微生物检验培养基

第十一章培养基本考点：1组分1质2质3剂基类1基2基3基4基5基基择1板2板3板4板5）S板6或S琼脂7基8汤可培细离定要必的。一、培养基的组成成分质长等的质：1提供细菌生长繁殖所需要的氮源。动植物蛋白质经酶或酸物将提。受作。水注密。而嘌腺酸物脂、无机盐还生肉浸液可为细菌提供氮源和碳源，但能满足细菌的需要，因此在制备培养基入～和0.5。缩低浸液，但因无糖可用作肠道杆菌别培养基的基础成分使。和糖单糖（醇卫1/8茅醇除葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源的基本成分外，其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做的发酵反应。5血液中既含有蛋白质多种氨基酸类无机盐类物又供（如V因子、（X子据细菌在血液培养基中的溶血现象而进行鉴定。6素养无，好基。养质以仅用于制备一些特接养培养结核分枝杆菌的鸡蛋培养基和培养白喉杆菌的吕氏血清培养基。.但、浸氨。质最常用的凝固物质为琼脂、蛋血。达在4凝的解。剂在制备培养基时常加入抑制剂和指示剂，这些并不是细菌生长繁殖所必需的物质，而是由于选择、鉴定及判断结果的需要。1作于非的长目选剂煌酸抗。否、、草用氧还指剂。普通肉汤，普通琼脂平板细菌生长培养肠道致病菌的SS琼脂、普通肉汤，普通琼脂平板细菌生长培养肠道致病菌的SS琼脂类 作用 举例基营养培养基鉴别培养基择养基

基础培养基广泛用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的琼脂平板、巧克力血平板利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和发酵管、克氏双糖铁琼脂指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放（KIA红-美蓝琼脂和动的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细力-吲哚-尿素（MIU）培养基菌。在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于对所选择的细菌种类的生长。2/8厌氧培养基细菌L型培养基

培养专性厌氧菌的培养基针对细胞壁缺损的细菌L型

疱肉培养基琉基乙醇酸钠培养基采用高渗（3％～5％NaC、10％～20％蔗糖或7％聚乙烯吡咯烷酮等）低琼脂培养基类培基种类 作用 举例液培养基体基固培养基

菌接生长现细菌种生纯药验

肉培养基液体培养基中入030%琼脂液体培养基中入152%琼脂三、分离培养基的选择细应基：板适分离板。板其中有V和X因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等的标本。板发酵型革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上菌落颜色不同，便于鉴别菌种。板在麦康凯板上能否生长，是非发酵菌鉴定的一个依据。（五S琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分强以加选对。（或TS脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。基。汤。蓝/麦蓝选革兰阴性杆菌；而含杆等。：于别种3/8B力态菌杂长[答疑编号5]』D于力力态种杂长[答疑编号5]』D章细菌的养与分离技术本章点：1本件1室2室3具2术1法2法3法4法5法6法法1法2法3法象1象2象3象5菌L查1集2法中有时观其别。4/8一、基本条件室完应。室的。.面m处射20mn其要时管。生员用、。4洗l次。物品进菌。。室。人区。2毒30mn，。培离他。且时室的菌态。台垂流通方式。6。具：、C0养箱、氧培养设备；2用于观察细菌形态及标本直接镜检镜；用于高压蒸气灭菌器、干烤箱；用于储存培养基、诊柜；用于挑取标本、接种等的接种器具，包接种环和接种针；制的pH计；细菌检验操作火焰灯或酒精灯；。二、细菌的接种与分离技术法法法分区划线分离法斜面接种法

途主要用于杂菌不多的标本适用于杂菌量较多的标本要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性5/8液体接种（避免气胶的产生）穿刺接种法倾注平板法

多用于一些液体生化试验管的接种此法主要用于半固体培养基、明胶及双糖管的接种。测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数时常用此方法。涂布接种法

常用于纸片法药物敏感性测定，也可用于被检标本中的细菌计数。三、细菌培养的方法化养培。氧法本法是临床细菌室最常用的培养方法，适于一般需氧和兼性厌氧菌的培养。将已接种面和液体培养基等，置于3育8～2h长需培养更长的时间才最是28在4也能生长，如李斯特菌。法有些置%～l0C0鲁2菌等给C0。21箱节00过2 2培养的0，运送需O箱2 2即适室。法盖子，烛光经几分钟后内C0占～l%入35。2培养为1～2h种养～7天或更长。钠0g酸0l接种好的培养基都放入干燥器内，盖紧干燥器的盖子，倾斜容器使浓盐酸与碳酸氢钠接触生成C0。2法适用于专性厌氧菌和兼性厌氧菌的培养；法。四、细菌的生长现象象1大小、形状、突起、边缘、颜色、表面、透明度和粘度等。：1S落2R落3M落血α溶血：又叫草绿色溶血，菌落。β溶血：又称完全溶血，红细胞的溶。γ溶，菌的变没损。双环：在菌落周围完全溶解菌。上助菌6/8的鉴如铜绿假单胞菌（生姜气味）、变形杆菌（巧克力烧焦气味）、厌氧梭菌（腐败的恶臭味）、放线菌（泥土味）等。4色素。水溶性色素：使菌落周围的培养基出现颜色变化。如铜绿假单胞菌的铜绿色色素。象浑浊生长：大多数细菌。沉淀生长：少数链状排列的细菌如链球菌、炭疽芽胞杆菌。菌膜生长（表面生长）：专性需氧菌如枯草芽胞杆菌、结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌。象半固体培养基用于观察细菌的动力，有鞭毛的细菌除了在穿刺接种的穿刺线上生长两侧均可见羽毛状或性。无鞭毛的细菌只沿穿刺线呈性。五、菌L型的查菌L型细形式。表现为形态多形性、染色不确定性、可滤过性、渗透压敏感性，生化反应减弱特性以及对β-内酰胺类和其他作用细胞壁抗生素的抵抗性。1本:加20%溶液，以保持高渗；血液标本应接种高渗肉汤增菌培养。如增菌肉汤出现于L型选择平板或血平板。养法（L型检养～7天种L型板37养2～7天。L型菌在L型琼脂典“荷包蛋”样的L型菌典型呈颗粒型菌落，涂片经。2L型菌L型板细L型有L出L及L型平及L型两种形态特征及L试验以供临床用药参考。：成丝落团苔膜[答疑编号5]』B.法B法7/8C法基法