生物技术制药课后思考题

第一章：绪论思虑题什么是生物技术？生物技术所包含的内容及定义。答：1）生物技术又称生物工程，指人们以现代生命科学为基础，联合先进的工程技术手段和其余基础学科的科学原理，依据早先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。2）包含基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程、抗体工程、糖链工程、大海生物技术及生物转变等。（详细定义见P1）。生物技术药物的观点及分类。答：1）指采纳DNA重组技术或其余生物技术生产的用于预防、治疗和诊疗疾病的药物，主假如重组蛋白或核酸类药物。2）a.依据用途：预防、诊疗、治疗；b.按作用种类：细胞因子类、激素类、酶类、疫苗、单克隆抗体类、反义核酸、RNA扰乱类、基因治疗药物；c.依据生化特征：多肽类、蛋白质类、核酸类、聚乙二醇化多肽或蛋白质。生物技术药物在理化性质、药理学与作用、生产制备和质量控制方面的特征。答：1）理化性质（从药物多是蛋白质或核酸出发）：a.相对分子质量大；b.结构复杂；c.稳固性差；2）药理学作用：a.活性与作用体制明确；b.作用针对性强；c.毒性低；d.

体内半衰期短；e.有种属特异性；f.可产生免疫原性；

3）生产制备特征：

a.

药物分子在原猜中含量低；

b.原猜中常存在降解目标产物的杂质；

c.制备工艺条件平和；

d.分别纯化困难；e.产品易受有害物质污染；4）质量控制特征：a.质量标准内容的特别性；b.制造项下的特别规定；c.检定项下的特别规定。生物技术制药的观点和主要研究内容与任务。答：1）指利用基因工程、细胞工程等生物技术的原理和方法，来研究、开发和生产预防、治疗和诊疗疾病的药物的一门科学。2）主要研究内容与任务：a.生物制药技术的研究、开发与应用；b.利用生物技术研究、开发和生产药物。第二章：基因工程制药思虑题简述基因工程制药的基来源理和基本流程。答：1）利用重组DNA技术将外源基因导入到宿主菌或宿主细胞进行大规模培育和引诱表达以获取蛋白质药物的过程称为基因工程制药。2）目的基因的获取、表达载体的选择、目的基因与载体的连结、重组DNA转入到宿主细胞、重组子的挑选与判定、工程菌的发酵表达重组蛋白、表达产物的分别纯化、重组蛋白制剂的生产。与化学药物对比较，基因工程药物有什么特色？答：a.基因工程药物是由活细胞代谢产生的；b.基因工程药物的相对分子质量要远远大于一般的小分子化学药物；c.在制备基因工程药物时，需要除掉宿主蛋白和核酸残留，同时还要防备其余物质的污染，而化学药物大多是经过组合合成的，杂质是原料残留及反响副产物等。原核与真核表达系统各有什么优弊端？哪些蛋白质需要用真核表达系统？答：1）原核表达系统长处：宿主遗传背景清楚，商品化菌种齐备，方便购置；原核细胞操作简易、生殖快、周期短；大规模生产成本低，产量较高；下游纯化工艺简单，易于控制，生产效率高；弊端：缺少蛋白质折叠和翻译后加工系统；分泌能力不足，真核蛋白质常形成不溶性的包含体，表达产物需经变性、复性才恢复生性；有的表达系统，如大肠杆菌有内毒素，很难除掉；大肠杆菌中的表达不存在信号肽，产品多为胞内产物，提取困难。2）真核表达系统：长处：拥有转录后加工能力，外源基因能够是DNA也能够是cDNA；拥有蛋白质折叠和翻译后加工系统，可形成正确折叠、装置和糖基化等修饰的蛋白质；但是重组蛋白分泌表达，有益于纯化；弊端：生长迟缓、操作复杂、产量较低、生产成本较高等。3）某些需要修饰的蛋白质需要采纳真核表达系统。4.重组蛋白类药物的质量控制要考虑哪几个方面?答：蛋白质含量测定、纯度检查、理化性质的判定（分子量、等电点、序列、肽图、二硫键、氨基酸构成）、生物学活性判定、内毒素剖析、宿主蛋白与核酸残留剖析。基因工程药物怎样提升其疗效？此后的发展趋向有哪些？答：1）提升蛋白质药物的稳固性；减少蛋白质药物的免疫原性；延伸半衰期；提升组织的特异性。2）提升基因工程药物的产量；一些此刻还没有使用基因工程的手段的药物，实现基因工程化生产；建立突变体，改造已知的药物，加强疗效，减少临床上疗效弱、易产生抗性等不足。第三章：动物细胞工程制药思虑题离体培育的动物细胞有哪些种类？答：贴壁细胞、悬浮细胞和兼性贴壁细胞。生产用动物细胞有哪些种类？各有何特色？答：1）原代细胞：直接取自动物组织器官,经过粉碎消化而获取的细胞悬液。需要大批动物，花钱、费劳力。2）传代细胞系：染色体组型是2n核型；贴壁依靠，接触克制；可传代培育50代；无致癌性。3）转变细胞系：转变过程能够是自觉的和人工的，也可从肿瘤组织中获取；具备无穷的生命力；较短的倍增时间；较低的培育条件要求；合适于大规模工业化生产的要求；基因工程药物表达的宿主细胞，主假如转变细胞。4）工程细胞系：利用细胞交融技术或基因工程技术对转变细胞系的遗传物质进行修饰改造或重组，获取的拥有稳固遗传特征的细胞系。常用的动物细胞培育基有哪几类？答：天然培育基、合成培育基及无血清培育基。动能细胞大规模培育有哪几种方式？答：悬浮培育法、微载体培育法、多孔载体培育法、微囊化培育法、中空纤维培育法。利用动物细胞生产的药物主要有哪些？答：疫苗、单克隆抗体、激素、淋巴因子、多肽生长因子、酶类等。第四章：抗体工程制药思虑题传统的鼠抗体在治疗应用上有哪些限制？答：传统的鼠抗体在人体中频频使用会出现人抗鼠抗体反响（HAMA），致使抗体在人体内会快速被消除，半衰期缩短，甚至出现出现严重的不良反响。怎样对鼠源性单抗进行改造？答：将抗体的Fc段用人源替代，仅保存CDR区（超可变区）是鼠源的，即为结构成嵌合抗体；或许生产全人源化抗体。怎样制备杂交瘤细胞？答：用免疫原与免疫小鼠，从小鼠体内获取淋巴B细胞，制成细胞悬液，而后与骨髓瘤细胞一同混淆，使用聚乙二醇引诱细胞交融，将交融后的细胞混淆液在HAT选择性培育基上生长，在培育基上生长的即为杂交瘤细胞，进行抗体检测和克隆化培育，能够获取既能够产生单调性抗体，又能够无穷增殖的杂交瘤细胞。在制备单抗时为何要进行两次挑选？答：第一次挑选：获取淋巴B细胞与骨髓瘤细胞的交融细胞；第二次挑选：获取能够产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。制备单抗时为何要采纳B淋巴细胞与骨髓瘤细胞交融形成杂交细胞？答：能够产生抗体的淋巴B细胞不可以够无穷增殖，而骨髓瘤在体外培育拥有无穷增殖的特征，但是不可以产生抗体，将两者交融，交融细胞继承了两个亲代细胞的特征，形成了能够产生抗体又能够无穷增殖。第五章：疫苗及其制备技术思虑题简述疫苗的观点、构成及其作用原理。答：1）是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传得病的自动免疫制剂。2）构成：拥有免疫保护性的抗原，如蛋白质、多肽、多糖及核酸等，与免疫佐剂混淆制成。3）当机体经过注射或口服等门路接种疫苗后，疫苗中的抗原分子就会发生免疫原性作用，刺激机体免疫系统产生高效价特异性的免疫保护物质，如特异性抗体、免疫细胞及细胞因子等，当机体再次接触到同样的抗原时候，机体的免疫系统便会依循免疫记忆，快速制造出更多的保护物质来阻断病原菌的入侵，进而使机体获取针对病原体特异性的免疫力，使其免受损害而获取保护。传统的灭活疫苗和减毒活疫苗在实质应用中存在哪些限制？答：传统的减毒活疫苗，假如减毒程度不够，在使用时有致病的可能性，过分减毒又会使得免疫原性不足或丧失，失掉活疫苗的效劳。灭活疫苗经常需要多次接种，抗体滴度随时间而降落。简述基因工程亚单位疫苗的主要特色及制备方法。答：1）长处：产量高、纯度高、安全性好，用于难以培育或拥有潜伏致癌性病毒的疫苗制备。弊端：生产成本比较高（纯化），产品研发成本高，免疫接种成本高（多次注射），与传统疫苗对比，免疫成效较差。2）制备方法：在分别出病原体特异抗原编码基因的基础上，将外源基因转入此外一个非致病微生物或细胞中表达，而后经过分别纯化而获取特异的蛋白质。表达系统有大肠杆菌、酵母菌和高等植物。何为治疗性疫苗？请比较治疗性疫苗与预防性疫苗的主要差别？答：1）治疗性疫苗是指在已感得病原微生物或已患有某些疾病的机体中，经过引诱特异性的免疫应答