银杏培育指南组培育苗

银杏培育指南组培育苗范围本标准规定了银杏组培育苗的外植体采集和消毒、培养基配制与保存、接种、瓶苗培养、炼苗与移栽、质量标准、商品苗包装、运输和档案管理等技术要求。本标准适用于银杏的组培育苗。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6001育苗技术规程LY/T1882林木组织培养育苗技术规程外植体采集和消毒外植体采集外植体主要包括茎尖、茎段和胚。选取1～2年生生长健壮、具有品种典型性状的优良单株，取幼苗外围当年生幼嫩枝条，采集时间在3～4月；胚取当年种仁，种子采集时间为10月上中旬，沙藏贮存70d～90d。种核除去外种皮、中种皮和内种皮，分离出种胚。外植体消毒茎尖和茎段茎尖和茎段剪去叶片，用肥皂水擦洗，然后用自来水冲洗干净，无菌操作台下依次用70%酒精消毒30s，含有吐温20的0.1%氯化汞消毒8min～10min，无菌水冲洗3～5次，然后用无菌滤纸吸去茎尖和茎段表面的水分。种胚种胚先用肥皂水擦洗，然后用自来水冲洗干净，无菌操作台下依次用70%酒精消毒30s，含有吐温20的0.1%氯化汞消毒6min～8min，无菌水冲洗3～5次，然后用无菌滤纸吸去种胚表面的水分。外植体制备茎尖和茎段在无菌环境下，剪取0.5cm～1.0cm长的茎尖或1cm～2cm长的茎段，每段留1～2个腋芽或顶芽，转入已消毒的培养皿中备用。胚将已消毒的种胚，转入培养皿中备用。培养基配制与保存培养基的配制与保存执行LY/T1882标准。接种在无菌状态下，将培养皿中的外植体用镊子直插式接种于培养瓶中，每瓶接种2～3个。封口膜要及时捆绑，并将品种代号、培养基类型、个人编号以及接种日期标示在瓶上。瓶苗培养初代培养茎段外植体的初代培养使用芽诱导培养基，配方为MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.5mg/L+0.20%AC；胚外植体的初代培养使用MS培养基，pH5.8～6.0。培养温度为25℃±2℃，置于1500lx～2000lx的光照条件下培养10d～15d，光照8h/d～12h/d。增殖培养外植体增殖3～5倍后，剪成1.0cm～2.0cm带芽小段，转入新的增殖培养基中。培养基配方为MS+NAA0.1～0.5mg/L+6-BA0.1～2.0mg/L+0.25%AC。培养条件同初代培养。增殖周期为30d～45d。复壮继代培养8～10代后进行复壮。生根培养选择生长健壮、叶色正常，高3cm～5cm的嫩茎接种于生根培养基中，培养基配方为1/2MS+IBA0.5mg/L。培养条件同初代培养。炼苗与移栽瓶苗炼苗选取有活力，生长健壮，叶色正常，根数≥5条，根长≥0.8cm的组培苗，温室自然光闭口炼苗2～3周，开口炼苗5d～9d，温度保持25℃±3℃。出瓶驯化洗净组培苗残留的培养基，移栽到无纺布容器中驯化。栽培基质采用细河沙+珍珠岩+草炭土，其体积比为1:1:2，使用前12h～24h用0.5%～0.7%的高锰酸钾消毒。驯化期间保持温度20℃～30℃，空气湿度70%～80%，光照强烈时可使用遮光度60%～70%的遮阳网遮阳。小苗长出新叶后，每7d～10d喷施叶面肥一次。移栽经过25d～30d驯化即可移栽至XX。苗期管理执行GB/T6001标准。质量标准组培苗质量标准苗木粗壮、挺直、有活力，具原品种特性。苗高3cm～5cm，叶片≥3片，大小协调、有层次感、色泽正常。根3～5条，根长适中，长势好。同一批次达标的组培苗在90%以上，且培养基无污染。移栽苗的质量标准苗木健壮、挺拔，形态完整，具原品种特性。苗高5cm～10cm，地径≥0.2cm。叶片≥6片，大小协调，色泽正常。根系完整、发达。同一批次达标的组培苗在90%以上，无检疫性病虫害。包装、运输包装瓶苗保留在培养瓶中，出瓶苗洗去X脂后装入塑料小盒，移栽苗统一泡沫箱包装。可再加外包装。运输X脂苗应使用纸托盘运输。装