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药物对离体豚鼠回肠的作用摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)和局部炎症介质组胺(histamine,His)对肠道平滑肌M胆碱受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作用。方法在离体肠平滑肌灌流装置中,测量乙酰胆碱、组胺、阿托品和扑尔敏对豚鼠回肠平滑肌张力的影响。结果以阿托品,扑尔敏分别作用于回肠平滑肌,其受乙酰胆碱、组胺的激动作用较回肠直接受Ach、His激动时作用弱,收缩幅度明显减小,BaCl2的强激动作用不能被阿托品阻断。结论Ach、His能兴奋肠道平滑肌,其激动作用能分别被拮抗剂阿托品和扑尔敏阻断;阿托品不能阻断BaCl2对肠道平滑肌的强烈激动作用。 2关键词乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏材料和方法1.1材料豚鼠1.2仪器离体装置:浴槽(20ml),恒温水浴箱。张力换能器与多道生理信号采集处理系统的连接。RM6240生物信号采集处理系统部分1.3药品10-2g/L氯乙酰胆碱、1g/L硫酸阿托品、10-2g/L组胺磷酸盐,10-3g/L扑尔敏、10g/LBaCl2溶液。1.4方法1.4.1实验装置准备和仪器参数设置 麦氏浴槽加固定量的台氏液(10ml左右)一恒温37°C-95%O2+5%CO2气体一通气速度,气泡一个个逸出为宜一固定张力换能器一参数设置1.4.2标本准备 清醒豚鼠一击头部处死一打开腹腔一找到回盲部一在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段一置于盛有台氏液的培养皿中,将回肠剪成1-1.5cm的几小段,冲洗干净一取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角处分别用缝针穿线,并打结。一端系于浴槽固定钩上,另一端系在张力换能器的悬臂梁上。小房是消化管的是拦部分.小房是消化管的是拦部分.匕遮酮门.下与盲脂相接,全长:囊粒米,蟠曲于腹般中、下部*分为+二指胴、空脂和回肌*忠寺=小聃有哪些适于祯化和吸收和特点个1.4.3通氧一连接PCLab生物信号采集处理系统一文件---打开配置---药物对离体豚鼠平滑肌的作用一配置---零点设置一调节换能器张力(2-3g)-稳定20-30分钟观察项目2.1标本在浴槽内稳定10〜30min后,记录一段正常收缩曲线,依次向麦氏浴槽内加下列药物。加一种药物后观察2〜3min,记录收缩曲线的幅度,然后用台氏液冲洗2次,待基线稳
定后再加另一种药物。每次浴槽液体的容量应相等。2.2加入10-2g/LAch0.2ml,观察并记录曲线,2~3min后换液。2.3重复以上Ach剂量,待收缩达到最高点时加入1g/L阿托品0.2ml,观察并记录曲线。此时不换液,待曲线降至基线或基本稳定后,再加入相同浓度的Ach,观察并记录收缩曲线。2.4加入10-2g/L组胺0.3ml,待作用明显时(1〜2min)迅速换液,使肠肌恢复正常。2.5加入10-2g/L扑尔敏溶液0.2ml,5min后(不换液)加入同量组胺,观察并记录收缩曲线2.6加入10g/LBaCl2溶液1ml,观察其反应,当作用达到最高点,肠段持续于痉挛收缩状态时加入1g/L阿托品0.2ml(或更大),观察并记录收缩曲线。实验结果3.1实验图'jBaCK-换液3.1实验图'jBaCK-换液注:Ach 乙酰胆碱;Atr 阿托品;his 组胺;chl 扑尔敏*p<0.01,与乙酰胆碱组比较;**p<0.01*p<0.01,与乙酰胆碱组比较;**p<0.01,与组胺组比较表1.离体豚鼠回肠实验8个小组的原始数据列表实验小组Ach收缩幅度(g)His收缩幅度(g)AchAch+阿托品His扑尔敏+His11.80.011.520.224.480.023.020.3233.40.162.720.3142.730.043.211.7353.5-0.012.440.2962.130.072.490.7772.28-0.122.14-0.0382.590.083.451.433.3结果组别标本数收缩幅度(g)乙酰胆碱82.86+0.88阿托品+乙酰胆碱80.031+0.081*组胺82.62+0.62组胺+扑尔敏80.628+0.632**表2.药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响注:实验结果采用x±s表示,3.4结果叙述加入10-2g/L乙酰胆碱0.2ml后,张力为2.86±0.88g,先加1g/L阿托品0.2ml再加10-2g/L乙酰胆碱0.2ml,张力为0.031±0.081g显著小于前者,说明阿托品有阻断乙酰胆碱与其受体结合的作用;加入10-2g/L组胺0.3ml张力为2.62±0.62g,先加10-3g/L扑尔敏0.2ml,5min后再加10-2g/L组胺0.3ml张力为0.628±0.632g显著小于前者,说明扑尔敏能阻断组胺与其受体结合;先加10g/LBaCl2溶液1ml再加1g/L阿托品0.2ml后张力基本不变,说明阿托品对BaCl2没有阻断作用。2讨论和结论4.1胃肠道和膀胱平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量Ach能激动M受体,兴奋胃肠道平滑肌,可明显兴奋胃肠道,增加其收缩幅度和张力。EAch与M受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流f,肌浆[Ca2+]f,平滑肌收缩幅度增高。4.2阿托品的作用机制为竞争性拮抗M胆碱受体。阿托品与M胆碱受体结合后,阻断Ach与受体结合,从而拮抗了它们的激动作用,阿托品对M受体有较高选择性,大剂量时对神经节的N受体也有阻断作用。因此,阿托品可以抑制胃肠道平滑肌痉挛,降低蠕动的频率和幅度。⑵4.3组胺对胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,[1]能与平滑肌细胞膜H1受体结合,通过激活G蛋白-磷脂酶C系统,使细胞内Ca2+增高,导致平滑肌收缩,增加其胃肠道平滑肌收缩的幅度和张力。4.4扑尔敏(氯苯那敏)是H1受体拮抗剂,与平滑肌细胞膜H1受体结合后,阻断组胺与H1受体的结合,从而产生抗组胺的作用,E,最终抑制平滑肌的收缩作用,使其收缩的幅度和频率都降低。4.5氯化钡是肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆,使肌浆[Ca2+]f,平滑肌收缩幅度增高;另一方面BaCl2兴奋胆碱能受体,N受体激动时改变Na+K+Ca+通道的电生理学特征,使肌肉收缩。阿托品是M受体阻断剂
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