细胞工程整理版

资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。二．动物细胞工程【课标扫描】1.简述动物的细胞培养与体细胞克隆。2.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体。【考试说明的要求】1．动物的细胞培养与体细胞克隆(A级)2．细胞融合与单克隆抗体(A级)【知识网络】动物细胞工程动物细胞工程动物体细胞核移植技术和克隆动物动物细胞培养动物细胞培养的概念细胞培养的过程细胞培养的条件细胞培养技术的应用核移植技术和克隆动物的概念动物体细胞核移植技术的过程动物体细胞核移植技术的应用前景动物体细胞核移植技术存在的问题①抗原制备②免疫动物③免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备④细胞融合⑤杂交瘤细胞的选择培养⑥杂交瘤细胞的筛选⑦杂交瘤细胞的克隆化⑧单克隆抗体的检定⑨分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立⑩单克隆抗体的大量制备。单克隆抗体获得获得抗体的传统方法,缺点单一抗体需解决的问题杂种细胞的特点步骤单克隆抗体的应用优点应用作为诊断试剂:”早早孕诊断试剂盒”用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症”生物导弹”:特异性强,灵敏度高,化学性质单一动物细胞融合动物细胞融合概念、原理和结果动物细胞融合的方法和过程意义:最重要的是获得大量单克隆抗体【重点难点】一、动物细胞培养1．原理:细胞增殖2．动物细胞培养过程(1)选材:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养。(2)动物细胞培养流程:(3)生长特点:①贴壁生长:培养瓶中的悬浮液细胞,紧贴培养瓶内壁才能生长。要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。②接触抑制:当培养瓶中内壁生长细胞彼此紧密接触时,细胞不再分裂。3．动物细胞培养和植物细胞培养比较:

动物细胞培养植物细胞培养原理细胞的增殖细胞的全能性细胞来源胚胎或幼龄动物组织或器官离体植物器官、组织或细胞培养基状态液体固体成分天然培养基合成培养基组成葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物器皿培养瓶锥形瓶过程原代生长,传代生长更换培养基,细胞增值分化生长特点贴壁生长,细胞增值不分化诱导形成愈伤组织,细胞增值分化细胞进行异养需氧代谢接种前处理灭菌、用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞灭菌培养条件恒温、无菌、无需光照常温、无菌、光照条件培养目的1.生产蛋白质生物制品2.获取大量细胞3.检测有毒物质1.

快速繁育无病毒植株2.

生产药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂等培养结果细胞株→细胞系愈伤组织→植株二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1体细胞核移植的过程必须弄清的几个问题①动物细胞的全能性会随着动物体的发育而逐渐受到限制,其主要原因是什么?细胞分化②克隆高产牛所用的受体细胞是什么?为什么?去核的卵母细胞,处于减数第二次分裂中期。因为卵母细胞中含有促使细胞核表示全能性的物质和营养条件。③克隆高产牛过程所利用的生物技术有哪些?细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植④当前核移植技术中普遍使用的去核方法是什么?显微操作法2．体细胞核移植技术存在的问题(1)成功率非常低:产下的活克隆动物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%。(2)存在健康问题:许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等。(3)克隆动物食品安全问题。三、动物细胞融合与单克隆抗体1．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合的原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性细胞融合前的处理去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导手段离心、电刺激、振动、聚乙二醇等试剂诱导同左,再加灭活的病毒诱导用途克服远源杂交不亲和,获得杂种植株制备单克隆抗体的技术之一共同点都能产生杂种细胞2．单克隆抗体和常规抗体的比较项目分泌特点生产单克隆抗体杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高产量高,易纯化分离常规抗体各淋巴B细胞特异性差、灵敏度低产量低,分离困难【考点解析】一、动物细胞工程[例1能使动物细胞融合的特有的诱导因子是A．离心 B．灭活的病毒 C．电激 D．振动【解析】常见的动物细胞融合的诱导因子是聚乙二醇和灭活的病毒。其中聚乙二醇既可用于促进植物原生质体融合,又可用于促进动物原生质体融合。而灭活的病毒只能用于促进动物细胞的融合,如灭活的仙台病毒是最常见的诱导因子,其诱导原理是因为病毒具有侵染细胞的能力,优点是融合率高,对各种动物细胞都适用。二、动物细胞培养[例2]下列关于动物细胞培养的有关叙述中正确的是A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B.动物细胞培养液中一般含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理【解析】在动物细胞培养过程中,两次用到胰蛋白酶处理,一次是使动物细胞分散开,制成细胞悬浮液;第二次是使细胞从培养瓶壁上分离下来,便于分瓶传代培养。传代培养50代以后,一般核形会发生变化,再继续培养,有些细胞会获得不死性;动物细胞培养的条件是:①无菌、无毒的环境;②营养,如需要糖、氨基酸,促进生长因子、无机盐、微量元素等,一般还需要加入血清、血浆等一些天然成分;③温度和PH;④气体环境;它需要生长素而需要维生素等。答案:D三、动物体细胞核移植技术和克隆动物[例3]在克隆多利羊的过程中,下列哪项技术没有运用到()A.细胞培养技术B.细胞核移植C.胚胎移植技术D.基因工程技术解析:考查克隆羊产生的过程。多利羊的培育过程是:将一只母羊(A羊)卵细胞的细胞核吸出,得到不含核的卵细胞。然后,将实验室中培养的另一只母羊(B羊)的乳腺上皮细胞的细胞核注入到无细胞核的卵细胞中并进行电刺激,这样就经过核移植技术形成了一个同时含有B羊核遗传物质和A羊细胞质的重组卵细胞。融合后的卵细胞经过体外细胞培养形成早期胚胎。然后把这个胚胎移植到第三只羊(C羊)的子宫中,让C羊为胚胎发育提供发育场所和营养物质,这个过程利用了胚胎移植技术。胚胎就在C羊子宫内发育成熟。C羊产下的羊就是克隆羊多利。从以上分析能够看出,多利产生的过程中没有使用基因工程技术。答案:D四、动物细胞融合与单克隆抗体[例4]下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述,不正确的是A．给小鼠注射抗原,是为了获得能产生相应抗体的B细胞B．B细胞与骨髓瘤细胞混合培养,是为了获得融合细胞C．杂交瘤细胞进行体外培养,是为了获得单克隆抗体D．杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎解析:经过多次筛选获得的杂交瘤细胞是能够分泌所需抗体的细胞,将杂交瘤细胞进行体内培养,目的是获得大量的单克隆抗体,而不是胚胎。答案:D例5(上海)下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题(1)人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异________:从免疫学角度看,这种凝集原是________。(2)图中细胞中1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的________细胞,这种细胞具有产生________________的特点,但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2,是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞,这种细胞在体外培养时能________________,但不会产生抗体。(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点,经特殊处理,在促细胞融合因子的作用下,使两种细胞发生融合,形成图中的细胞3,这种细胞称为________________。把它在乙培养皿中进行培养,则能产生大量的细胞群,这种方法称为________________。(4)过程①的主要目的__________________。经过过程②或⑧的培养方法能产生大量________________________抗体。解析:第一次从融合细胞和非融合细胞中筛选杂交瘤细胞;第二次从多种杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞(产生抗体的杂交瘤细胞所产生的未必是目的抗体)。答案(1)糖蛋白抗原(2)免疫B淋巴单一的抗A抗体(或单一的特异性抗体)快速大量增殖(3)杂交瘤细胞单克隆(4)筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞抗A单克隆【能力测试】(时间:45分钟,分值:60分)一、单项选择题(每小题2分,共40分)1徐州市—高三第三次)下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤,其中对单克隆抗体制备的相关叙述中不正确的是①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞②将X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合A.实验顺序应当是①③⑦⑤④③⑥B.③过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆C.⑦过程获得的细胞均可无限增殖D.利用细胞融合生产单克隆抗体过程中一般要经过两次筛选D．利用细胞融合生产单克隆抗体过程中一般要经过两次筛选2下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是 A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养中的人B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞3.(盐城市09高三年级摸底17．)用单克隆抗体研制而成的”生物导弹”由两部分组成,一是”瞄准装置”,二是杀伤性”弹头”。下列对此叙述不正确的是A．”瞄准装置”是指识别肿瘤的单克隆抗体B．”弹头”具有选择性杀伤肿瘤细胞的功能C．”弹头”由放射性同位素、化学药物等物质构成D．”生物导弹”的制备利用了细胞工程技术4制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括(A)①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植A.①②B.①③C.②③D.③④5.利用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是(D)A.用纯化的核衣壳蛋白重复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养每个效应B细胞能够获得大量针对SARS病毒的克隆抗体C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者6下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体叙述,不正确的是(D)A.给小鼠注射抗原,是为了获得能产生相应抗体的B细胞B.B细胞与骨髓瘤细胞混合培养,是为了获得融合细胞[来源:学+科+网]C.杂交瘤细胞进行体外培养,是为了获得单克隆抗体D.杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎7.动物细胞体外培养时,一般要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是(A)A.正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B.有无血清对正常细胞培养的影响不同C.培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大8.单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞经过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中,错误的是(D)B10、(·江苏卷)关于现代生物技术应用的叙述,错误的是A．蛋白质工程能够合成自然界不存在的蛋白质B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C．植物组织培养技术能够用于植物茎尖脱毒D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养 答案:B11．下列有关制备单克隆抗体的过程叙述错误的是DA．给小鼠注射抗原的目的是刺激小鼠产生相应的(效应)B细胞B．融合后的杂交瘤细胞具有体外增殖和分泌抗体的特性C．筛选时先选出杂交瘤细胞,再选出能产生特定抗体的细胞D．杂交瘤细胞在培养过程中会出现细胞接触抑制现象12．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是CA．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,也可用胃蛋白酶处理B．细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞的呼吸C．甲、乙细胞在持续的原代培养过程中,乙会出现停止增殖的现象D．仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒13、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到融合细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体。该过程中,与小鼠骨髓瘤细胞融合的细胞是AA．经过免疫的B淋巴细胞B．不经过免疫的T淋巴细胞C．经过免疫的T淋巴细胞D．不经过免疫的B淋巴细胞14、下列过程中,没有发生膜融合的是CA．植物体细胞杂交B．动物细胞融合C．基因表示载体的构建D．效应B细胞分泌抗体15.(无锡常州四区(市)九校25．)生产单克隆抗体时,在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞,因为该试剂 Ａ．能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制Ｂ．能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活Ｃ．选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制Ｄ．能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成16.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是(D)A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体B．培养中的人B细胞能够无限地增殖C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞17．下列细胞工程技术中能使后代个体染色体组加倍的是 (B)A．细胞或组织培养技术 B．细胞融合技术C．动物胚胎移植技术D．核移植技术18.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的”复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下提供的”复生”野驴个体的方法中能够成功的是(C)A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培养成新个体D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体19．关于动物细胞培养的错误叙述是A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离,制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右,所培育的细胞会衰老死亡20．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体二、多项选择题:(本大题包括5小题,每小题有不止一个选项符合题意,全选对者得3分,其它情况不给分。15分)21、利用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述错误的是ABDA．用纯化的核衣壳蛋白重复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B．体外培养单个浆细胞能够获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C．将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不一定能诊断出SARS病毒感染者22.卵细胞作为生殖细胞,在生物技术中可用于(ABD) A.克隆动物时细胞核的受体B.进行体外受精,培育试管动物C.直接植物组织培养形成可育的二倍体试管苗D.形成受精卵,利用转基因和植物组织培养,培育抗虫棉植株23.下列在现代生物科技的应用中,需要进行检测与筛选的是ABCDA.对植物的愈伤组织进行诱变处理,培育作物新品种B.将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,制备单克隆抗体C.利用植物体细胞杂交技术培育”萝卜－甘蓝”D.将抗虫基因导入植物细胞,培育具有抗虫特性的新植株24.下列关于细胞工程的叙述,错误的是BCDA.植物细胞融合必须先制备原生质体B.动物细胞培养的原理是动物细胞的细胞核具有全能性C.试管婴儿技术包括核移植和胚胎移植两个方面D.经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状25.(南京市第一学期期末调研24．)(多选)下列与应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤如下,其中对单克隆抗体制备的相关叙述中正确的是 ①将X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞 ②从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 ③利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合 ④将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养 ⑤筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 ⑥从腹水中提取抗体 A．实验顺序应当是①②③⑤④⑥B．④过程中产生的多个杂交瘤细胞也为克隆 C．③过程获得的细胞均可无限增殖D．③到⑤的过程中一般要经过两次筛选二、非选择题(共45分)26．(09江苏高考)(8分)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞▲。(2)气室中充入5％C02:气体的主要作用是▲。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的▲,以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。材料用具:肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物X溶液等。实验过程:①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。⑦利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(”√”表示已完成的步骤)。甲乙丙丁步骤一:加人肝脏培养液√√√√步骤二:加入有机物X溶液√√,步骤三:放置肝脏小块√上表中还需进行的操作是▲。③培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察▲,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明▲。27(1)制备单克隆抗体过程中要用到、等技术。(2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于,使小鼠产生细胞,此过程属于特异性免疫中的免疫。与植物体细胞杂交不同的是,图中操作加入的促融剂一般是。(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径,主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤能够阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。①利用上述特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是。(4)此过程生产的单克隆抗体能够与特异性结合,从而诊断早孕。(5)除了图示的培养杂交瘤细胞的方法外,还常见方法,此法对培养条件无特殊要求。28.(南京市高三第—次调研31．)(7分)日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献,获得诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光,该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答相关问题。(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为▲基因。(2)在②过程进行转基因体细胞的筛选时,比较简易的筛选方法是▲。(3)在④过程培养重组细胞时,培养液中一般含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和▲等。(4)以上培育过程中应用到的生物技术有▲等。(5)科学工作者在实验过程中为了保证实验成功,往往一次做多个核移植,为了从乙兔体内一次获得多个卵细胞,往往需要向乙兔体内注入的是促性腺激素,而不是性激素,原因是▲。(6)在以上③核移植过程中,乙兔提供的细胞应是▲,移核之前要对此去核的原因是▲。29.(9分)如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请根据图回答:(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自。(2)培养首先在C瓶中进行,瓶中的培养液成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和等。(3)培养到一定阶段后,细胞会停止分裂增殖,此时,瓶壁上形成的细胞层数为。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶来处理,然后分装继续培养。(4)一般来说,细胞在传至_______代左右时,增殖会逐渐缓慢,以至于完全停止。当继续传代培养时,少部分细胞获得不死性,这些细胞已经发生了突变。(5)在细胞培养过程中,一般在条件下保存细胞。因为在这种条件下。细胞中的活性降低,细胞的速率降低。(6)进行细胞培养时,一般采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含____________________的混合气体的培养箱中进行培养。30(1)图中涉及的现代生物技术有____________________________(至少写三种)。(2分)(2)小羊a、小羊b、小羊c的性状表现(填”相同”或”不同”)____,原因是_____________;(3)若研究发现羊N细胞中线粒体发达,故而它的产奶率高,则小羊a会有这一优良性状吗?________,判断依据是________。(2分)(4)有人设想将羊体细胞与牛体细胞进行融合,以获得新物种”羊—牛”,你认为依据当前的生物技术和理论能否实现这一构想?。理由是________。(2分)31(7分)为加快优良种牛的繁殖速度,科学家采用了以下两种方法:请据图的信息回答:(1)试管牛与克隆牛的培育过程中均用到的细胞工程技术有(2)用来促进B牛多排卵的激素是分泌的促性腺激素,E牛的性别是(3)产生F牛的生殖方式属于。(4)要培养高产奶率的转基因牛,一般将目的基因导入的受体细胞是;导入常见法;如果要获得能表示出人干扰素(一种淋巴因子)的目的基因,则需要从人体的哪种细胞中获得?。(2分)32．(10分)下图为细胞融合的简略过程,请据图回答:⑴若A、B是植物细胞,在细胞融合之前须处理获得原生质体,由A、B到细胞C的过程中,常见的促融剂是_______________。融合完成的标志是____________。⑵若A、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用__________技术把D培养成植株。⑶若A、B是动物细胞,一般取自___________,然后用________使其分散开来;由A、B到C的过程中,常见的且不用于植物细胞融合的手段是_________。A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有___________________________。⑷若该过程仍是制备单克隆抗体,在A、B到C的过程中,两两融合所形成的C有_____种,用来培养的D细胞应该是________________,获得D后,常见的培养方法是培养液中培养和。33.(13分)下图是制备分泌抗原X抗体的过程,根据图解回答问题:⑴制备单克隆抗体的步骤:①将__________注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得淋巴细胞,其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。②由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了和的动物细胞工程技术手段,前者常见的诱导剂与植物原生质体融合不同的是。③将诱导后产生的多种细胞,放在含________培养基的多孔培养板上培养,筛选。④这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞的能力,又具有__________________的本事。⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞,培养板中每孔放一个细胞进行培养。⑥将阳性细胞进行增殖,从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。⑵单克隆抗体是由同样的抗体分子组成,与一般的血清抗体相比,单克隆抗体的优点是。⑶用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性,因为它是用小鼠的_____________细胞制备的,其化学本质是___________,对人类有异物性和免疫原性。(4)动物细胞培养液的配方一般含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是,还含有。(5)图中有两次筛选过程,其中步骤④目的是筛选出,步骤⑤的目的是筛选出。34.(09届江苏省百校高三样本分析考试生物试34B)题胚胎干细胞介导法(转基因动物培育的途径之一),即将外源基因导入胚胎干细胞,然后将转基因的胚胎干细胞注射于受体动物胚胎后可参与宿主的胚胎构成,形成嵌合体,直至达到种系嵌合。下图是实验过程示意图,请分析回答下列问题:(1)胚胎干细胞(ES细胞)体外培养时需要在_________________________________条件下进行,由于人们对细胞所需营养物质还没有搞清楚,因此在使用合成培养基培养细胞时需加入___________。(2)图中①表示在___________作用的培养基上培养,②表示导入___________时期的胚胎,生成嵌合体小鼠④,外源DNA转染的ES细胞产生的变异类型属于______________________(3)1984年中国第一例转生长激素(GH)基因的鱼诞生,但鱼类易于逃逸、扩散,会引起生态安全性问题,试分析原因:_______________________________________。35．(09山东高考)(8分)(生物一现代生物科技专题)人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图:请回答:(1)过程①代表的是。(2)过程②构建A基因表过载体时,必须使用和两种工具酶。(3)过程③采用的实验技术是,获得的X是。(4)对健康人进行该传染病免疫预