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文档简介
医学院实验室安全管理制度目录TOC\o"1-5"\h\z前言 3\o"CurrentDocument"第一章机构设置 4\o"CurrentDocument"第二章人员管理 5\o"CurrentDocument"实验室师生准入办法 5\o"CurrentDocument"实验室外来人员管理办法 5\o"CurrentDocument"人员日常管理办法 5\o"CurrentDocument"第三章基础安全 8\o"CurrentDocument"实验室水电安全 8\o"CurrentDocument"实验室值日值班制度 9\o"CurrentDocument"实验室消防管理 9\o"CurrentDocument"第四章实验室安全管理制度 11\o"CurrentDocument"实验室设备仪器管理 11\o"CurrentDocument"药品试剂管理 12\o"CurrentDocument"实验室化学药品的安全管理制度 13\o"CurrentDocument"实验室气体钢瓶安全管理制度 15\o"CurrentDocument"实验室危险废弃物管理制度 17\o"CurrentDocument"实验室安全操作规范 18\o"CurrentDocument"第五章实验室环境污染事故防治应急预案 19\o"CurrentDocument"总则 19\o"CurrentDocument"应急组织体系 19\o"CurrentDocument"应急处理机构 19\o"CurrentDocument"日常管理 20\o"CurrentDocument"事故突发时应急处理机构 20应急状态 20\o"CurrentDocument"应急状态的监测 20\o"CurrentDocument"应急报告 21应急响应和终止 21\o"CurrentDocument"应急响应程序及原则 21\o"CurrentDocument"应急响应的实施 2124\o"CurrentDocument"善后处理工作 25善后工作 25医学院实验室安全管理制度TOC\o"1-5"\h\z事故处理 25\o"CurrentDocument"应急保障 25\o"CurrentDocument"应急救援物资的准备及供应 25\o"CurrentDocument"相关技术资料的管理 26\o"CurrentDocument"组织事故应急救援演练 26\o"CurrentDocument"应急电话公布及知识宣传 26\o"CurrentDocument"第六章实验室主要仪器安全操作规程及注意事项 27蔡司AxioImagerA2正置全自动荧光显微镜安全操作规程及注意事项27\o"CurrentDocument"LeicaCM1860冰冻切片机安全操作规程及注意事项 29\o"CurrentDocument"LeicaRM2235石蜡切片机安全操作规程及注意事项 30Aappliedbiosystems7500荧光定量PCR仪安全操作规程及注意事项..32\o"CurrentDocument"BDAccuriC6安全操作规程及注意事项 35\o"CurrentDocument"BDJazz安全操作规程及注意事项 38\o"CurrentDocument"Nanodrop安全操作规程及注意事项 43\o"CurrentDocument"冻干机安全操作规程及注意事项 44粒度仪(MalvenNanoSizer)安全操作规程及注意事项 45医学院实验室安全管理制度 前言实验室是学生培养、科研的重要依托,实验室资源日益开放及进入实验室的人员数量和流动性增强、实验用房的限制,使得实验室安全工作面临越来越多的问题,实验室的安全问题越来越突出,因此完善实验室安全管理显得越发迫切。安全管理制度的缺失是造成重大事故和人员伤亡的主要原因,近年来实验室安全事故时有发生,给高校带来很大的财产损失和不少的人员伤亡,分析高校安全事故原因,我们不难发现:实验室安全事故有硬件建设方面的问题,也有软件建设方面的原因,突出表现在安全制度不健全、安全意识淡薄,安全技术缺乏,应对紧急事件措施不力等方面。在具体分析每一起造成严重财产损失和人员伤亡的重大安全事故发生过程后,我们都会痛心地发现:每一起事故在发生之初,若能采取正确的处理方法、正确的救援措施和人员逃生方法,事故所造成的损失可以降低到很小的程度。因此,在实验室安全管理中,安全技能教育和培训应放在较为突出的位置。医学院作为新成立的学院,实验室处在新启用阶段,可能存在一定问题。为了营造医学院健康和谐的实验室氛围,提高科研的效率和质量,我们针对学院实验室的特殊情况制定了《医学院实验室安全管理制度》的试行版本。希望学院实验室所有成员自觉遵守本制度汇编中的相关规定,共同营造良好的实验室环境。本制度从师生安全、水电安全、气瓶安全、生化药品安全、防火安全等多个角度对实验室运行管理和科研过程中涉及的各项问题进行了规定。条例中凡带有“必须”、“禁止”、“应当”等明确性的规定要求所有师生按照要求遵守,带有“希望”、“建议”、“可以”等非明确性的规定时可以根据自己的个人情况实施。实验室鼓励科研的个性化,但个性化不能违背本条例中的基本原则。本条例自制定之日起试行,三个月后根据试行情况进行相应调整。欢迎所有师生在试行期积极反馈,提出宝贵的意见。医学院实验室安全管理制度第一章机构设置为认真贯彻落实教育部和学校安全工作通知精神,落实预防为主的安全管理思路,加强实验室安全管理工作,经学院研究决定成立医学院实验室安全工作组织机构,全面负责学院的实验室安全管理工作。一、实验室安全领导小组组长:杨正林李钰副组长:夏阳牟雁东黄晓林成员:宁琳杜娟张隆基郑敏杨静杨露谢雷二、学院专职实验室安全管理人郑敏教授三、实验室安全责任人实验室名称实验室房间号责任人基础医学公共实验平台203-210谢雷视觉功能与重构研究实验平台102-109王子艳基因与干细胞治疗实验平台301-307张隆基医学院实验室安全管理制度第二章人员管理实验室师生准入办法实验室的安全是平安校园建设的重要环节,是教学和科研工作顺利开展的先决保障。为推动我院实验室安全生产管理的制度化、专业化、规范化进程,确保教学、科研实验过程的顺利进行,提高师生应对实验室突发安全事故的应急处理能力,预防和减少实验室安全事故,保障师生员工生命、财产安全。经研究决定,对进入实验室的师生实行实验室安全准入制度,即:通过实验室安全知识学习、考试后方可录入指纹进入实验室。进入实验室后进入者签署安全承诺书。实验室外来人员管理办法为加强实验室管理,提高实验室安全,维护实验的良好秩序和环境,现对实验室成员及外来人员,特作如下规定:.未经批准,禁止外来人员进入实验室参观、采访、拍照、摄像等。.非实验室人员未经授权不得直接或间接操纵实验室任何仪器设备。.进入实验室外来人员,须由本实验室人员陪同,在严格遵守有关规定且不影响实验室人员的条件下方可进入。.在实验室短期停留的学习、施工、维修等人员,应做登记备案。进入实验室内严禁吸烟、饮食、化妆、大声喧哗等。.实验室负责人有监督并及时纠正违规行为,发现不安全隐患及时上报的职责。.实验室人员与外来人员应严格遵守实验室管理制度,规范操作行为。.实验室学生毕业及员工离职后应及时取消指纹锁。.3人员日常管理办法1、未经允许任何人不得私自复制、转借实验室的钥匙。钥匙若遗失必须在最短时间内报告老师。公共钥匙在使用完后须立即归还至原处,平台留有各实验室备用钥匙,设专人管理。此钥匙专供实验室的检查、参观、维修以及紧急情况使用。医学院实验室安全管理制度2、未经允许任何人不得私自携带外来人员进入实验室逗留,不得允许任何非实验室人员在实验室内进行取物、照相、拷贝数据等。3、每天第一个开启和最后一个关闭实验室大门者有义务观察工作室内的水、电、设备等有无异常,如有异常必须立即报告。4、无论何种情况,当实验室只剩下一人,该人离开实验室时应将大门锁上(包括中途上厕所)。5、任何人不得擅自对实验室的水、电、气、管道和建筑结构进行拆卸、改装或私接。6、任何人未经合格的培训不得独立使用或操作实验室内的任何仪器和设备。对于价格昂贵或有安全隐患的仪器设备,使用人必须经过三次以上学习操作并无误后方可独立使用。7、任何人在对各项仪器、设备或物品的具体情况不了解时不得擅自进行操作(包括小型设备)。不得对不明生化试剂和药品进行使用、转移、丢弃等处理。8、各设备和区间的使用者在实验过程中有义务负责该设备和区间的安全情况,遇到异常情况应及时妥善处理或报告。设备和区间使用完毕后应及时切断水电等,妥善清理,消除安全隐患,做到有始有终。(例如分子生物学实验完毕后清理危险试剂等)。9、各设备和区间的负责人必须定期对设备和区间的运行情况进行检查,确保实验室整体安全运行。若发现使用者操作不当或有违规行为,应立即责令改正,如问题依然存在则应立即报告老师解决。各设备和区间的负责人具有监督管理的权利和义务。10、任何人在进行实验时必须有意识地进行自我保护,防止人身伤害。实验人员应着工作服、手套、面罩等保护进行实验;化学实验必须在通风橱内进行,进行强酸强碱、有毒和腐蚀性等试剂的实验前必须了解其化学特性和安全知识,并做好保护措施。11、任何人在进行具有潜在危险(高温、高压、有毒、腐蚀等)的实验时应在实验台周围设置醒目标志,提醒他人注意安全。12、注意实验中是否有可能释放出有毒有害气体或物质,防止伤害他人和污染设备。对升降温程序的检查至少在两遍以上,防止误操作。医学院实验室安全管理制度13、高压气体瓶应平稳摆放并机械固定,进行气体实验时(如气氛退火)必须防止升降温过程中可能出现的高压、爆炸、倒吸等不良后果,且应在气压完全稳定后方能离开现场。14、在进行复杂性较高或具有潜在危险性实验时应至少有两人同时在场,便于相互协调,以防意外出现后手忙脚乱。15、禁止在办公区(如办公桌上)进行生化反应等对人体健康有潜在危险的实验。16、所有师生应同时重视“硬件安全”和“软件安全”。所有的测试前后应及时保存数据,任何人不得在他人测试时随意关闭测试程序。17、所有师生应该重视电脑安全,防止数据丢失。重要数据应该进行多处备份,除了在个人的办公电脑内进行备份外,还必须在外介质(如公用盘、外用优盘、移动硬盘、私人电脑等)内进行备份。备份频率至少每月一次。18、在进行论文写作、数据分析时应该及时保存。毕业论文写作时应保存不同的版本,防止灾难性损失。医学院实验室安全管理制度第三章基础安全3.1实验室水电安全1、用电安全的基本要素有:电气绝缘良好、保证安全距离、线路与插座容量与设备功率相适宜、不使用三无产品。2、实验室内电气设备及线路设施必须严格按照安全用电规程和设备的要求实施,不许乱接、乱拉电线,墙上电源未经允许,不得拆装、改线。3、在实验室同时使用多种电气设备时,其总用电量和分线用电量均应小于设计容量。连接在接线板上的用电总负荷不能超过接线板的最大容量。4、实验室内应使用空气开关并配备必要的漏电保护器;电气设备和大型仪器须接地良好,对电线老化等隐患要定期检查并及时排除。5、不得使用闸刀开关、木质配电板和花线。6、接线板不能直接放在地面,不能多个接线板串联。7、电源插座需固定;不使用损坏的电源插座;空调应有专门的插座。8、实验前先检查用电设备,再接通电源;实验结束后,先关仪器设备,再关闭电源。9、工作人员离开实验室或遇突然断电,应关闭电源,尤其要关闭加热电器的电源开关。10、不得将供电线任意放在通道上,以免因绝缘破损造成短路。11、在电气类开放性实验或科研实验室,必须二人以上方可开展实验。12、电气设备在未验明无电时,一律认为有电,不能盲目触及。13、切勿带电插、拔、接电气线路。14、在进行电子线路板焊接后的剪脚工序时,剪脚面应背离身体特别是脸部,防止被剪下引脚弹伤。15、高压电容器,实验结束后或闲置时,应串接合适电阻进行放电。16、在需要带电操作的低电压电路实验时,单手操作比双手操作安全。17、使用电容器时,千万注意电容的极性和耐压,当电容电压高于电容耐压时,会引起电容爆裂而伤害到人。医学院实验室安全管理制度18、节约用水,用完后随手关掉阀门。19、用水时用器皿盛水,不得将水淋在化学药品上。20、管理人员要经常检查上下水是否完好。21、实验产生的有毒有害废水要专门储存统一处理,或经过无害化处理后排放。实验室值日值班制度实验室是重要工作和学习场所,为创造更好的环境,维护正常秩序,特制定本公约。1、实验室卫生:每位同学应自觉维护、保持办公环境的卫生清洁,实验用品与仪器的摆放整齐,用后放回原处,做到人离桌净,环境恢复原状,垃圾篓及时清理,做到不隔夜;2、公共区域的卫生包括实验台,实验仪器、走廊、门厅等,做到地面干净无杂物;3、各位同学轮流值日,每人/两人负责一周,按值日表的顺序循环,形成制度。4、值日人员负责所属区域内当天的保洁工作;5、不允许在实验室内留住客人,不准将无关人员带进实验室。6、保证实验室工作的顺利进行。对可疑人员要严密注意,保证公物安全和自身安全。7、对突发事件要保持镇静,在自身安全的情况下,要及时合理的积极处理,并及时向领导汇报。8、安全要求做好防火防盗工作,人离开后负责关好门、窗并切断电器。实验室消防管理1、认真落实防火安全责任制,做到任务明确,责任到人。2、在实验室工作的人员必须遵守学校和实验室的各项规章制度和仪器设备的操作规程,做好安全防护。各实验室制定符合本实验室安全操作规程的规章制度悬挂在墙上。医学院实验室安全管理制度3、所有新进入实验室的工作人员、学生必须在导师的指导下进行培训。4、做好实验室安全防火工作,实验室工作人员和学生必须做到“三知”(知:防火知识、灭火知识、灭火器材存放位置)和“四会”(会:报警、使用灭火器材、扑灭初起火灾、疏散自救);实验室内不得使用明火进行加热,应按实验要求,确定加热方法。5、严禁在实验室吸烟。6、严禁乱拉、乱接电线、私烧电炉等违章用电行为。7、每天最后离开实验室的人员必须关电、关水、关气、关好门窗,养成人走断电的好习惯,如因工作需要长期不能断电的实验室需报系负责安全具体工作的办事人员备案。8、贵重物品、危险易燃、剧毒剧腐物品应由专人管理,严格控制使用范围,按规定存放和管理。9、经常检查实验室的开关、插座等,发现接触不良、发热等不正常情况,应及时采取措施、修理或更换。遵守安全用电规程,保持电气设备周边环境清洁、干燥,电闸箱下不得摆放任何东西,要经常检查电线、插头座,防止电路过载、短路或燃烧,一旦发现损坏要及时更换。10、关机离人时必须切断电源、关好门窗等,杜绝各类事故的发生。11、对一切违反安全制度、不遵守实验室管理规定的行为进行劝阻;对不听劝告、或工作不负责任造成重大事故者应分清情况追究责任,严肃处理。12、实验进行中,实验人员不得离开;一般情况下,不允许在实验室过夜。13、从事实验前,应充分了解生化药品的物理特性、化学特性、危害性以及出现化学损伤后所要采取的应急措施,生化药品的存放必须分类(有机物、无机物),标签清晰。14、易燃易爆气体的气瓶安放要考虑周边环境安全。气瓶竖直放置时,应采取防止倾倒措施,使用前应检查阀体的安全状态,严防气体外泄,使用中保持室内空气流通,使用完毕及时关闭总阀门。15、合理配备并经常检查消防灭火器材。10医学院实验室安全管理制度第四章实验室安全管理制度实验室设备仪器管理.新进设备要及时建卡入账。仪器设备购入后,使用部门或人员必须及时开箱清点验收和安装调试后交与保管人,并填写卡片、登记入帐。如不合格时,需立即与供方联系退、换、补、赔事宜。进口设备要在索赔期内完成验收工作的各项事宜,对质量不合格的仪器设备,及时提出索赔报告,完成索赔工作,以免受到不应有的损失。.实验室对大型仪器设备实行三定:定人保管、定点存放、定期校验。一保:保清洁。三防:防尘、防潮、防震。精密仪器要做到操作有规程,使用有记录,保养有措施,检修有制度,事故有报告。单价在十万元以上的仪器设备要按照《实验室大型精密仪器设备管理》有关规定做好科学、规范管理工作。.加强仪器设备的维修和保养工作,一般仪器设备做到随时保养和维修。精密贵重仪器应做到精心维护、定期检修和检测,防止障碍性事故的发生。仪器设备一般不得拆改,如确需拆改时,需按各级管理权限履行审批手续。.各实验室仪器设备保管人有责任配合设备处每学年全面核对工作,对本部门的仪器设备进行清点,设备处做到账物相符,账账相符。固定资产做到账、物、卡以及数据库完全相符。.在仪器设备发生故障或需要检修时,应填写仪器设备维修单,报设备处审批并及时组织维修、调试、标定。仪器设备如有损坏、丢失要写出报告,说明原因、过程,分清责任,并由主任签属意见,及时上报。因违章造成的损失,要按有关规定进行赔偿。.仪器设备报损、报废按照学校《仪器设备报损、报废办法》执行。仪器设备损坏、丢失按照学校《仪器设备损坏丢失赔偿办法》执行。.电子仪器和需通电设备必须必须定时通电开机,保持机器性能。部分仪器设备必须经常保养,定时开机。.仪器设备不得私自外借,仪器设备必须借出时须经实验室主任批准,并进行登记。送还后要逐项验收,若有损坏,由经办人负责修理,或按有关规章制11医学院实验室安全管理制度度赔偿。.实验室的所有仪器设备由分室管理人员负责具体管理,仪器设备的说明书由实验室分室管理人员负责管理并存放在资料室,并建立借出和归还登记记录本,借出要登记并按时归还。.使用仪器应取得实验室负责人同意,未经允许不得擅自操作。未经实验室负责人同意,本室工作的各类人员不得随便带外来人员到实验室,更不得用本室仪器设备和药品为室外人员做实验,如若发现,实验室主任有权处罚当事者。.仪器负责人有责任对使用仪器的人员进行培训,使用者应先仔细阅读仪器操作规程和说明书,详细了解仪器性能,经培训合格后方可上机操作。.使用者应严格按照仪器操作规程进行操作,仪器运行过程中应经常检查仪器运行情况,仪器运行期间不得离人,发现问题及时处理,遇到无法解决的问题时应立即向实验室负责人汇报。.严格遵守各种仪器的操作规程和登记制度,凡对拟使用的仪器的操作无把握者,务必请教仪器管理员或其他人员。发现仪器故障者,有义务立即向管理员或实验室主任报告,以便及时维修。凡属违反操作规程使用而损坏仪器者,或者发现问题未及时汇报,一旦发现,视其损失轻重进行赔偿。.未经同意,任何人不得擅自拆装仪器。仪器及仪器操作台面上不得放置与实验无关或个人物品。.使用者必须认真填写仪器使用记录,如有故障应详细记录现象并向实验室负责人汇报。药品试剂管理常规试剂由实验平台统一成批购置,以降低实验成本,保证实验材料的一致性。1药品试剂的领用及使用,必须严格按照相关安全操作规程进行。2领取药品时,必须确认容器上标示中文名称是否为需要的实验用药品。3领取药品时,必须看清楚药品危害标示和图样,是否为危化品。4药品试剂必须分类登记保管,属危化爆炸品的必须双人双锁管理,开启时必须有两人同时在场,使用后及时放回。12医学院实验室安全管理制度5购入的化学试剂应逐件检查产品的名称、标签、出厂日期、品级商标、厂名、合格证等,“三无”产品及超过保质期的产品不得验收入库。6化验员应时常检查试剂的保质期,超过保质期或保质期内异常变质的试剂不可使用。7避免独自一人在实验室做危险性实验,若须进行无人监督之实验,其实验装置对于防火、防爆、防水灾都须有相当的考虑,且让实验室灯开着,并在门上留下紧急处理时联络人电话及可能造成之灾害。8废弃药液或过期药液或废弃物必须依照分类标示清楚,药品使用后之废(液)弃物严禁倒入水槽或水沟,应例入专用收集容器中回收。9未经本部门领导批准,严禁私自对外发放各种药品试剂等。10废液、废气、固体废弃物必须严格按照相关规定处置。实验室化学药品的安全管理制度1、凡国家规定的一、二类易制毒及危险化学药品的购买,必须按学校规定,经学院国有资产实验管理处按程序申报购买,不得通过其它途径购买。2、化学药品必须根据化学性质分类存放,易燃、易爆、剧毒、强腐蚀品不得混放。3、受阳光照射容易燃烧、爆炸或产生有毒气体的化学危险品应当在阴凉通风地点存放。4、遇水能分解或燃烧、爆炸的药品,如:锂、钾、钠、三氯化磷、五氯化磷、发烟硫酸、硫磺等不准与水接触,不准放置于潮湿的地方储存。5、化学性质或防护、灭火方法相互抵消的化学危险品,不得在同一储存室内存放。6、存放药品要专人管理、领用,存放要建帐,所有药品必须有明显的标志。对字迹不清的标签要及时更换,对过期失效和没有标签的药品不准使用,并要进行妥善处理。7、实验室中摆放的药品如长期不用,应放到药品储藏室,统一管理。8、剧毒、放射性物体及其它危险物品,要单独存放,由专人负责管理。存放剧毒物品的药品柜应坚固、保险,要健全严格的领取使用登记。13医学院实验室安全管理制度9、要经常检查危险物品,防止因变质、分解造成自燃、自爆事故。对剧毒物品的容器、变质料、废渣及废水等应予妥善处理,固形废物至于废物桶、废液需倒入废液箱,禁止随意乱扔杂物或将废液倒入水槽中。10、危险物品的采购和提运按学校国有资产与实验管理处的有关规定办理。11、使用人员在使用化学药品过程中要严格执行操作规程,注意安全,防止意外事故的发生。12、储存的易燃易爆物品应避光、防火和防电等,实验室存放的易燃易爆物品,要制定合理的储存量,不许过量且包装容器应密封性好。13、所有化学药品、试剂等未经许可不得擅自带出实验室。14、每月对化学药品、试剂进行使用盘点,确保所有化学药品、试剂均登记在案、且得到妥善使用与保存。15、存放化学危险品的室内严禁吸烟和使用明火。16、使用化学危险品的单位,应根据化学危险品的种类、性能,设置相应的通风、防火、防潮、防毒、隔离操作等安全设施。17、使用化学危险品的单位和个人,必须严格遵守各项操作规程,注意技术安全。18、使用化学危险品时,必须有相应的安全防护措施和用具。19、盛装化学危险品的容器,在使用前后,必须进行检查、消除隐患,防止火灾、爆炸、中毒等事故。20、学院师生员工在相应工作和日常生活中,不能随意掩埋、丢弃有毒、有害废物,不能随意倾倒有毒、有害废液。在销毁、处理废弃化学危险品前,报国资处,由国资处按国家有关规定,统一征得所在地公安局或环境保护等部门同意。在专业人员的指导下,采取必要的安全措施,进行集中、安全地报废、销毁、回收。21、各单位在化学危险品入库前,必须核对包装(或寄回)上的安全标签,安全检签若脱落或损坏,经检查确认后应补贴,对于危险化学品,在转移或分装后的容器上,应贴安全标签,盛装危险化学品的容器在未净化处理之前,不得更换原安全标签。14医学院实验室安全管理制度22、各化学实验室,应设有急救设施(相应的灭火装置等)并有应急处理的方法。实验室气体钢瓶安全管理制度1、搬运气瓶时,应采取充分措施防止气瓶从车上掉下。运输时不可散置,以免在车辆行进中,发生碰撞。2、气瓶搬运时,应罩好气钢瓶帽,保护阀门。3、避免使用染有油脂的人手、手套、破布接触搬运气瓶。4、搬运前,应将连接气瓶的一切附件如压力调节器、橡皮管等卸去。5、气体钢瓶存放或使用时要固定好,防止滚动或跌倒。为确保安全,最好在钢瓶外面装置橡胶防震圈。液化气体钢瓶使用时一定要直立放置,禁止倒置使用。6、使用钢瓶时。应缓缓打开钢瓶上端之阀门,不能猛开阀门,也不能将钢瓶内的气体全部用完,要留下一些气体,以防止外界空气进入钢瓶。7、开启高压气瓶时,操作者须站在气瓶出气口的侧面。气瓶应直立。然后缓缓旋开瓶阀。气体必须经减压阀减压,不得直接放气。8、高压气瓶上选用的减压阀要专用,安装时螺扣要上紧。9、开关高压气瓶瓶阀时,应用手或专门扳手。不得随便使用凿子、钳子等工具硬扳,以防损坏瓶阀。10、氧气瓶及其专用工具严禁与油类接触,氧气瓶附近也不得有油类存在,操作者必须将手洗干净,绝对不能穿用沾有油脂或油污的工作服、手套及油手操作。以防万一氧气冲出后发生燃烧甚至爆炸。11、氧气瓶、可燃性气瓶(主要是乙炔和氢气)与明火距离应不小于10m;有困难时,应有可靠的隔热防护措施,但不得小于5m。12、高压气瓶应避免曝晒及强烈振动,远离火源。贮气瓶严防曝晒、严禁靠近明火或温度较高的地方。因为气瓶内的压力是随温度增加而上升的,一旦造成瓶内的压力反常上升。就会发生危险。13、气瓶内气体不得全部用尽,剩余残压。即余压一般应为0.05MPa左右。15医学院实验室安全管理制度14、气瓶在使用过程中,如发现有严重腐蚀或其他严重损伤应提前进行检验。盛装剧毒或高毒介质的气瓶,在定期技术检验同时,还应进行气密性试验。15、氮气瓶排放余气时要打开门窗,注意空气流通,防止发生窒息事故。余气排放要缓慢进行。16、氩气瓶注意事项与氮气瓶相同。但是,因为它的密度比空气大,易在低处浓缩,所以排放时要注意把门打开。17、乙炔瓶严禁放倒!严禁与氧化性气体放一起。18、气瓶要直立使用、严禁倒立或卧倒使用。因为气瓶上面装的调压器是对液化石油气的气体起作用的,如果气瓶倒立或卧倒放。就会流出液体。液体变为气体呈250-300倍扩散与空气混合后,就会造成大面积的燃烧,甚至发生爆炸,所以是非常危险的。19、在实验室中,不要将气瓶倒放、卧倒,以防止开阀门时喷出压缩液体。要牢固地直立,固定于墙边,最好用固定架固定。20、气瓶必须连接压力调节器,经降压后,再流出使用,不要直接连接气瓶阀门使用气体。各种气体的调节器及配管不要混乱使用,使用氧气时要尤其注意此问题,否则可能发生爆炸。最好配件和气瓶均漆上同一颜色的标志。21、安装调节器、配管等,要用绝对合适的。如不合适,绝不能用力强求吻合,接合口不要放润滑油,不要焊接。安装后,试接口,不漏气方可使用。22、保持阀门清洁,防止砂砾、秽物或污水等侵入阀门套管,引起漏气。清理时,慢慢开阀门,排出少量气冲走污物,操作人员应稍远离气瓶阀门。23、开阀门时,应慢慢进行;关闭阀门时,以能将气体截止流出就可以,适可而止,不要过度用力。24、易燃气体之气瓶,经压力调节器后,应装单向阀门,防止回火。25、气瓶不要和电器电线接触,以免发生电弧,使瓶内气体受热发生危险。如使用乙炔气焊接或割切金属,要使气瓶远离火源及熔渣。26、气瓶附近,必须有合适的灭火器,且通风良好。16医学院实验室安全管理制度实验室危险废弃物管理制度1、学院各实验室应根据实验所产生危险废弃物类别、特性准备符合相关技术规范要求的收集容器或装置,对本实验室所产生的危险废弃物进行分类收集,避免不相容性的废弃物混装、固液混装,严禁将危险废弃物与生活垃圾混装,严禁直接倒入城市污水管网或随意丢弃。2、盛装液体危险废弃物的容器内须保留足够的空间,确保容器口与液体表面之间不小于10厘米的距离。3、各实验室应在实验室危险废弃物收集容器或装置上张贴危险废弃物标签,明显标示其中废弃物的名称、主要成分与性质。4、产生放射性废弃物和感染性废弃物的实验室应根据要求将废弃物收集密封,并予以屏蔽和隔离。5、各实验室产生的过期化学试剂或空试剂瓶,应分别使用专用试剂包装箱进行包装暂存,并加以标注。6、在学校没有统一收集处置之前,各相关单位、各实验室务必保管好实验室废弃物,按以下要求存放:A、原则上要求各单位对实验室危险废弃物进行集中存放管理,保障临时存放设施的安全条件,保持通风,远离火源,避免高温、日晒、雨淋,避免不相容性危险废弃物近距离存放;对确不具备集中存放条件的单位,由各实验室负责将实验室危险废弃物临时存放于实验室内合适位置,不得存放于楼道内。B、在常温常压下易燃、易爆及产生有毒气体的危险废弃物,由各实验室负责进行必要的预处理,使之稳定后方能进行一般存放;对剧毒类、易燃、易爆及产生有毒气体而不能进行预处理的危险废弃物,必须按规定单独存放,且严格实行双人、双锁、双帐式管理。C、绝对禁止将相互能够发生化学反应甚至引起燃烧、爆炸的危险废弃物存放在同一容器内。7、各实验室对实验过程中产生的有毒有害废气,实验室应根据其特性、产生量以及环保要求制定并实施相应处理措施,确认其有害物质浓度达到或低于国家安全排放标准后才能直接排入大气。17医学院实验室安全管理制度8、学院实验室危险废弃物收集处理必须遵照相关的安全与环保规定,禁止任何课题组将实验室危险废弃物提供或者委托给不具备危险废弃物处理资质的单位从事收集、贮存、利用、处置等活动。9、学院各实验室定期按要求将本实验室所产生的实验室危险废弃物信息汇总后报送国有资产与实验管理处,由国有资产与实验管理处按国家及环保职能部门的相关规定及时安排处置。实验室安全操作规范1、进入实验室,必须穿戴工作服2、进行危害物质、挥发性有机溶剂、特定化学物质或其它化学物质等化学药品及生物样品操作,必须穿戴防护具3、进行实验中,严禁戴隐形眼镜(防止化学药剂溅入眼内而腐蚀灼伤眼镜)4、需将长发及松散衣服妥善固定,且实验室内不得穿拖鞋5、操作高温(低温)实验,必须戴防高温(低温)手套6、严禁在实验室内吃东西7、食物禁止储藏在实验室的冰箱或储藏柜内8、实验室内废弃物和耗材的处理严格按照符合规范的方式进行处理18医学院实验室安全管理制度第五章实验室环境污染事故防治应急预案总则制定本应急预案是为了在实验室发生突发性环境污染的意外事故时,能以最快的速度做出反应,发挥最大的人力、物力效能,统一指挥、协同作战,处置有序,尽快控制事态的发展,降低事故造成的危害,减少事故损失。工作原则(1)落实责任、分工明确。实验室人员在学校、学院的领导下,根据本预案的分工,各司其职、各尽其责,在责任范围内做好突发性意外事故的应急处置工作。(2)快速反应、高效运转。意外事故发生后,相关人员根据本预案的精神,立即行动起来,分工协作,并相互配合、相互支持,在最短的时间内形成有组织的、协同一致的突发事故应急处置力量,实施高效率的抢险与救援;(3)预防为主、消除隐患。在实验室日常运作过程中,应急机构根据本预案所拟定的应急监测、应急预警的要义实施日常督察,做到早发现、早预警、早控制,力争将意外事故隐患消灭在初始状态。应急组织体系应急处理机构(1)学院(系)级应急处理工作小组学院应建立由分管实验室的院领导、教务办、实验室主任及实验室管理人员组成的应急处理工作小组。主要职责有:①收集掌握学院范围内危险废弃物污染源的种类、数量及分布情况,了解危险废弃物污染危害情况,对于不符合规范要求的实验室提出整改要求。②组织本单位实验室范围内环境污染事件污染源的鉴别鉴定,判定污染危害19医学院实验室安全管理制度范围,提出防护建议,以及其它危险废弃物的善后处理与处置。③环境污染事件发生时,应立即向校级应急领导小组报告,同时积极开展力所能及的现场应急工作,以把污染控制在最低范围内。④积极、主动地配合市危险废物管理中心应急工作人员实施应急处置。日常管理实验室突发事故的应急处置日常管理,由实验室主任组织,加上实验室管理人员实行正常上班时间的值勤,在节假日由实验室主任安排管理员值班。平时非上班时间(下班以后),则由仍然在位的实验室管理人员负责实验室环境状况的监察,并由实验室主任根据一段时期内的实验状况,选定1—2名有实际工作经验的学生协助工作。事故突发时应急处理机构实验室一旦发生环境污染突发性意外事故后,立即启动应急预案,成立主要由校级应急领导小组成员及相关人员组成的应急处理指挥部,在市环保局应急办公室的指导下,负责现场指挥组织开展应急工作。应急状态应急状态的监测在实验室日常运作过程中,实验室管理人员、学生和其他现场人员均有义务对实验室的状况进行监测。监测包括日常监察和定期的安全检查。日常监察是指实验过程,注意监控实验室内有无异常的气味、响声;空气中有无不明烟雾、地面上有无不明液体、固体等。定期安全检查由仪器主管人员、实验室安全卫生负责人协同技术人员定期进行。包括实验室空气质量的检测;化学试剂存放和使用的安全性;危险废弃物的收集等。20医学院实验室安全管理制度应急报告在实验室内,发生下列情况之一时,现场人员必须立即向学院应急处理工作小组报告。(1)实验室内出现异味、异响;空间中有不明烟雾、地面上有不明液体、固体时。(2)发生危险化学品(有机溶剂、强氧化剂、强腐蚀性物质、剧毒物质等)容器破损、泄漏现象时。(3)实验室内人员因非自身健康状况而突然感觉不适时。发现环境污染现象后,当事人要沉着、冷静,报告时讲明事发地点、事故性质、灾害发生部位、灾情大小、目前现场状态等相关情况,为正确判断情况提供尽可能详尽的资料。应急响应和终止.4.1应急响应程序及原则实验室管理人员接到环境污染现象的报告后,立即向实验室主任报告,由院级应急处理工作小组组长根据核实的污染现场的分析情况,判断污染程度的不同,确认是否启动应急预案并上报校级应急领导小组。在迅速启动应急预案、进入救援程序的同时,还必须随时监视事态的发展。结合实际情况和救援工作需要,及时调整应急响应的级别。.4.2应急响应的实施应急预案一启动,相关工作人员应迅速赶赴事故现场,按照应急预案规定的职责分工,在应急救援指挥部的统一指挥下,立即开展应急处置工作。(1)有害或可燃气体泄漏事故①实验室内发生有害或可燃气体泄漏事故时,应及时组织现场人员迅速撤离至安全区域,同时建立警戒区,设置断路标志,禁止无关人员进入。②控制火源,在警戒区内严禁火种,严禁开关电闸,现场禁止使用非防爆21医学院实验室安全管理制度型的对讲机及移动电话等通讯工具;另外,要及时组织力量救出受困人员,以减少不必要的人员伤亡。③除必要的安全操作人员、抢险救灾人员外,实验教师及保卫处人员应组织紧急疏散,组织其他无关人员立即撤离至警戒区外。④抢险人员通过必要的、安全的手段进行现场检测,以准确判定现场空气质量安全状况,确保发生异常情况下抢险救灾人员的撤离行动得以及时实施。⑤进入事故现场抢险救灾人员必须佩戴防护面具和穿防护服、工作靴等防护用品。泄漏量小时,可视情况组织现场抢修,堵住泄漏点,尽可能切断泄漏源,避免事态的进一步扩大,同时等待外部救援。当泄漏量很大,经判断无法堵漏时,全体人员迅速撤离至安全地带,同时封锁控制现场,等待上级救援。(2)化学品泄漏事故实验室内发生化学品泄漏事故时,保卫处人员应及时组织现场人员迅速撤离,同时设置警戒区,对泄漏区域进行隔离,严格控制人员进入。控制火源,在事故发生区域内严禁火种,严禁开关电闸。③抢险小组通过必要的、安全的手段进行现场检测,以准确判定现场空气质量安全状况,保证在异常情况下抢险救灾人员的安全撤离。④进入事故现场抢险救灾人员需佩戴必要的防护用品,视化学品的性质、泄漏量大小及现场情况,分别采取相应的处理手段。发生小量液体化学品泄漏时,对有机溶剂可迅速用活性炭、高岭土粉、沙土或其它惰性材料吸收;对酸、碱等腐蚀性试剂,采用中和法(强酸可用碳酸钠、石灰、大理石粉等中和吸收,强碱可用醋酸、草酸中和);对固体化学品的破碎泄漏,清扫后用塑料袋妥善包装密封,交相关单位处置,并采取适当的方法对泄漏点进行洗消。对破碎体温计、血压计泄漏的水银收集方法:①收集人需佩带口罩、手套,用硬纸片做成小套,收集散落的水银珠;②将套内收集的水银珠放进有盖的小药瓶中,药瓶中须放有一定量的水;③将小药瓶送医院仪器维修部保管。⑤若发生火灾,应根据化学品的特性,使用对应的灭火器材,迅速扑灭明火,同时继续加强周围场所的冷却,直至温度降至常温。(3)受伤人员的现场救护①化学物溅入眼内、眼睛受污染时,应坚持自行就地处理的原则,紧急利22医学院实验室安全管理制度用本实验室洗眼器,用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗。冲洗时应将眼睑提起,注意将结膜囊内的化学物质全部冲洗掉,同时要边冲洗边转动眼球,冲洗时间不少于15分钟,严重时应立即送医院就医。②皮肤溅着致灼伤:应就地将溅落物立即尽量吸除,立即脱去被污染的衣服,利用实验室冲淋器,用大量流动清水冲洗,冲洗要及时,彻底,反复多次,头面部灼伤时,要注意眼、耳、鼻的清洗,用大量流动清水冲洗至少15分钟以上,严重时立即送医院就医。急性中毒时,应迅速将中毒者脱离事故现场,转移至空气清鲜处,注意保暖,解开领口,保持呼吸畅通,根据中毒者呼吸情况,及时给予吸氧(鼻管给氧、密闭口罩给氧或自助强制给氧),如呼吸停止,立即进行人工呼吸,并立即送医院就医。不慎食入时,应给足量饮用水进行催吐或用植物油洗胃,严重者送医院就医;④因食入、吸入、接触造成中毒时;A、立即将患者抬离中毒现场,清除毒物,阻止毒物的继续吸收,如皮肤污染时,立即用微温的肥皂水或2%碱水彻底清洗(不能用热水)。如误服中毒,应尽快催吐和洗胃。B、对症治疗:呼吸困难者,要给予吸氧,必要时进行人工呼吸,发生脑水肿时,应迅速让患者利尿脱水,同时服用保护脑细胞的药物以及苏醒药物,并给予输液;大量出汗、脱水严重者,要补充盐水。(4)病原微生物污染事故①刺伤、切割伤或擦伤受伤人员应当脱下防护服,清洗双手和受伤部位,使用适当的皮肤消毒剂,必要时进行医学处理。要记录受伤原因和相关的微生物,并应保留完整适当的医疗记录。②潜在感染性物质的食入脱下受害人的防护服并进行医学处理。要报告食入材料的鉴定和事故发生的细节,并保留完整适当的医疗记录。③容器破碎及感染性物质的溢出立即用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。然后在上面倒上消毒剂,并使其作用适当时间。然后将布、纸巾以及破碎物品清理23医学院实验室安全管理制度掉;玻璃碎片应用镊子清理。然后再用消毒剂擦拭污染区域。如果用簸箕清理破碎物,应当对它们进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。在所有这些操作过程中都应戴手套。如果实验表格或其他打印或手写材料被污染,应将这些信息复制,并将原件置于盛放污染性废弃物的容器内。④未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂,应关闭机器电源,让机器密闭(例如30min)使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂,应立即将盖子盖上,并密闭(例如30min)。并通知实验室负责人。随后的所有操作都应戴结实的手套(如厚橡胶手套),清理玻璃碎片时应当用镊子夹着的棉花来进行。所有破碎的离心管、玻璃碎片等都应放在无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内。离心机内腔用适当浓度的同种消毒剂擦拭,并再次擦拭,然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。(5)医疗废物刺伤、擦伤等损伤后的处理方法:a)可用肥皂水、清水、无菌水清洗污染的皮肤,用生理盐水冲洗粘膜。b)如有伤口,应当在伤口旁端轻轻挤压,尽可能挤出损伤处的血液,再用肥皂液和流动水进行冲洗;禁止进行伤口局部的重力挤压。c)受伤部位的伤口冲洗后,应当用消毒液,如:75%酒精,0.5%碘伏等浸泡或涂抹消毒并包扎伤口;被暴露的粘膜,应当反复用生理盐水冲洗。d)保留物品,以便辨认其传染性。e)根据具体情况尽快采取医疗措施,医学观察。.4.3应急响应的终止(1)事故现场得到控制,事故条件已经消除。(2)有毒有害物质释放已降至规定限值以内。(3)事故所造成的危害已经被彻底消除,而无继发可能。(4)事故现场的各种应急处置专业行动已无继续的必要。(5)采取并继续采取一切必要的防护措施以保护公众免受危害,并使事故可能引起的长期后果合理且尽量低的水平。24医学院实验室安全管理制度善后处理工作善后工作(1)在事故应急救援终止后,保卫处人员必须保护好事故现场,特别注意保护相关数据资料,并做好事故过程、损失及其他相关情况的整理记录工作。(2)事故现场调查完毕,即可对现场进行善后处理。清理地面杂物固体消解剂、吸收了泄漏物的沙土等应彻底清扫,用无渗漏容器装载,通知专门处置单位接收处理;对现场地面进行刷洗、清洗,恢复正常状态。(3)做好事故经过、人员伤亡、财产损失等有关情况资料的搜集整理,等候有关部门对事故的调查处理。(4)组织相关人员参加事故调查处理工作,认真总结经验教训。(5)对损坏设备、设施进行维修,尽快恢复正常科研工作。事故处理事故的调查和处理必须坚持原则、分清责任,按事故等级上报各有关部门,及时查找原因。事故处理结束后,各有关部门、人员应按照整改意见和要求,积极修复破坏,尽快恢复正常的秩序。应急保障应急救援物资的准备及供应(1)各类消防、消洗设备是用于事故初始状态控制的主要手段,应当做到随时可用,保证处于良好的待命工作状态。(2)消防设备、灭火器材要有专人负责管理,落实责任制,对故意破坏消防设施的一切行为,要进行严肃的批评教育、处罚,后果严重的要追究其责任。(3)平时实验室应常备通用的急救器材与药品,例如:应急照明灯、空气呼吸面罩、棉花、纱布、止血药物、生理盐水、解毒剂等。(4)防护用品:自给正压式呼吸面罩、消防及防毒防护服等。25医学院实验室安全管理制度(5)应急通讯工具,断路标志牌、尼龙绳等。相关技术资料的管理实验室总平面图、各实验室功能图、消防设施配置图和周边社区应急保障力量(医院、消防队等)位置图;可燃气体和危险化学品安全技术说明书、互救信息资料等,需指定专门人员负责管理,并在抢险救灾现场负责提供使用。组织事故应急救援演练意外事故的特点是发生突然、扩散迅速,往往会引起人们的慌乱,处理不当又容易引起二次灾害。因此,为降低突发事故的危害,对事故应急救援预案应按职责分工和救援程序对相关人员进行培训和组织演练。培训应急队伍、落实岗位责任、熟悉应急工作的指挥机制、决策、协调和处置程序,检验预案的可行性和改进应急预案,强化配合意识。让每一个成员都能熟悉应急救援预案,以提高应付突发性灾害的能力,做到一旦发生事故能沉着、冷静应付,遇事不慌、临阵不乱、正确判断、正确处理。增强自我保护意识、减少伤亡,有效地把突发事故消灭在初始状态之中。应急电话公布及知识宣传相关最新的应急电话公布应及时公布,组织实验室管理人员和学生进行相关法律法规和预防、环境保护等常识的学习。利用宣传栏等工具广泛开展宣传,增强人们的环境污染防治意识,提高应急基本知识和技能。26医学院实验室安全管理制度第六章实验室主要仪器安全操作规程及注意事项6.1蔡司AxioImagerA2正置全自动荧光显微镜安全操作规程及注意事项一:显微镜应用简介:明场:适合常规镜检、病理样品的观察。此观察方法优点是视野亮度高、均匀,应用范围广,操作简单。缺点是:透明标本对比度低,标本没有立体感。相差:利用被检物体的光程(折射率x厚度)差进行镜检,即利用干涉现象,将相位差变为人眼可以分辨的振幅差。鉴定活体细胞最实用、最经济的方法。荧光:物质中的电子能吸收短波光,发射出长波光。荧光显微镜利用荧光光源激发样品中的荧光物质,检测激发光的情况。二:明场成像使用方法:.取下防尘罩,打开显微镜电源开关。.分别打开透射光光源开关和汞灯开关,如果不需要用到荧光,则不开汞灯开关(汞灯上有调节光强的旋钮:1/8;1/4;1/2或1)。.调节物镜转换器,选择低倍镜物镜头;聚光器转入H位;确认TL按钮(透射光开关)被打开;反射光模块转盘转到BF明场位置。从目镜处观察样品,确认光路100%转到眼睛,调节光强控制器,并调焦距。.打开电脑及Axiovision软件。.光路切换至相机;软件中打开Live按钮,先曝光Exposure—对照Live结果精细聚焦一调节曝光时间一如果彩色模式拍照需要做自动或互动式白平衡(Whitebalance,Interactive) 再次曝光后 Snap成像 保存Save。.拍照完毕,先关软件,再关显微镜,电脑。三:相差观察成像操作流程1&2&3.同明场成像。.聚光镜根据物镜后面的Ph标注调到Ph1/Ph2位。.反射光模块转盘调到BF位。.低倍(如10X倍)下观察样品,移动载物台至目标位置,并通过粗细调焦旋27医学院实验室安全管理制度钮聚焦,进而转到高倍。7&8.同明场成像第4,5和第6步。四:DIC成像操作流程.开总电源,显微镜开关C'ON/OFF)及电脑。.先按明场方法找到要观察对象。.选择适当的DIC物镜(我们的物镜均是DIC物镜),将匹配的DIC滑块推入物镜转换器上的插槽,并确保其插到位。.反射光模块转盘转入检偏器模块。.聚光镜上转入与物镜相匹配的DIC模块。.按柯勒照明调节视场光栏和孔径光栏。.同明场成像第4,5和第6步。注意:DIC只适用于样品的载体是玻璃的情况!!五:荧光观察成像操作流程(设置荧光之前确认已将入补偿器移出光路-用于DIC加彩色效果时).开总电源,显微镜开关(“'ON/OFF”),荧光汞灯光源(需预热15分钟)及电脑。(打开汞灯电源前要确保RL光路关闭).先按明场或相差观察方法找到要观察对象。.反射光模块转盘根据标记探针的颜色选择需要的荧光滤片组荧光反射镜模块。.关闭卤素灯光闸”TL“,打开荧光灯光闸、'RL〃。5&6.同明场成像第4,5和第6步。六:注意事项:.该仪器采用预约制度,没有预约不允许上机。.荧光光源汞灯需要提前15分钟预热,且关闭后30分钟内不能再次打开。因此实验完成后请确认后续有无他人预约,如30分钟内有预约记录,请保持汞灯电源开启;如30分钟内无预约记录,请关闭电源。.使用完仪器后请登记使用记录。28医学院实验室安全管理制度6.2LeicaCM1860冰冻切片机安全操作规程及注意事项一、开机1.主机右侧的电源开关,用箱体温度设置按钮将切片机温度设置到切片所需温度,当设置温度时温度显示窗口显示设置温度,设置停止5秒后显示实际温度。按下箱体温度设置按钮,即可随时检查设置温度。样品头温度设置按同样方法进行。若样品头设为最低温度(-50度),则按样品头最低温度设置按钮即可。二、切片.利用切片机的厚度调节按钮调节切片厚度,调整切片角度,安装切片刀。如是一次性刀片,请利用刀架的左右移动来使用不同的刀口,勿移动刀片.将样品放到样品托上,利用包埋剂固定,放到冷台上冷冻,在即将完全冷透前用热交换装置压平。.将冷却透的样品放到样品头上,设置样品头温度,用样品快进按钮将样品移近刀口,调整要切的平面,利用慢进按钮开始修片,修好后即可放下防卷板切片,如有需要可调节防卷板的上下位置,使切出的样品平整的进入防卷板与刀片的狭缝,取出后染色观察。二、注意事项.切片后为防止别人改变参数,可利用控制面板上的键盘锁定按钮将键盘锁定,即按下键盘锁定按钮5秒钟左右,时间窗口中间的两个点停止闪烁,表示键盘锁定,此时再按键盘锁定按钮5秒钟即可解除键盘锁定。.当停机时,应将玻璃窗打开,再次开机前应先检查切片机内是否有水,如有应吹干后再开机,并取出隔板检查切片机箱体底部是否有水,如有需拔开底部的塞子,将水排除,吹干后再开机。.如常年开机,夜晚可将切片机温度设到零下十度以下,不能高于零下十度。由于切片机冷却到工作温度大约需两个小时,如关机后第二天有样品,应提前一天开机制冷,以免影响第二天的工作。.若要关闭压缩机,按一下锁定开关,再按一下样品头温度设置按钮,则样品头压缩机关闭,若按箱体温度设置按钮则箱体压缩机关闭,重复以上步骤,压缩机又打开。29医学院实验室安全管理制度.3LeicaRM2235石蜡切片机安全操作规程及注意事项一.使用方法.旋转手轮,直到样品夹到达最高位置.•锁定手轮(锁杆到达槽口)并启用制动器。将样品装到样品夹上。.将切片刀装在刀架上,刀口向上。旋松刀架底座锁杆,移动刀架使刀口贴近石蜡块。旋紧刀架,样本夹定位装置进行定位,固定好机头。.样品切片(修块)•转动粗修轮向后移动样品,将刀架底座上的刀架推至样品前,松开手轮锁使用粗修杆并选择所需的修块厚度,旋转手轮开始修块过程•获得所需的样品切面后停止修块过程,松开粗修杆。.调整切片刀的角度,使切片刀固定器上的线对齐底座正中间的线,最终使切片刀与石蜡块约成5度角。.根据需要调整厚度计,以5至12微米厚度为宜。.一切调整好以后,就可以开始切片,此时右手握旋转轮之柄,拇指打开轮上的保险钮,顺时针摇动一圈就可以切下一片,连续摇动就可以切下连续的蜡带,摇动速度以每分钟40至50转为宜。此时左手持毛笔托起蜡带,当蜡带长达20厘米左右时,停止摇动,关上保险钮。.用毛笔挑起蜡带按顺序排放于盘中的纸上,使蜡带光面向上,皱面向下。.切片完毕后,清理仪器和工具。切片刀上的石蜡,可沾取少量二甲苯擦去,再用绒布擦干,放入盒内保存。一.注意事项.刀口十分锋利,千万要注意安全。当不切片时,一定要关上旋转轮上的保险钮。A 务必先夹紧样品块,像后夹紧刀./!\在对刀或样品进行任何操作之前或者更换样品块之前以及所有工一~X工作休息期间,请锁定手轮,并用护刀器盖住刀刃!A 始终都要沿顺时针方向均匀地旋转手轮;否则.制动器无法正/>\常工作口调节手轮转速,以适合样品硬度口k~对于较硬的样品,使用较慢的速度。30医学院实验室安全管理制度A|在对刀或样品头进行任何操作,更丽品之前或在工作休息期
/!\间,请锁定手轮,并用护刀器盖住刀刃! .装刀前检查刀口是否锋利,如果刀口上有缺口或太钝,最好先进行换刀或左右移动位置。.在调节厚度时必须对准刻度,绝不能调在两个刻度之间,否则不仅会造成切片厚度不均,甚至会损坏机器。.切片前,应检查各零件和螺丝是否旋紧,否则会产生震动。.摇动旋转轮时,用力要求均匀一致,使旋转速度均匀一致,否则蜡带会不连续。.切片完毕后,及时进行清理,保持切片机和切片刀干净整洁。31医学院实验室安全管理制度6.4Aappliedbiosystems7500荧光定量PCR仪安全操作规程及注意事项一.绝对定量实验简易操作流程.双击桌面快捷图标,或从Start>AllPrograms>AppliedBiosystems>7500Software>7500V2.0开启软件。进入主界面后选择AdvancedSetup。.默认进入Setup下的ExperimentProperties界面输入实验名称(ExperimentName)确认仪器型号,选择“7500(96wells)”选项在实验类型中,选择“Quantitation-StandardCurve”选择试剂种类,选择“TaqMan@Reagents”确认运行模式,选择“Standard(~2hourscompletearun)”.进入Setup下的PlateSetup界面,编辑基因(Target)及样本(Sample):在“DefinetargetsandSample”界面中设置基因及样品。利用“AddNewTargets”添加新的基因,并在TargetName中编辑基因名称,Reporter和Quencher中选择所标记的荧光基团及淬灭基团。对于Quencher的选择,如果是MGB探针,请选择NFQ-MGB;如果是TAMRA探针,请选择TAMRA;如果是其他形式的非荧光淬灭基团(如BHQ),请选择None。还可以利用其他按钮将之前已添加的基因进行保存(SaveTarget)或删除(DeleteTarget)。利用“AddNewSample”添加新的样本,并编辑样品名称。在“AssignTargetsandSamples”界面中进行样品板的排布。利用鼠标单选或拖曳以选择反应孔,然后勾选左侧的基因及样本,同时在Task选项中指定该反应孔的类型(S代表标准曲线数据点,U代表未知样本,N代表阴性对照)。设置标准曲线:利用鼠标单选或拖曳以选择反应孔(一般情况下,每个梯度设置三个副孔),而后勾选左侧的基因,在Task选项中选择S,然后在Quantity中输入拷贝数。按照相同操作,完成标准曲线其他数据点的设置(建议设置5个梯度)。.在Setup下的RunMethod界面中,设定反应条件。.点击“Save”,文件储存成ExperimentDocumentSingleFiles(*.eds)格32医学院实验室安全管理制度式,然后按下飞士2比配^按钮,反应即开始进行。.实验结束后,点击右上角的Analyze按钮,软件将显示实验结果:在扩增图中,可通过更改PlotSettings来改变扩增图的显示方式。如果想查看阈值线或基线,请将Threshold及Baseline打勾。查看标准曲线时,可通过更改PlotSettings来改变标准曲线的显示方式。Eff%代表扩增效率。R2值代表标准曲线的数据点与回归曲线的接近程度,建议在0.99以上。检查QCSummary结果,可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。黄色三角中的数字1代表有一种异常情况,2代表有两种异常情况,以此类推。详细信息及解决方案可以在FlagDetails中查看。.分析之后的结果,可以利用菜单中的File>Export功能,导出Excel格式的结果。若想存储图片结果,可直接在图片上单击鼠标右键,选择SaveAs,存成JPEG格式的图片。二.相对定量实验简易操作流程.双击桌面快捷图标,或从Start>AllPrograms>AppliedBiosystems>7500Software>7500V2.0开启软件。进入主界面后选择AdvancedSetup。.默认进入Setup下的ExperimentProperties界面输入实验名称(ExperimentName)确认仪器型号,选择“7500(96wells)”选项在实验类型中,选择“Quantitation-ComparativeCT(AACT)”选择试剂种类,选择“SYBR(R)GreenReagents”确认运行模式,选择“Standard(~2hourscompletearun)”.进入Setup下的PlateSetup界面,编辑基因(Target)及样本(Sample):在“DefinetargetsandSample”界面中设置基因及样品。利用“AddNewTargets”添加新的基因,并在TargetName中编辑基因名称,Reporter和Quencher中选择所标记的荧光基团及淬灭基团。还可以利用其他按钮将之前已添加的基因进行保存(SaveTarget)或删除(DeleteTarget)。利用“AddNewSample”添加新的样本,并编辑样品名称。在“AssignTargetsandSamples”界面中进行样品板的排布。利用鼠33医学院实验室安全管理制度标单选或拖曳以选择反应孔,然后勾选左侧的基因及样本,同时在Task选项中指定该反应孔的类型(S代表标准曲线数据点,U代表未知样本,N代表阴性对照)。.在Setup下的RunMethod界面中,设定反应条件。.点击“Save”,文件储存成ExperimentDocumentSingleFiles(*.eds)格式,然后按下飞士2比Run”按钮,反应即开始进行。.实验结束后,点击右上角的Analyze按钮,软件将显示实验结果:在扩增图中,可通过更改PlotSettings来改变扩增图的显示方式。如果想查看阈值线或基线,请将Threshold及Baseline打勾。对于SYBRGreen法实验,可以在MeltCurve界面中查看熔解曲线。检查QCSummary结果,可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。黄色三角中的数字1代表有一种异常情况,2代表有两种异常情况,以此类推。详细信息及解决方案可以在FlagDetails中查看。.分析之后的结果,可以利用菜单中的File>Export功能,导出Excel格式的结果。若想存储图片结果,可直接在图片上单击鼠标右键,选择SaveAs,存成JPEG格式的图片。二.注意事项:.该仪器采用预约制度,没有预约不允许上机。.开机顺序:电脑〉机器电源〉软件;关机顺序:软件〉机器电源〉电脑。.此机器不需要提前预热,请准备好样品后再开机器。.实验完成后请确认后续有无他人预约,如2小时内有预约记录,请保持机器开启;如2小时内无预约记录,请关机。并登记使用记录。34医学院实验室安全管理制度6.5BDAccuriC6安全操作规程及注意事项一•开机.开机前检查所有瓶中液面高度。打开电脑和软件CFlow,放置一管ddH2O(>2ml)在上样处(样品支架可放置各品牌12X75mm的管子和离心管,注意不要使上样针弯曲);.开启机器,仪器自动执行"Startup",时间约5min;(期间不要打开盖子)3.“Startup”完成后,仪器状态显示“CytometerConnectedandready”;.上样前运行ddH2O15min;并点击Unclog和Backflush排出气泡。.质量控制(QualityControl).采集样品.放置样品于上样处;(上样前确认样品细胞是否已过滤,混匀样本).设置采样条件,包括采样数目或时间或体积,上样速度和阈值;.选择样品位置,命名样品名称,点击“run”,开始采样。四.画图.点击“Histogram”或“DotPlot”或“DensityPlot”,该图形将显示获取的样品;.点击坐标轴参数,从下拉菜单选择需要的参数(如“FSC-A”,“FL1-A”);.点击“PlotSpec",选择“linear”或“log,设置坐标轴显示范围;.右击坐标轴参数,选择“RenameParameters",输入需要新的坐标轴名称;.选择Display下EventsDisplaySettings,选择需要显示的细胞数。五.设门.点击任一设门工具,圈定特定的区域,设置为门;.点击图形上的“Gate”,选择该图形需要应用的门;.在“Gate”对话框内,选择多重门的逻辑关系,“Include”或“Exclude”或“Intersect”,然后点击“Apply”。.选择需要显示的细胞数。六.设置补偿35医学院实验室安全管理制度.点击“SetColorCompensation”;.选择需要补偿的荧光参数,输入补偿值;.应用该补偿至当前样品管或所有的样品管;.点击“Save&Close”。七.图像放大缩小.点击“ZoomIn",可放大指定区域;.点击“ZoomOut”,可返回之前的区域大小。八.分析统计A:预览选择的样品的图形B:所有的Plots的列表C:所有的Plots,Gates以及统计学的列表,可从中选择需要显示的信息D:所有的样品的列表,可从中选择需要分析的样品E:编辑后的统计学信息九.存储文件AccuriC6的存储文件后缀为.C6,该文件包含FCS文件,InstrumentSettings以及分析模板,点击File下Save,可保存完整的.C6文件。在每次获取样品之后,FCS文件会自动被保存,如需输出FCS文件,可点击File下ExportFCSFiles。十.关机清洗.放置一管经过滤的ddH2O,不要在软件中选择任何空样品孔,设定运行时间为2分钟,按RUN运行;36医学院实验室安全管理制度.放置一管去污液(0.5%-1%有效氯),选一个空样品孔,设定运行时间为2分钟,流速为高速,运行;.放置ddH2O,不要选择任何空样品孔,设定运行时间为2分钟,按RUN运行,运行结束后ddH2O保留在上样处;.关闭电源键(按键时间不能超过5秒),清洗液流循环会自动运行约13min;完成后仪器会自动关闭;.退出软件,关闭电脑。一-.注意事项.该仪器采用预约制度,没有预约不允许上机。.此机器不需要提前预热,请准备好样品后再开机器。.实验完成后请确认后续有无他人预约,如2小时内有预约记录,请保持机器开启;如2小时内无预约记录,请关机。并登记使用记录。37医学院实验室安全管理制度6.6BDJazz安全操作规程及注意事项一.液路系统准备.确定鞘液存量,若不足,加鞘液(最多7升)。.倒空废液桶至塑料废液收集桶,如果分选生物危害样本请在废液收集桶中加Bleach(Bleach与废液体积比按1:9),处理10分钟以上再倒至下水道。.盖好鞘液桶和废液桶的盖子后连接管路,如需要,连上0.2um的鞘液滤器(如果不连滤器,一定预先用0.2um或更小的滤器过滤鞘液)。.打开真空泵开关。废液桶仪表指针在5〃到10〃Hg间(低于5检查废液桶盖是否旋紧,高于10需通过调真空泵上的旋钮减少真空供应)。.打开空气压缩机开关(空压机右侧下方圆形按钮),左侧表示数120左右,右侧表80左右。.打开激光开关(位于激光器上),关掉所有激光shutter(压下为关)。.打开气源开关(桌面主机器右侧底部)。鞘液桶仪表读值为17左右为正常。.打开电脑电源(一体机右侧上方)。9.打开Spigot软件。DebubbleB。Jmzz9.打开Spigot软件。DebubbleB。Jmzz主操作平台米加电板分选收集平台上样管HilUlhFlushbucketNoH总支架二.液流调节.调液流前确认加电板位于打开位置(防止调液流时溅湿加电板)。.确保Nozzletip(喷嘴)不在Nozzle支架上。将flushbucket放在Nozzle下。.软件界面按版腌©。(按一下Rinse,flushbucket将满前再按一下Rinse关液38医学院实验室安全管理制度流,反复几次。注意:如果高压力,flushbucket很容易满).流式管中加入3-4ml超纯水,Nozzle五口浸入其中,在Ultrasoniccleaner中超声5分钟。.安装Nozzle,用手捏住Nozzle上部,避免触碰到Nozzle尖,利用液流吸附力装入Nozzle,再套入配套螺帽,用手拧紧,不要用扳手等工具(所有操作均要注意保护Nozzle尖)。.将debubblereservoir放在flushbucket上,加入乙醇(或蒸馏水),使Nozzle尖浸入液面。.软件界面按Purge使液流通过Nozzle流走并将气泡排出。①如遇难以排出的气泡,可以^ulse,结束后自动转为Purge;②如经上述步骤仍有气泡,可暂时移除debubblereservoir一按Purge引入大气泡一按Purge停一重新置入debubblereservoirfPurge至可见废液管中液面出现;③如果有顽固性气泡,需将Nozzle取下重新超声、冲洗、安装,确保)-圈密封好,重复以上步骤。(注意:一定确保液体浸没NozzleTip,如果液体快没有时,及时关掉Purge,加入液体)8.按5仃也8(Sample)打开液流后,再移去DebubbleReservoir(不要先取出debubblereservoir,否则会产生气泡),然后移
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