18—22℃每日光照12h植物组织培养用培养基,含有植物生长发育所需要各种营养物质,这些营养物质同样为细菌等微小生物提供了适合营养。在这种培养基上,细菌等微小生物比植物细胞含有更强新陈代谢能力,它们比植物细胞生长、繁殖得更快,并且它们会产生毒素,使培养植物细胞不久中毒死亡。因此,植物组织培养要想取得成功,必须有效地预防细菌等污染,确保培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求,就要在植物组织培养过程中进行一系列消毒、灭菌,并且要求无菌操作。第5页第5页制备MS固体培养基外植体消毒接种培养移栽栽培四、试验操作思考:高等植物是光能自养型生物,为何在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基?答案:此时组织或细胞为离体,即细胞所生活环境为液体有机物营养环境,而不是能表达其整个植物体光能自养冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上思考:培养过程中为何需要进行光照?答案:在培养过程中,是脱分化、再分化过程,伴随芽和根形成,就含有了自养能力,是由细胞到一个个体演变过程思考:在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境?1、培养基灭菌;(高压蒸汽灭菌)2、外植体消毒;(酒精、氯化汞)3、接种无菌操作;(酒精、酒精灯——灼烧)4、无菌箱中培养;5、移栽到消过毒环境中生存一段时间。第6页第6页21.下图是植物组织培养简略表示。据此回答:①②③练习1、下图是植物组织培养简略表示。据此回答:(1)①表示__________________,它能被培养成为④主线原因是______________________________________。(2)②表示____________,它与①相比分化程度____________,全能性____________。(3)若想制成人工种子,应选取____________。(4)若①是花药,则④是____________,继续对其使用____________处理可取得____________正常植株,该过程称为____________。(5)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成④叶片颜色为____________,这阐明____________。(6)若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤药物——紫草素,培养将进行到____________。④①脱分化②再分化③答案:(1)离体植物组织或器官植物细胞含有全能性(2)愈伤组织低高(3)③(4)单倍体植株秋水仙素纯合体单倍体育种(5)绿色含有表示叶绿体基因(6)②第7页第7页练习2、基因型为AaBb水稻(含24条染色体)花药通过无菌操作接入试管后,在一定条件下形成试管苗,问:(1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成不规则细胞团,愈伤组织形成过程中,必须从培养基中取得_____________等营养物质。(2)要增进花粉细胞分裂生长,培养基中应有_____________和_____________两类激素。(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根,再由芽发育成叶和茎。这一过程必须予以光照,其原因是_____________能利用光能制造有机物,供试管苗生长发育。(4)试管苗细胞核中含_________条脱氧核糖核苷酸链。(5)哺育成试管苗也许出现基因型有_____________。答案:(1)水、无机盐、维生素和小分子有机物(2)细胞分裂素植物生长素(3)叶绿体(4)24(5)AB、aB、Ab、ab第8页第8页办法:酶解法在温和条件下,用纤维素酶、果胶酶分解物理法:离心、振动、电刺激等化学法:用聚乙二醇(PEG)等试剂作为诱导剂包括膜融合和核融合形成各种杂种细胞AA、AB、BB等植物组织培养过程第9页第9页练习:右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:(1)环节①是________________,最惯用办法是_____________________。(2)环节③普通惯用化学试剂是________,目的是__________________。(3)在利用杂种细胞哺育成为杂种植株过程中,利用技术手段是________,其中环节④相称于___________,环节⑤相称于____________。(4)植物体细胞杂交目的是取得新杂种植株。使____________能够在新植物体上有所表现,其主线原因_________________。(5)若远源杂交亲本A和B都是二倍体,则杂种植株为________倍体。(6)从理论上讲,杂种植株育性为_________。若利用老式有性杂交办法能否实现?________。并阐明理由______________。因此,这项研究对于培养作物新品种方面重大意义在于______________。(7)利用植物体细胞杂交办法哺育作物新品种过程中,遗传物质传递是否遵循孟德尔遗传规律?为何?_____________________。答案:(1)去掉细胞壁,分离出有活力原生质体//酶解法(2)聚乙二醇(PEG)//诱导不同植物体细胞原生质体融合(3)植物组织培养//脱分化/
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