蔬菜中维生素c的测定

蔬菜中维生素c的测定制作人：薛钦时间：2016年5月20日蔬菜中维生素c的测定1.实验背景2.实验目的3.实验原理4.不同的测定方法5.仪器试剂和样品6.实验步骤7.结果计算8.注意事项9.实验结果与讨论一、实验背景维生素C又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。食物中的维生素C被人体小肠上段吸收。一旦吸收，就分布到体内所有的水溶性结构中，正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C，最高储存峰值为3000mg维生素C。正常情况下，维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出体外。维生素C的作用：1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合。2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。3、改善铁、钙和叶酸的利用。4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血，防止关节痛、腰腿痛。6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。7、水溶性强抗氧化剂，主要作用在体内水溶液中。二、实验目的1.人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引起坏血病。2.维生素C含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。3.水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素C含量，了解果蔬品质量的高低。4.了解和掌握2,6-二氯酚靛酚测定维生素C含量的原理和方法。三、实验原理2，6—二氯靛酚是一种染料，其颜色反应表现为两种特性。一是取决于氧化还原状态，氧化态为深蓝色，还原态为无色；二是受其介质酸度的影响，在碱性介质中呈深蓝色，在酸性溶液介质中呈浅红色。

用蓝色的碱性染料标准液，滴定含VC的酸性浸出液，染料被还原为无色，到达终点时，微过量的2、6—二氯靛酚染料在酸性溶液中呈浅红色即为终点。从染料消耗量即可计算出试样中还原型抗坏血酸量。2.6-二氯酚靛酚滴定法维生素C:强的还原性将染料2.6-D还原成无色的2.6-二氯酚靛酚2.6-二氯酚靛酚:强的氧化性中性/碱性:蓝色酸性:红色=N——O-Cl|O=

|Cl氧化型2.6-二氯酚靛酚（蓝色）=N——OHCl|O=

|Cl氧化型2.6-二氯酚靛酚（红色）

O=C|HO—C‖HO—C|H—C|HO—CH|CH2OHO还原型抗坏血酸

O=C|O=C|O=C|H—C|HO—CH|CH2OHO脱氢抗坏血酸N——OHCl|HO

|Cl

——

|H还原型2.6-二氯酚靛酚（无色）

四、不同的测定方法、目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法。荧光法。2，6-二氯靛酚滴定法。2，4-二硝基苯肼法。分光光度分析法。碘量法。荧光法原理

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样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺反应生成具有荧光的喹喔啉,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与邻苯二胺反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022

g/ml。本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。2，4-二硝基苯肼法原理

:总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。碘量法原理:

维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的还原性，能被碘氧化，用碘滴定VC。分光光度分析法原理：维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸。通过吸收光谱曲线法确定维生素C的水溶液的最大吸收波长为267nm，进而通过工作曲线法快速测定蔬菜水果中维生素C的含量。本方法与常规方法比较，具有准确、快速、稳定、试剂易得等优点。五、仪器试剂与样品新鲜生菜滴定管、三角瓶、研钵、量筒、移液管离心机20g/L草酸溶液：称取20g草酸，加水至1000mL。

60g/L碘化钾溶液。0.001mol/L

KIO3标准溶液。2，6-二氯酚靛酚溶液。1mg/ml抗坏血酸标准溶液。六、实验步骤2，6-二氯酚靛酚标准液的标定吸取1mg/ml抗坏血酸溶液1ml置于锥形瓶中，加10ml20g/L草酸，摇匀，用2，6-二氯酚靛酚滴定至溶液呈淡红色。在15s不消失为终点。计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10ml20g/L草酸作空白对照）计算滴定度T：

维生素C的提取和测定1、称取10g新鲜生菜样品，置研钵中，分次加20ml20g/L草酸，研成匀浆，用的20g/L草酸定容100ml。通过纱布过滤后取10ml放于