长瓣兜兰杂交育种及其种苗繁育技术规程

长瓣兜兰杂交育种及其种苗繁育技术规程范围本文件确立了长瓣兜兰（Paphiopedilumdianthum）杂交育种及其种苗繁育的程序，界定了长瓣兜兰（Paphiopedilumdianthum）杂交育种所涉及的术语和定义、规定了授粉杂交、组培苗繁殖、组培苗移栽和苗期管理等阶段的操作指示，给出了档案管理的要求。本文件适用于广西区内长瓣兜兰的杂交育种、组培苗繁育和组培苗出瓶后的栽培管理。规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。术语和定义下列术语和定义适用于本文件。

原球茎protocorm兰花种子萌发过程中的一种形态学结构，种子的的幼胚吸水膨胀，中部的胚细胞分裂增殖，突破合点端种皮形成球形或椭球形结构。

唇瓣lip又称为唇兜，兜兰花器官的组成部分，由基部的柄（或爪）和顶端的兜组成，是内轮花被片特化形成的特殊结构。出瓶苗mericloneseeding经组织培养获得并移出培养瓶定植于栽培设施内的健康植株。中苗mediumseeding出瓶苗经12～30个月生长，换盆种植于外口径为7.5cm营养钵，还不能开花的正常苗。大苗matureseeding中苗经12～30个月生长，换盆种植于外口径为9.6cm营养钵，能够开花的正常苗。授粉杂交母株选择与处理选择品种纯正、植物学性状一致、农艺性状优良、生长健壮、无病虫害的长瓣兜兰开花植株。花盛开第6d～15d，移除母株花粉，去除母株唇兜或者将唇兜背部靠柱头处戳出洞。花粉采集选择花型较好、生长健壮的异株花朵作父本，用牙签将父本花粉取出，放在干净的纸张上备用。授粉取适量花粉涂抹在母株凹陷的柱头处。柱头授粉后套袋，防止昆虫传播其它花粉。蒴果采收人工授粉270d～330d，在蒴果八成熟且未开裂时采收。组培苗繁殖蒴果消毒将蒴果用自来水洗净，中性洗涤剂冲洗，75％酒精擦拭，流水冲洗15min，在超净工作台上用70％～75％酒精灭菌30s，接着用0.1％升汞溶液浸泡15min～20min，无菌水冲洗5～6次，放置在接种盘内。种子萌发与原球茎诱导切开蒴果，将种子均匀撒在种子萌发诱导培养基上，培养基参见附录A中A.1；用经灭菌处理的胶头滴管加入1～2滴无菌水，摇匀，置于无菌培养室中暗培养40d～60d，约30％种XX出原球茎之后转入光周期为12h的环境条件下培养，培养40d～80d后即可获得健壮的原球茎。培养室温度22℃～26℃，光照强度1000lx～1500lx，光周期12h。原球茎继代增殖将原球茎接种到原球茎增殖培养基上进行培养，培养基参见附录A中A.2。培养室温度22℃～26℃，光照强度2400lx～3200lx，光周期12h，每4周继代一次，增殖倍率达3～7倍，培养60d～80d即可获得3～4片叶的小苗。生根壮苗将具有3～4片叶、叶长2.0cm～3.0cm的小苗转入生根壮苗培养基上培养，培养基参见附录A中A.3。培养室温度22℃～26℃，光照强度2400lx～3200lx，光周期12h，培养50d～60d即可获得健壮完整小苗。炼苗小苗叶片数4～5片、叶长3.5cm～4.5cm时，将组培苗移至炼苗室内炼苗。炼苗室温度18℃～30℃，光照强度5000lx。炼苗10d～15d后，移至栽培设施内自然条件下放置3d～4d，然后打XX口炼苗1d～2d。组培苗移栽环境条件温度18℃～30℃，空气相对湿度60％～90％，光照强度5000lx～8000lx。基质培养基质用兰石和松树皮按照2:1的体积比配制，兰石粒径0.4cm～0.7cm，树皮粒径0.3cm～0.6cm，pH值5.5～6.5为宜。移栽前12h～24h用浓度为0.2％～0.3％高锰酸钾水溶液喷洒消毒。容器塑料穴盘54cm×28cm，每盘50穴，或用外口径为5.0cm～6.8cm的塑料杯。出瓶炼苗后，将苗从瓶中取出，用清水冲净根部残留的培养基，并用1000倍多菌灵或百菌清或甲基托布X溶液喷洒，在阴暗处晾干。栽植把出瓶苗放置在穴盘孔洞或塑料杯正中央，每穴（杯）种植1～2株，栽种后基质宜低于沿口约1.0cm，淋透定根水。苗期管理出瓶苗管理环境控制种植后30d内光照强度宜控制在1800lx～3500lx，空气相对湿度85％～90％，30d后逐步提高光照强度到5500lx～10000lx，空气相对湿度60％～90％。温度18℃～30℃。肥水管理移栽淋透定根水后，2d～4d内不浇水。移栽15d后，结合喷水加入1000倍的尿素液或1/2MS大量元素的营养液作追肥喷施一次。定植20d～25d后，选用2000～3000倍的9-45-15（N-P2O5-K2O）肥液、2000～3000倍的20-20-20（N-P2O5-K2O）肥液和4000倍的20-20-20（N-P2O5-K2O）肥液，每隔7d交替喷施叶面，按产品说明常规使用。生产期间，基质内部树皮表面发白时，一次性浇透水。病虫害防治遵循预防为主、综合防治，加强通风透光、避免过于潮湿，及时清除病残叶片。定植后喷洒1000倍多菌灵或甲基托布X或百菌清消毒一次。15d内，每5d喷洒一次多菌灵或敌克松1000倍液防治猝倒病。在生产期间病虫害防治采取粘虫纸和定期打药相结合的办法，病虫害防治参见附录B。中苗管理基质培养基质用兰石和松树皮按照2:1的体积比配制，兰石粒径0.7cm～1.0cm，树皮粒径0.7cm～0.9cm，pH值5.5～6.5为宜。移栽前12h～24h用浓度为0.2％～0.3％高锰酸钾水溶液喷洒消毒。环境控制温度18℃～30℃，空气相对湿度70％～90％。光照强度逐步提高到7500lx～12000lx。移栽时期与方法当出瓶苗根系布满穴盘孔洞或塑料杯时，换用外口径为7.5cm的塑料杯。除去出瓶苗根部的基质，除掉烂根和无效根，将植株竖直放置在塑料杯正中央，用基质填埋种苗根系，基质以不没住种苗基部为度，栽种后基质宜低于盆沿约1.5cm，淋透定根水。肥水管理移栽淋透定根水后，2d～4d内不浇水。移栽15d后，浇灌3000倍的10-20-30（N-P2O5-K2O）的肥液一次。定植20d～25d后，喷施3000倍20-20-20（N-P2O5-K2O）的肥液，每7d～10d一次，每30d喷施一次3000倍的25-10-20（N-P2O5-K2O）肥液。生产期间，基质内部树皮表面发白时，一次性浇透水。病虫害防治移栽7d后，喷洒1000倍多菌灵与农用链霉素5000倍液混合液一次。在生产期间病虫害防治采取粘虫纸和定期打药相结合的办法，病虫害防治参见附录B。大苗管理基质培养基质用兰石和松树皮按照2:1的体积比配制，兰石粒径1.0cm～1.5cm，树皮粒径1.0cm～1.3cm，pH值5.5～6.5为宜。移栽前12h～24h用浓度为0.2％～0.3％高锰酸钾水溶液喷洒消毒。环境控制温度18℃～30℃，空气相对湿度70％～90％。光照强度逐步提高到8500lx～13000lx移栽时期与方法当出瓶苗根系布满塑料杯时，换用外口径为9.6cm的塑料杯。除去种苗根部的基质，除掉烂根和无效根，将植株竖直放置在塑料杯正中央，用基质填埋种苗根系，基质以不没住种苗基部为度，栽种后基质宜低于盆沿约1.5cm，淋透定根水。肥水管理移栽淋透定根水后，2d～4d内不浇水。定植15d～20d后，喷施2000倍20-20-20（N-P2O5-K2O）的肥液，每7d～10d一次；每15d喷施一次3000倍的10-20-30（N-P2O5-K2O）肥液；在花芽抽出前2周，叶面喷施磷酸二氢钾及少量微量元素；开花期喷施1000～1500倍10-30-10（N-P2O5-K2O）的肥液。生产期间，基质内部树皮表面发白时，一次性浇透水。病虫害防治遵循预防为主、综合防治，加强通风透光、避免过于潮湿，及时清除病残叶片。在生产期间病虫害防治采取粘虫纸和定期打药相结合的办法，病虫害防治参见附录B。档案管理按本文件提出的各项技术要求建立生产档案。主要内容包括：授粉杂交过程亲本生长情况、组培苗繁殖、组培苗移栽、移栽后管理各阶段的生长情况以及环境条件要求等。技术档案由专人记载，经技术负责人审查后存档。

（资料性）

培养基配方种子萌发诱导培养基配方1/4MS（或1/2MS）＋1g/L活性炭＋10％椰子水＋3％白糖＋4.0g/LX脂，pH5.5～5.8。原球茎增殖培养基配方1/2MS（或1/4MS）＋0.5mg/L6-BA＋0.1mg/LNAA＋10％椰子水＋3％白糖＋4.0g/LX脂，pH5.5～5.8。生根壮苗培养基配方1/3MS＋0.75g/L花宝1号（HyponexNo11））＋0.75g/L花宝2号（HyponexNo2HyponexNo1和HyponexNo2是由‘HYPONeX®’公司提供产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品具有相同的效果，则可以使用这些等效产品。））＋2g/L蛋白胨＋37g/L香蕉＋75g/L土豆＋1.5g/L活性炭＋5％椰子水＋3％白糖＋4.0g/LX脂，pH5.5～5.8。HyponexNo1和HyponexNo2是由‘HYPONeX®’公司提供产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品具有相同的效果，则可以使用这些等效产品。

（资料性）

长瓣兜兰主要病虫害化学防治方法表B.1给出了长瓣兜兰主要病虫害化学防治的方法。表B.1长瓣兜兰主要病虫害化学防治方法主要病虫害农药名称制剂用药量使用时期和间隔时间使用方法猝倒病722g/L霜霉威盐酸盐水剂3mL/m2～5mL/m2发病初期苗床浇灌叶斑病50％多菌灵可湿粉剂1000～1200倍液病害发生初期，用药3d后，喷施第2次，用药5d后，喷施第3次喷雾炭疽病50％咪鲜胺锰盐可湿性粉剂3000～4000倍液病害发生初期，用药3d后，