实验室常用试剂,缓冲液,培养基配方 takara

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0)□18份谊度1MTSHC1□etwila按下堤・皿&拓UIH丽*pHMpH值州Cl1A的70mlZ6的60mlaogml4■将漕Ef登1L・&压契■后.心保存.住■:应oum冷券皿•后KKWPM1.因为而疏5>材值・皿的亶化是另很大.AJML的pHOSMWSt*位.1.5M7HS-HCI(pH8.8)Efl份沌度［£mTriana□EM*il□EMXftiq・181.7gTrts■于15中.2・A«600mMMH|子水.充分皿湾解.3>用泳*WPpHg&8.4■将溥L.&■潺■压灵■后.食理保存.住■:因为而疏5>5»皿的亶化是另很大.A10xTEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)EUatfrilt*100mMTri^KX10mMH)TA□CMSil□配If方法1.1MTrte4ia8uler(JH7.4.7复SX»100mi900mMH)TAg<0)20ml2向娅中JlAlgOmi的去H子札均匀煜合.a将制tw舂星1l后.压五3M醋酸钠（PH5.2）□ffl份沌度newtloomi□£MX）&1.QNaOAc-3HKD1T100200ml«杯中,m入灼如ml的去点子木搅冲溶解.如入冰用酸诚帝0H值至5.2.就去朋孑事将淬浅定容至ICOml.H3UK席天0G字■偎存.

PBSBuffer137mMNaCt27mMKtt10n^NiiHPOi.2rTMKFtPOa□etmil□e»w»1•葬■下gt宣于1瑚阱中.Nad8gKGO^gNaiHFO-1.42gKH&PO*Q27g向"中aiAWOOf去H子水.充分他杯供»・m^aftitW>H(KiRV£7.4.粘后・A奁K子水将制E»1L.压知R后.KIfilF.EPBSBJte仲无二"U于.ms.可在《访中冲充leiBCfcWLSmMMgCfa.10M酷酸铉□姐份林□EtfS100ml□EMXS1.#・77.1oMMMI于100-200m«!F中.MAWO,子*心窘解.2.f子林澹皿舂蔓100E.3-0WOJ22MmWROjtStB.4E叛口于重湛保存.itt：搏分解.所以不MU压烫■.THs-HCI平衡苯酚□Et5法1.使用原科：大“nmra化拿RHMHK无色0无便可用于分子生”实看・但有HE化皿里甄色改黄色.庄蔓免使用.PW也应量免便用结结■仲必须«16(Tc«W«4U**.化fWlJS«W2i.娜殳攻导致RNgM的交M.gft.新勘削H珈NARNA蹴取级为■毫«1D»W便用皿・跆曰愤行分子"学实*.2.5注意:并祈1蜘■蹈制屁MHE应*RK及防耕S.所有■作均应在透风・中徐行.尾皿皮肤1曲L应用大■水册.舞用ME好.忌用2SH.3-»B«f：因为HA条件下睥”涅于有机■.因it便用粕引^财1蹄谖行平暨使却》«达梨7另以上.皿平砒I作^族邮(X)童化*应贮存HOC.皇翊I状航从雄程中取出的*首先ETFfiBttXttiaua.就后在6昨水落中便*&充分敝解・0MX»M«(&QjinoE)i*化f一样心H.衲储》»不霓全抑例皿金履嘉子幼瑁警含札同射因XSKfi.有”方便叫有机«・③MXgWiMT3O(pH8X)).便IHMWt充分分B后.It去上屈水柘.③FM作分■③.⑤心SWfiQIMTrtMO(PH8X».便用磴力盼仲.♦置使X充分分屋后.除去上度水遂.❸IMK我胃■分上屈水0G(MpHg・U有魂龄？值大于ZB.③将于微色gK中4十哄保存.苯酚/氯仿/异戊u(25:24:1)□EMX浊1.说明：从皿律品中■去膏白使用辑掌仿佛戊11(26:24:1).咒仿可便■白.而iwwmai于摘除也封卷中出财，m.2.配岫博：持T心lOTg础"体却博仿懈戊H(34:1)煜合均匀后.BAW&tt吨中，c保弃.10%(W/V)SDS□翊昕210%(V//V)SOS□EMft100ml□IE制方法？.g*0g统腹的SOS村于100~200E场杯中.加入WOrrl的去海于水68Ctll«AiSW?•噩IB笊E谶调节pH值¥7.2.a将帝成定有亲woN后.本约保存

2NNaOH□era□EMX法2NNaOH100ml1.■取80m峨Jfi林■于100—200小11科绑中（心侦M|遂程中大・敢蜘・WWttttUW好薄娶）.2耕费gNaOH小心地WAMfiMF中.gfilt算.用去H子林朝EUWOml.中后.BS««.25NHCI25NHQ□KMK100mi1.«7&子本中JlA21.6m盼g漂（11£N）.均匀祝合.2宣浪保存.5MNaCISMNaCl□etm1LE3E制方法1.*2922gNaCUt于1L妍中.JlA约600^»棱11于水后《»«1解.2-M&M子水LB.造■分成小份.a«M压天■后."C保存.20%(W/V)Glucose20%(W/V)GLoom□etm100ml□■MW法1.琢取20gduoo8■于100-200伽密中.心翊0m哄,于水丘山落解.2W孑木将JBET翌100村・am■压天■后.“保春.SolutionI26fTrHa(F*«9.10mMS)7A.SOmMGluooM（质粒提取用）□cm1LDKi«方法1.BWTWBB.■于1LfiW中.1MTri^HO(pH8X»25M0_6MEDIA(pHB<0)20rrt20%GLoote(1.11M)45rrldNO910m2・iM压灭■后.4C«ff.arrtttScMon!*MK2rrttf>RN«eA(20Wnl).Solutionn20。mNNaOH1%|W^V)SOS（质粒提取用）□etts500m|匚lew方法，•量5R下列落波.宣于500巾1烧杯中.1OH>SDS60rrt2NNaOHSOrrl加灭茜水定^5500ml.免分混匀.笙治保存.此落液保存时间■分不要乞过一个月.注意，SOSS产31气泄.不安鬼力授样.

SolutionIII□岫ut（质粒提取用）口呻□Et5法3MKOAC.5MCH2COOH600ml中.KQAo147gCHaCOQH57£E2.MX300gKEWtWBK.M£W子水转1BEW500m.XA*压天■后.，C".0.5MED7A口组缺T(pH8.0)口□ie»t方法OHHHA1Li.lWiae.igNa^ejTA.aHX).■于1林中.2・"9600me腌N于札充分”・3.用NaOHWUpHOUEOO(翊OgftoOH).ETpHOHWatEDTA^BW«rti.4EH孑水将MWBEMU5.iM分成小份后.■压烫■・&K1蹄.1MDTT□姐蝴□EM*方法1MDTT20mfW34）9gDTT,办察0的帅»心管内.B20mi«a01MNaQAc年心）.落第后使用皿质例皿*..3.1M分成小份&・・"C促春.10mMATP□组缺t□CMS□E«W法10fT*JATP20m做12lEgNa^TP・3HQ・或隙50mifl脚■心管内.M20mgfT6HC1(pHBX)).垃・分成小价后.・20'C保春.蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法30%(W/V)Acrylamide□»«««*皿所)^^□EMS1LAoytamido290gBIS10g2向娅中心翊00nW去H子札充分HWJMI.L.用045wngt去4演.4于中B保存.n：丙瞬微舞有很强的神些誓也并可・包球敏收.箕作用具有根*性.Rtmaa手套。.颦芮■心无将.但也应握慎".因为有可”有少■的未HA成份.40%(W/V)Acrylamide皿河稣阿□EMK1L□e”法1.Acryttmicfe360gBIS20g2向做中a>Ai*O0f»J|子水.充分MW落解.am子水将落宜E星1L.用04缺mgt去余&。刊心i中4C保存.也“丙MttlUg强的神&*牲.井可皮网I收.X作用IMTMtt.手套•.肇丙・Rtt无■・但也位理慎搔作.因为有可”有夕■的未略成份.10%(W/V)过硫酸钱g敝度修CEttt10m|□S第方法1•株取19过m入io却醇去*子点玩枝掉浮购.贮存于4C.注意，10初过稼概候落液在4C保枷可使何2制左右.怒过期吸会失去*化打用.5xTris-GlycineBuffercrnwwr。化叩化伐•林心％（馈/）sos（SDS^PAGE电泳缨冲液）1Lnew方法1.此18.1gGlycim94gSDS&0g2心翊OOrr绷去■于札吟".L后.5XSDSLoadingBuffer□tatmr260mMTrte4«(pH6W)10%(WN)SOSGO%(W/V)BPB60%(V/V)8%(W/V)OTWZil(244E)□EM*□EM方法5ml「■取下列试如曾于10m«辑N心管中.1MTrteHCI1.25ESOS08gBPB25mg2£E2-W子水JB解后定害蔓6mi.3.小份(600MV»)TKlfiW.&便用时将25心■小使中.8-HA244%o5g由吹在直濯下保存f月左右.凝胶处理液口蛆妙度凝胶处理液口蛆妙度(SDAAGE银氨染色用)COW□EM方法50%(VZV)叩*9,10%(V/V)或二度100ml〔.■取下列试御.如入100-200ml的试招8中.甲耳80m戊二底10mdg40nt考马斯亮蓝R・250染色液0.1%(WV)«m«BR-2fiO.25%(V/V)鼻牌10%(VN)□Etmil□CM方法i.fWig«M»HH-250.®T1L"中.2・«250g畀确中.Hm««.3ai00m埼湖皿投掉均匀.4MXa50ml»*WT*.ft并均匀.&用*HHRgBLE.KilfifF.考马斯亮蓝染色口组《«扯1盛W/V)g晓(V/V)ZN脱色液口配g1L法1.ttifi100rrtZBfiOrtdHO860E2.充分碗合后使用.凝胶固定液口组份浓度50%(V/V)甲既10%(V/V>KK(SDJAGE银蒙染色用)口««'L□et5法■♦下列试■■干il■试中〃甲尊500rtfittt100rtdHO400nt2.用匀混合后女僵保有.均与混合后室混镣存.斑胶染色液（SD&PAGE银J［染色用）□组份由0球(W/V)V61%(V/V)蔑NHmgOXM%(W/V)NaOH□EtM100ml□IMI方法AJ00-200m峋泗演中.20^4(^032rrl琉NHa・H：Q1rrl4%NaOH1ttidHOSBrrl2.均sir合.财岫》无急a明状.urn相mhj低状.am应补*mu.3*3皿不型KF.显影液（SDS^AGE银氨染色用）口组份波度oxxe%(W/V)拧H.Q02%(V/V)甲醵□EtfS1L□IMI方法1.尊■下宣于1Lttl侦中.fiOrrg甲醒Q2rriMA1L去H于水后.版辑WMLK1保春.

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50X7AEBuffer(pH8.5)2MTrMtM.WOmMH>7A□EMB1L1.Tris242gN&g)TA・2HQ3Z2g2-ftflWF中・A«600mW去国子札a*57・1m岫#.充分4W子水将XHBW客蔓1L后.KlttW.10XTBEBuffer(pH8.3)□fflttift#690EMTnn>0tt.20mMEOTAEE«IilSB新方法下列试刑.白于tL^ff中.Trfe108gNteeDTA•2HQ7.44g«r»g向精杯中切入的000ml的去湾于水.充分挨样海藉.切去篇子水将溶液定程至11后.宗海保存.10XMOPSBuffer200mMMOPS,20rrMNaOAalOrrtJH>7A□EMK1L□■Ml方法1.®>41-figMOPS,■于1LM解中.2f700mlD€P(决a水.ttWXM.a使用2N心观|响伯皿0.41MNaQAc(OEPC<ba)20ml05MEDIA(pHBQ)(0EPClh9)20ml&用D€PC<bB水将落波W容蔓1L.&用04Sg・3t去知L7.KUMM.盅落哽如后会亶黄.亶mt也可便用,{&亶■射不蔓使用.漠乙锭(10mg/ml)□48份梁度10mg航1魂乙键□EMB100ml□etw法i.»«igaztt.心强100m哄中.2JIA去II子*100ml.充分掩舞敷2克金JBIW乙锭.a将落皿移中.心哄保存.4魂2：3工作浓度为0£pgm心，•须小心搔作.Agarose凝胶法1.配*&■的电源及制酷用咐冷做(»«*O5XTBE«1Agarose凝胶锲做心及邳加r.中.(怠戒体■不题a：用于wwwig衲和aawi*"须统一.，性形顾灌口财上保鲜■.芥口L上乳*Ml.购在心炉中妍埸化皿・・础Hl任中.骂蒋渡滂■后.fltM±K»¥W.小EWMZML(WW1充分均匀场化.0•作・«敷次.：uuum宪企第化.必盛注・.在能波炉中何不宣逢长.■次»»»否用会引she沸.gam皿蜘度不准.暮会损坏榆波炉.场化gHL么须但住皿所充分完全靖化.否JH.6.使漕*H段0O・c左右.(MWAO5P0W).并充分理匀.逵：aztt*-WMWB.»«»**.WQJUM»a«AM«M*.食般厚度一ft在3、6mm".a»TftttMa(大1930分钟~12).储后放置于电姓槽中邮电姓.您溷殴不立叩使用明.谓用保笄■将皿包好后在，c下保机Tft可保存2-欧.□aomuusMr^tiHKDNA的■«分6xLoadingBuffer(DNA电泳用)LJfflWJKK30EDTA6xLoadingBuffer(DNA电泳用)LJfflWJKK30EDTA38%(V/V)Glyoerd0履％(WV)WmCyanolFF0^J5%(WV)BromcphenciBua□EMi500ml□U制方法1.撕1下列汶耕.H于500e|缱杯中.EDTA44gBromo|ii«nolBud260mgXy*neCyaiolFF250mg2.内燃坏中如入WOOml的去嘉于水后,如烬哇拜兖分溶解.3切入1龄刀|的甘：由(Gb«cefd＞后.使用2N&aOH例节pH值茫7Q,4.用去懑于水定盲亲5O0e|后.富谜鼻存.10xLoadingBuffer(RNA电泳用)10mM60%(AW)0^5%(W/)025%(WV)H)1AGlyoard俱noCyanolFFBramcphenciBlue□EMSiom□CWT法1.*下列试刑.■于中.0^MH)TA(pH8XQ200。Bramo^tMnolBue26mgXyWwCyanoiFF26mg2.向•心■中后.充分JWHB第.3-MA6m«mi(Gfyoerd)后.充分暹匀.■HmBCNA^HmWI(bp)0%1AKJ-300000.7%800-1^0001X)%500-10081^%00-7X)001-8%200.3.0002M60-2XJOO核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20XSSCCMW*L=»MIii□£•!核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20XSSCCMW*L=»MIii□£•!方法1.尊■下琳病.■于1L«MF中.Nad1703flgg2HO882g2向晚中■入翊ooms臆-于水.充分IWHW.amiKNHCl.调值星7.0&.U\o"CurrentDocument"20xSSPEBuffer□««««*"mn«csm心g.08mhjta

口£M量1Loe«t»»1Nad1703flN«H2FC4•HaO27#gN^€DT4・gHaO74g2向做中加入第600«1»*胄于水.充分授*落解.a・NaOHSppH值星7.4(m6m*»10NNaOK).子林博蛙喜蔓1L.50xDenhardt's溶液电份波度1%(w〃)所*“。1%(W〃)Pdyvfnylpyntftdane1%(W〃)BSAnewsSoog□e«|方法■于600m嗷环中.Acdl<JO6gPdyMfi/pyrrcftdone6gBSA6g孑术gom.充分IFHaMa子次将查600ml.4用分釜成”26川.&・*蹄.0.5M璘酸盐Buffercm岫r□etmilCMBM方法1-M134gNWPOa•7HO>T1LJ«F中.2MAW800rrttfttWT*充分心落•・aaiAaswwoa(mmi)调pxww值ap.2.aw孑术u&«a«SJW后.KilfiW.

SalmonDNA(畦鱼精DNA)□IS伽1度10SttmonDNA□EM*翊00ml□EM^T法1fWg・CNA2g*F600m>«蜉中.MM9200majTEBufcr.2.用W2-XMBMX4ml邮MNad,flMCM泳度为0」M.3-用卷殴和*«仿各次.4.日收水邮B披后.便用17号皮下注射针头快蜘眼打溥傲杉吹.以切W2NA.ai入am体枳的叫zsim行?:#»*.6-W^BttONAft.第第干100m蜘■于水中.破7»跻Dan值.计JHHWRNA或度后.叫3AJ»yi0mgEH10分钟后.分1诚小价（1mi册）.-arc®#.便用《r在法水浴中淄6分钟后.理旬冰浴冷药.DNA变性缓冲液t.5MNaCl.0.5MNaOH□EMSit□IB制方法i.稔量下列试札曾于1L«而中.Nad87.7gNaOH20g2向燃料中加入约BOOrrl的去时子水.充分挽押溶解3.加去窗子木将*堂定客至1L后.室渥保存.预杂交液/杂交液（DNA杂交用）□fflWW6xSSC«SSPE)6xD«ihardrs0_8%(W/V)SDS100pg*nlSttmcnDNA□Km100ml口丘制方法1募・下列试札BT200mHWF中.20XSSC(«SSPE)30ml60xD«rhardrs10mi10%SDS5ml10mgvmSalmonDNA1mldg5<mi2.充廊匀后.预杂交液/杂交液（RNA杂交用）□IflttiW6xSSC(MSSPE)5xDenhardfs0^%(W/V)SDS100薄础SdmonDNA60%(V/V)Rrmamidt□EM*100ml□EM方法1.J.下界如1,置于200m*中.20XSSC(或SSPE)8mlSOxDenhardft10ml10%SDS6ml10mgMSt(manDNA1miFormanido60mldXO侦2.充分促匀后.便用045网gt去余质后使用.膜转移缓冲液（Western杂交用）DfAWMl3mMGtytim.48mMTri&0037%(W/V)SDS.20%(V/V)甲HuEMit法1.Glycine2£gTWt83gSDS037g2向flWF申去H子水.充分橙郴MLaMM子林iMDTWEaOOmi后，・A200g甲碑・TBSTBuffer(Western杂交膜清洗液)CMS份聚度2DmMThs-Hd.1fiOmMNaCt0X)6%(V/V)Ms20□Ett*1L□KW方法1.Nad8_8gIMTns-HCI(pH&O)2>ml2由炒中MM腱8m®腌K子水.宪分It郴MLaMXQ5mi20后充分建匀.于水将JBEM1L后.“保存.封闭缓冲液（Western杂交用）DfflaJMt6%(W/V)皿奶MBSTButerEIEMI100ml口«•!方法1.gRJDN»»MMt100mi»TBSTBui■中.芜分2«C保衲用(*何瞄岫B戏用).实验室常用培养基的配制方法Ampicillin(100mg/ml)□tatftiWE100m州AmpbKn□CMI®ml□IMWF法1.尊・5gAmpotoBT®仰|心代中.夹■水.充分理合君解后,CTfifiOml.。小(1ml册)后.・20.c保存.IPTG(24mg/ml)□ffltft沌度dm畋PTG□EM*®mlDK1I方法^GIT®■中.2心40的天・*.充分理m后.«W60ml.a用Q22S3瞄皿・.4小份分It(1mva)后.-20c«F.X-Gal(20mg/ml)□ifltftift度20x-GalC£Mi50m|□«■(方法r^llgX-GalB^SOmW心管中.M入40mlDMF(二甲就甲心)充分混合落❷后走吝至50ml.小份分装(1EMJH后.・20.C・JMW.LB培养基□ffitftiUt1%(W.V)Trypcono.0.5%(W.V)YeastExUact1%(W-V)NaCI□KMILcetwr法〔.Trypiom10g\bmiExtract5gNaCi10g加入约800e|的去需子水,充分投拌溶解.枷5NNaOH《灿2m|).WUpHttHZO.子木将财越定客至1L.5.离混富压天函后.4C保存.LB/Amp培养基□fit***1%(W/V)Tryptone0.5%(W«V)¥b&s!Wad1%(VW)NadOJmQElAmpidlin□KM*1Lce«w法i.»«下州*札.于1成环中.Tryptone10gYMtiExtad6gNad10g2HA蜘00g去H子水.充分ttlWB第.a«M6NNaOHUlpfMflUpq.U压天■后.冷却蔓每1.G*A1mlfcMn(lOOmgVnl)后均匀祝合.7*保存.

TB培养基口姐蝴15%(W/V)Typlone2.4%(W/V)katfExtractG4%(V/V)Glyoerd17mMKHsPOa72KaKPOa□KM*□EM方法1L(0.17MKH.PO-.0.72MICMPO-)100ml.JM»231gKrt«Mal2_54g5dTe0mW»jr秫中.后.》3«子水WWE100ml.■遍■压灭■・2.却1下刑试札■于1环中.Tryplono12gYeeslExtract24gGlyoerol4mi3・A约SOOmift去H子水.充分mH.子林ttHaWWEU6.«MS3E«.5.丽史以下*・AJOOmW)上炉天脚*心中*6.4'cft^.TB/Amp培养基□蛆册《*1.2%(W/V)Tryplone24%(W/V)MsatfExtract0<4%(V/V)Gtyoard17mMKHaFOa72mM3PO«G1mg^nlAn0cMn□EM□CM方法IL配制或酷公境仲液《0.17MKKPO、.0.72MK>HPO»)1(X)m|.洛嫉231gKH.g如l2.!WgK小PO<于90rr|的去舜干水中也待溶心后.加去襦子木定容至l00m|高温禹压灭。・Tryplom12gYyaimct24gGlyosrol4mla如入约88e|的去廊子水.突分攻并溶斯.,t«£M子次将培养■定容至1L后.扃鹰事侄灭AL待落;夜冷却至GOC以下昧加入100H论上逐灭函象蛙W网液和1frWMpok(I00mgtn|>.&均匀重合后4C舞存.SOB培养基2%(W/V)Trypiom0J%(W/V)**Extraol005%(W/V)Nad25mMKO10mMMgCfe□£tm1L□eim法1.配*SOmMKCOW.在90ml的去N子水中希期费。。后.CTMIOOml.2£»2MMgCMga.在90哄H子水中瀚麻19。MgC为后.H翌100ml.・UM压天・.awF列试札宣于1L烧杯中.Tryplone20gYeastExtract5gNaCl05g<MM»800m«Wrll子水.充分aB«10mi2Q0mMKd»W.成密中.&HMN心幅雄黄T由皿7Q7.MX去,于水将g««WE1L.■后・4・c保存.aOMm入5mlJOBfiSMMgCMBB.soc培养基Dffl份g2%(W/V)0J%(W/V)006%(W/V)25mM10mM20mMTyptonoExtractNadgMgCbwm□SMS100miOE■方法1.£W1W18gW®W»T90meWT*«.充分璃尊&»«100血.用0义^也皿»»・2M100mlSO6iHM4>MXMani均匀虞合.2XYT培养基VC2XYT培养基□18份JME1.6%(W-V)irypsnef(WV)YeastExtras0.5%(WV>NaCI:•称熨下列试列.■于1L烧杯中.TOC\o"1-5"\h\zTryptone16gEMd10gNad6g加入约800ml的去高子水.充分我祥溶解.«»5NNaOH.凹节pH做至7。*去*子水将培鼻■定客至1L.赢由乙压天■后.4C«ff.□ten方法NZM培养基□ten方法NZM培养基□ia份沌度1%(WN)NZft05%(W/V)NaCI0J2%(VWV)Mg90a-7HO<l>bxbroth□组份湖t□CMK□EM方法2%(WA/)Tr)'ptaro.0.5%(W)V)YeaslExtract.0.5%(W/V>MgSO“・7KO1Lt.W下列iX利.惠于II宗杯中.Tryptom20gWastEmct6gMgSOiTH^O5gN加入约8Be|的去夜于水.充分度择潟解・M滴如1NKDH.刈节pHI亲7血4.8去暖子木将培养是定有辛1L.鼠由国«5任天菊后.4C«Ty.NZCYM培养基□istmi05%(W/V)WastExraolai%(w/v)CttminoAid1%(W/V)NZtt06%(W/V)Nad0J2%(W/V)MQSd・7HQ1.尊取下州OW.置于1侦阱中.WasiExtract50CttSHMOACBdigNZtt10QNad%MgSO«・7g2g充分HWMW.WMNN8