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文档简介

1.1 1.1 1：aceGBT19011-2008标准主要差异性分析PAGEPAGE1d专题1 基因工程

选修3易考知识点背诵基因工程的概念

基因工程的别名操作环境结果特点

DNA生物体外基因DNA分子水平剪切→拼接→导入→表达产生人类需要的基因产物打破种的界限，定向改造生物本质 基因重组（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）原核生物中分离纯化出来的。DNA酸二酯键特异性。结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端平末端2.“两种DNA（E·coliDNATDNA）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4

4-噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；TDNA4与DNA:DNA单个核苷酸DNADNA3.“载体。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。DNA。其它载体：(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取是人们所需要转移或改造的基因获取目的基因的方 人工合成反转录法化学合成法_。PCR90～95℃DNADNA70～75℃，热稳定DNA。第二步：重组DNA分子稳定存在遗传至下一代。目的基因启动子终止子标记基因+复制原点启动子：是一段有特殊结构的DNA片段首端，是RNA聚合酶mRNA蛋白质。终止子：也是一段有特殊结构的DNA尾端。转录翻译含有目的基因的细胞。转录翻译第三步：转化受体细胞是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。常用的转化方法：，其次还有基因枪法和花粉管通道法显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+DNADNA重组细胞导入受体细胞后，筛目的基因的检测和表达首先要检测转基因生物的染色体DNA，方法是采用DNA。其次还要检测mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA。最后检测，方法是从转基因生物中提取，用相应的抗体杂交。。（三）基因工程的应用抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。（四）蛋白质工程的概念基因修饰或基因合成改造新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（自然界已存在的蛋白质）蛋白质的改造大改：设计并制造自然界中不存在的全新蛋白质，使之具有特定的氨基酸序列、空间结构和预期功能中改：在蛋白质分子中替代某一个肽段或一个特定的结构域小改：通过基因工程中的定点诱变技术，有目的改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基，以改善蛋白质的性质和功能定点诱变技术是改变蛋白质结构的核心之一PCR技术是基因定点诱变的常用方法蛋白质工程基因工程蛋白质工程基因工程实质通过改造基因，以定向改造天然蛋白质，甚 将目的基因从供体转移到受体细胞并在受体细胞至创造自然界不存在的蛋白质 中表达结果合成自然界不存在的蛋白质只能生产自然界已存在的

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