兽医试验室人员培训内容

：验定验定三、ELISA验测。血（emagglutiatintest）利集。验某病毒凝能的现象称为凝emagglutiation)，也病或其接制(hemagglutinationinhibiion，HI)。禽流感）试验HI血凝抑制（．（A）胞表面受体的结构A试验由此名A蛋体体异性合干扰A。该是前O用于感毒离株A亚定与。HA-HI验优是前WHO试的体HA才现I细凝集素，对于其它禽种，也可以考虑选用在调查研究中的禽种红细胞；。1阿（Alevers）制称糖2.5g钠0.8g酸0.055g钠g，至100mL，溶调H至6.1an高压灭菌4℃保。2备2.1血用约m，至少2只SPF鸡如，可用SPF．采血约～4m装L混。2.2胞经1500～1800rmin离心8经0～1800r/min离心8白细薄，重复2液20m，合成红细液4℃保存过5天。2.310%鸡红胞液过5锥心1500～0n8确积(L)入9积L)，。2.41%鸡液取合的10鸡红细胞悬液1L入9L。3抗原（HA）3.1的112入.025mLPBS，换滴头。3.2吸取0.025mL毒液第l匀。3.3第1取0.025mL病毒第2取0.025mL加入第3第11孔从第11孔吸取0.025mL弃，头。3.4孔入0.025mLPBS。3.5孔入0.25mL体积为1%鸡鸡红．置min振荡混匀，在室温2053.6。对照胞1置4℃环应呈。将下定3.7表1：血准类1红细胞全部凝集，均匀铺于孔底100凝++大2++3红胞于孔形成等大的四有小凝块+-红细胞孔底成小圆，四周有许凝块4红细胞于孔底呈小圆点，边缘光滑整齐，即红细胞完全5不凝集能使红（100%，++++）该为1（呈现完全集-。4血（I）4.1根据3制U毒最高稀以4即含U原的倍为1:56则U的稀释数应是1:64（256除以。孔12，第PBS0.025mL孔入11～1的.2加入0.05mLPBS。4.3吸取0.025mL血清加入第1混匀吸0.025mL于第2第0第10取0.025mL。41～1含U液0.025m，室温（约0℃）少30min。4.5每入0.25mL体为1的轻混静约n约20℃，置4℃件。4.6结定制4个U原释为I。于21o2，阳性对照孔血清误差不超过1。HI小于21og2判定I试；HI于31og2；I或为阳性。41og2于载电凝对实于况免。纰血凝验理。为抗。正向间接血凝试验（IH）口蹄疫1原理试（IA。但经的反敏相．2围主于测O。3剂3.196孔110°V板3.2（0μL5μL咀3.3微器3.4O原.5O清.6O清3.7液3.8约0.5ml）6℃水浴灭活30钟4法4.1加液在上1-6排的1-9；第7排的1-4第7第8的-12液0μL。4.2清取1清50μL第1第1孔，并将塑咀插入孔底，右拇轻弹簧1-2出50μL第2出0μL第3第9混出50μL第1排1-9倍数21:⑵1:81:61:⑸1:4⑹:28⑼。1:12、:56．取2第2取3第3均。4.3清在血凝板第7排第1孔清50μ至第4，混后该取出50μL为:2⑴、14⑵1:、1:16⑷第6-7。4.4清在板第8第1清0μL第12出0μL为1：1：4096。4.5加原液对均加O型血凝抗25μL。4.6振匀上1-2分荡混匀现或37℃下静置1.5-2定。4.7判准移清1:16孔，稀液孔”凝集（血球+．。阳清照1:2-1:256“++++为。在对“++”凝集如1清1-5孔呈现“+”—“++”凝-7孔呈现“+”第8呈+第9体为:18。接种口蹄疫疫苗的猪群免疫抗体效价达到1:128（即第7孔）牛群、到1:26（第8孔）呈现