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文档简介
A实验植物光合与呼吸速率的测走一、实验目的光合作用是地球上最重要的生命现象,它是唯一能把太阳能转化为穂定的化学能贮藏在有机物中的过程,是维持地球上物质循环的关键环节,也是农作物产量形成的决定性因素。在植物科学研究中,经常需要测定光合作用。在光合作用(及呼吸作用)测定方法的发展过程中,曾经有过多次革新,其中包括测定干物质积累的称重法,测定C02吸收(和释放)的滴定法,测氯气释放的检压法和氧电极塗等。与这些方法相比,红外线气体分析仪堪称较先进的方法。它不但快速、准确,而且可将测定信号变为电信号输出,便于仪器的自动化和智能化。分子时,其辐射能量减少,被吸收的红外线辐射能量的多少与该气体的吸收系数(K)、气体浓式中:E。:入射红外线的辐射能量;E:透过的红外线的辐射能量。ECO度。测定。常用的气路系统有密闭式和开放式两种(本实验采用密闭式)。1、密闭式气路系统:被测植物或叶片密闭在同化室中,不与同化室外发生任何的气体交换,同化室内的CO2浓度因光合作用而下降,或由呼吸作用而上升,可用IRGA测定同化室内二、仪器AA闭路光合的工作原理为:由两根气路管在叶室和红外线g分析仪之间连通形成回胳进行出植物光合作用速率等数据。A显示显示与阔P气体输出A气体输入红红外氏分应圉闭路光合的工作原理图开路光合的工作原理为,由单根导气管在红外线C0?分析仪与叶室之间连通,形成开路。在开路光合测量时,通入的气体浓度必须是巳知的(如P^OOppm),当数据采集完成后,读出的P那么由仪器读数在光合作用前后的变化值就是植物光合作用所吸收的C02的量 开路光合的光合速率测定公式为:式中各字母代表的参数与闭路光合时一样,F代表气体流量。工作原理图如下稳定气源输入气体输出圏开路光合测呈工作原理图三、实验材料AA甜菜和丁香等植物的叶片(活体)。四、实验步骤度值。预热过程中气泵开关应处在关闭的位置上。值趋向零点附近,调节红外仪前面板“调零”旋钮,显示在“零点”位置。后,旋下跨度电位器上的保护盖,调节跨度换钮使显示C02浓度与标气浓度一致。5、将待测叶片放入同化室(气室),密闭后当CO?浓度稳定下降时,开始测定,读取开始的At(或确定从测定开始到结束所需时间),测定结束后测量叶片的面积(气室面积)。uLLAtSS积(单位mO;V-同化室(包括气略系统)体积(单系统容积是闭路光合中很重要的一项参数。它的值包括了叶室体积、气路管容积和红外线分析仪里气室容积的总合,即V叶赛殊积+V分祈优7■实积AA植物材植物材料呼吸速率同化室体积同化室温CO?浓度落差叶片面积测定时间五、注意事项1、密闭系统的最基本要求是严格密闭,不能漏气,否则无法测定。2、红外仪的滤光效果并不十分理想,水蒸气是干扰测定的主要因素,因此,取样器干燥管内的CaCb要经常更换,避免吸水溶解进入红外仪,污染分析气室,以保证测量精度,延长仪3、实验期间,仪器使用后请立即充电,以确保后续实验正常进行。AA实验四植物体过氧化物酶的测定一、实验目的:掌握用愈创木酚法测定过氯化物酶活性的方法。二、实验原理:过氧化物酶广泛颁布于植物的各个组织器官中。在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,可用分光光度计测量生成物的含量。uLAA零对照.另一只中加入反应混合液3mL,上述酶液ImL(如酶活性过高可适当稀释),立即开启五、结果计算以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小,
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