血红蛋白的提取和分离习题带答案_第1页
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文档简介

精选精选课题3血红蛋白的提取和分别【学习目标】1、简述蛋白质提取和分别的基来源理2、理解蛋白质提取与分别的实验操作过程【要点与难点】要点:蛋白质提取和分别的基来源理难点:蛋白质提取与分别的实验操作(凝胶色谱操作)过程【知识链接】.血红蛋白存在于何种细胞?其特征和作用分别是什么?.为什么不采纳鸡血做实验资料?.分别不一样种类蛋白质的依照是什么?【自主学习内容一】基础知识(记忆).凝胶色谱法: 凝胶色谱法也称做,是依据分别蛋白质的有效方法。凝胶其实是一些由 组成的多孔球体,在小球体内部有很多贯串的通道,相对分子质量不一样的蛋白质分子经过凝胶时的速度不一样,相对分子质量较小的蛋白质因为能够 行程较_,挪动速度 ;而相对分子质量较大的的蛋白质 ,只好在 一挪动,行或,挪动速度 。.缓冲液 缓冲液往常是由1〜2种缓冲剂(如NaHCO3、(NH4)2SO4)溶解于水中配制而成;其作用是。.电泳: 电泳是指电泳利用了待分别样品中各分子以及,使带电分子产生不一样的,进而实现样品中各样分子的分别。两种常用的电泳方法是和 。在测定蛋白质分子量时往常使用 ,此中SDS的作用是,。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁徙率取决于它以及等要素。【自主学习内容二】实验操作( 凝胶色谱法).蛋白质的提取和分别 一般分四步:、、和。.样品办理(1)红细胞的清洗:清洗红细胞的目的是采集的血样要实时经过采纳的方法使红液分层,用胶头吸管吸出上层透明的黄,将基层红细胞倒入烧杯,再加入,迟缓搅拌低速离心,这样重复三次,直到 ,表示红细胞忆清洗洁净。注意:离心转速及一离心时间不可以过长,不然 ,达不到分别成效。(2)血红蛋白的开释:原理是当外界溶液浓度低于细胞内液浓度时,细胞 ,红细胞因为没有 的保护,而 ,开释出血红蛋白;使用的试剂是 。(3)分别血红蛋白溶液:将搅拌好的混淆溶液离心后,试管中的溶液分为 4层。第一层为无色透明的 ,第2层为白色薄层固体,是 ,第3层是红色透明的液体,这是 一 ,第4层是红细胞破裂物积淀物(其余杂质,呈 色)。将试管中的液体用滤纸过滤,除掉 ,于分液漏斗中静置片晌后,分出一 层的红色透明液体。(4)透析:取2mL的血红蛋白溶液装入 中,将透析袋放入盛有300mL的物质量浓度为 中(pH为),透析12h。透析能够去除样品中 的杂质,或而 ―.凝胶色谱操作第一要;第二步是,因为 ,所以装柱前需要依据色谱柱的内体积计算所需的凝胶量。在装填凝胶柱时,一不得有 .,防止影响分别成效;第三步是。【合作研究】.凝胶色谱分别蛋白质的原理是如何的?.依据凝胶色谱分别的原理剖析,在装填凝胶时重要密、平均的原由。课题3 血红蛋白的提取和分别当堂检测TOC\o"1-5"\h\z.利用凝胶色谱法分别蛋白质,最初洗脱的蛋白质特色是( )A.相对分子质量大的 B.溶解度高的 C.相对分子质量小的D.所带电荷多的.凝胶色谱法中所用的凝胶化学实质大多是( )A.糖类化合物 B.脂质C.蛋白质 D.核酸.相对分子质量不一样的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个 ( )B C D.用凝胶色谱法分别蛋白质时,分子量大的蛋白质 ()A.行程较长,挪动速度较慢 B.行程较长,挪动速度较快C.行程较短,挪动速度较慢 D.行程较短,挪动速度较快.能进入凝胶内部通道的蛋白质是指 ( )A.相对分子质量大的 B.吸附性高的C.相对分子质量小的 D.溶解度低的.在对蛋白质进行洗脱时,使用的试剂是A.蒸馏水 B.生理盐水 C.缓冲液 D.饱和磷酸盐溶液.缓冲液的作用是在必定范围内,抵制外界的影响来保持以下哪一项状态基本不变的A.温度 B.pH C.浸透压 D.氧气浓度TOC\o"1-5"\h\z.初步分别血红蛋白的实验顶用到的缓冲溶液为 ( )A.H2CO3-NaHCO3缓冲液 B.NH40H—NH4cl缓冲液C.CH3COOH—CH3COONa缓冲液 D.H3Po4缓冲液.蛋白质提取和分别分为哪几步( )A样品办理、凝胶色谱操作、 SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品办理、凝胶色谱操作、纯化C.样品办理、粗分别、纯化、纯度判定 D.样品办理、纯化、粗分别、纯度判定.血红蛋白因含有什么物质而呈红色 ( )A.O2 B.COC.Mg2+ D.血红素.将搅拌好的混淆液离心来分别血红蛋白溶液时,第二层是( )A.甲苯B.血红蛋白水溶液 C.脂溶性物质的积淀层 D.其余杂质的积淀.以下说法不正确的选项是( )A.血红蛋白在开释时,加蒸馏水到原血液的体积,再加 40%体积的甲苯,充足搅拌B.血红蛋白溶液离心后分为 4层,第1层为白色薄层固体C.血红蛋白溶液离心后分为 4层,第4层为暗红色积淀物

D.血红蛋白溶液离心后分为4层14.以下操作正确的选项是()A.分别红细胞时采纳低速长时间隔心C.分别血红蛋白溶液是低速短时间隔心第3层为红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液B.第3层为红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液B.红细胞开释出血红蛋白只要要加入蒸馏水便可D.透析时要用20mmol/l的磷酸缓冲液,透析12hA.电荷的多少 B.分子的大小 C.肽链的多少16.清洗红细胞的目的是( )A.去除血清 B.去除杂蛋白 C.除掉血小板D.分子形状的差异D.除掉水AD.分子形状的差异D.除掉水A.低速长时间隔心 B,低速短时间隔心C.高速长时间隔心 D.高速短时间隔心TOC\o"1-5"\h\z18.SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入 SDS的作用是( )A.增大蛋白质的相对分子质量 B.改变蛋白质的形状C.掩饰不一样种蛋白责问的电荷差异 D.减少蛋白质的相对分子质量19.以下相关凝胶色谱法中样品的加入和洗脱的表达中,正确的选项是 ()A.先加入1mL透析后的样品 B.加样前要使缓冲液迟缓降落,所有流出C.假如红色区带平均一致地挪动,说明色谱柱制作成功 D.洗脱时能够用缓冲液也能够用清水20.在以下哪一种条件下生物大分子拥有的可解离的基团会带上正电或负电 ()A.必定温度 B.必定pH C.必定压强 D.必定容器21.电泳时带电粒子在电场的作用下,挪动所向的电极的方向与其所带电荷是 ( )A.同样 B,相反 C,相对D.相向22.样品的加入和洗脱的操作不正确的选项是( )加样前,翻开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液迟缓降落到凝胶面的下边加样后,翻开下端出口,使样品浸透凝胶床内等样品完整进入凝胶层后,封闭下端出口用吸管当心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端,不要损坏凝胶面23.人体正常的血红蛋白中应含有Fe2+,若误食亚硝酸盐,则致使血红蛋白中的Fe2+。转变为Fe3+,产生高价铁血红蛋白而中毒。服用维生素C可排除亚硝酸盐中毒。在维生素C参加的反应中()A.亚硝酸盐是复原剂 B.维生素C是氧化剂C.亚硝酸盐被氧化 D.维生素C将Fe3+复原为Fe2+24.加有少许柠檬酸钠(防备血液凝结)的猪血分装于标号①、②、③的试管中,随后挨次加入质量分数为0.3%、0.9%和1.5%的氯化钠溶液稀释,30min后离心。以下表达中,正确的是( )A.①和②试管的上清液中有血红蛋白,积淀中都有红细胞B.②和③试管的上清液呈淡黄色,积淀中均有皱缩的红细胞C.①和③试管的积淀中分别有红细胞的碎片和皱缩的红细胞D.②和③试管的上清液是血清(血清与血浆的主要差异是血清中不含纤维蛋白原)25.在血红蛋白的整个提取过程中,不停用磷酸缓冲液办理的目的是 ( )A.磷酸缓冲液会加快血红蛋白的提取过程 B.血红蛋白是一种两性物质,需要酸中和C.防备血红蛋白被02氧化 D.让血红蛋白处在稳固的pH范围内,保持其构造和功能26.以下相关提取和分别血红蛋白的程度表达错误的选项是()样品的办理就是经过一系列操作采集到血红蛋白溶液经过透析能够去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取可经过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除掉,即样品的纯化D.可经过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳判定血红蛋白的纯度27.采纳红细胞作分别蛋白质的实验资料,以下是其长处的是 ( )A.血红蛋白是有色蛋白 B.红细胞无细胞核C.红细胞蛋白质含量高 D.红细胞DNA含量高28.下边对于对血红蛋白提取和分别的样品的办理举措中,不正确的选项是 ( )A.采集血样后要高速短时问离心获取血细胞B.清洗三次后如上清液仍有黄色,可增添清洗次数,不然血浆蛋白没法除净。C.在蒸馏水和甲苯的作用下,细胞破裂,开释出血红蛋白D.开释血红蛋白后再经过离心,就能够使血红蛋白和其余杂质分别开来29.以下相关提取和分别血红蛋白的过程的表达中,不正确的选项是 ( )A.样品的办理就是经过一系列操作采集到血红蛋白溶液B.经过透析能够去除样品中相对分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取C.可经过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除掉,即样品的纯化D.可经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳判定 血红蛋白的纯度30.雄性激素是小分子脂溶性物质,很简单穿过细胞膜。睾丸每日赋泌的雄性激素约 7mg,此中约2%呈游离状态,其余在血中与血浆蛋白呈可逆性联合。 以下相关雄性激素与血浆蛋白联合后的作用的表达中,不正确的选项是( )A.使其不简单经过肾脏排出 B.使其不简单进入细胞C.使其有效浓度处于特定水平 D.克制雄性激素发挥作用红细胞含有大批的血红蛋白,红细胞的机能主假如由血红蛋白达成,血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳,我们能够采纳猪、牛、羊或其余脊椎动物的血液进行实验,来提取和分别血红蛋白,请回答以下相关问题:1)血红蛋白提取和分别的程度可分为四步: 、 、 和 。2)实验前取新鲜的血液,要牢记在采血容器中早先加入柠檬酸钠,取血回来,立刻进行离心,采集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是 。以上所述的过程即是样品办理,它包含 、 、采集血红蛋白溶液。3)采集的血红蛋白溶液在透析袋中

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