《天然药物化学》课程实践教学大纲

《天然药物化学》课程实践教学大纲NaturalProductChemistry课程编号：131301012课程类别：非独立开设实验课程学时：48学时适用对象：修完本课程的药学、药剂等专业学生先修课程：无机化学、有机化学、波谱解析等一、课程的性质与任务该课程可以支撑能力要求第（1）条以及素质要求第（3）条的达成。天然药物化学是—门中化学成分的一门学科，内容包括各类天然产物的分或药效成分)的结构类型，物主要类型化学成分的鉴定和生物合成途径等。运用现代化学科学理论与方法研究天然药物化学成分(主要是生理活性成理化学性质、提取分离方法，以及其目的是探索安全高效的天然产物及衍生的新化扩大药用资源，发掘新的有效成分，研究有效成分在植物体中随生长季节的变化规律，提高中药质量的方法。天然药物化学实验课则是要求通过本门课程的学习，使学生掌握天然产物的提取分离、纯化、预试实验等基本技能。合物。并根据已阐明结构的成分，按植物的亲缘关系在生物界探寻同类成分，以二、教学的目的与要求本课程目标是使学生化性质、提取分离与鉴别的基本理论与基本技能，熟悉天然药物量、临床疗效的密切关系，了解活性成分提取的一些新技术及其在实课程基本要求如下：1．理解天然药物中有效成分的主要结构类型及2．理解天然药物中主要有效成分的理化性质。3．理解天然药物中主要有效成分的一般提取分离方法。4．理解天然药物鉴别和色谱鉴别方法。通过本课程的学习，掌握中药或天然药物中有效成分的结构特点、理分提取与中药制剂质现代化中的作用。中活性成现中药特点。中主要有效成分的理化三、考核方式及办法：实验与笔试相结合四、实验项目名称与学时分配：天然药物化学实验安排一览表学时必开或实验分组分配选开类型人数序号实验项目名称5768888123芦丁的提取、精制芦丁的水解、鉴定芦丁的UV鉴定必开必开必开3-53-53-5汉防已甲素乙素的提取、精制4必开3-5885汉防已甲素乙素的分离6汉防已甲素乙素的鉴定必开必开3-53-5五、实验项目的具体内容：实验一、槐花米中芦丁的提取分离与鉴定第一次实验芦丁的提取（粗提）1．本次实验的目的和要求通过芦丁的粗提掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作2．实践内容或原理芦丁的结构中含有酚羟基与碱成盐溶于水中，向该盐溶液中加入酸，调节溶液的pH值，则芦丁有重新游离析出，从而获得粗制芦丁。3．需用的仪器、试剂或材料等试剂：槐花米，石灰乳液，硼砂，双蒸水，浓盐酸，镁粉，1%三氯化铝溶液，3%三氯化铁溶液，10%α-萘酚醇溶液，浓硫酸，乙醇。仪器：分析天平，烧杯，研钵，pH试纸，电炉，布氏漏，斗稠滤瓶，滤纸，剪刀，石棉网，玻璃棒，试管。4．实践步骤或环节预试：称槐花米1g，研碎，于试管中加乙醇10mL，在70oC水浴中浸渍20min。量取乙醇提取液2mL，加入少量镁粉，滴加浓盐酸4-5滴。溶液变红色。滴1滴提取液于滤纸上，在其旁滴一滴1%三氯化铝溶液，在两溶液融合处，呈现黄色。滴一滴提取液于滤纸上，在其旁边滴一滴3%三氯化铁，两溶液交汇处呈现棕色。④取乙醇提取液1mL，加10%α-萘酚醇溶液1-2滴，揺匀。再沿管壁缓缓加入浓H2SO4，不振揺，两液界面间出现紫色环。粗提：称取槐花米15g，研碎，置500mL烧杯中，加入硼砂（四硼酸钠，Na2B4O7）1g，加入沸水250mL，搅拌，加石灰乳调pH=8-9，保持微沸30min，不断补充蒸发掉的水分，趁热过滤，残渣用4倍体积的水再煎一次，趁热过滤，合并两次滤液，在60-70oC下，用浓盐酸调pH=4-5577静置。5．教学方式板书和演示相结合6．考核要求实验报告与操作表现综合考虑7．实践教学报告要求硼砂能与芦丁结合，既保护邻二酚羟基不被氧化破坏，又能调节碱水溶液的pH，实验证明提取时加入硼砂产品质量较好。加入石灰乳既可达碱溶液提取芦丁的目的，还可以除去槐花米中大量的黏液质和酸性树脂，但pH不能过高和长时间煮沸，因其可导致芦丁降解。pH过低会使芦丁形成佯盐而降低收率。第二次实验芦丁的精制1．本次实验的目的和要求通过芦丁的精制掌握芦丁重结晶的原理及操作。2．实践内容或原理利用芦丁在冷、热水中溶解度差（冷水1:10000，热水1:200）来达到重结晶的目的。3．需用的仪器、试剂或材料等试剂：芦丁粗品，双蒸水。仪器：电炉，烧杯，布氏漏斗，抽滤瓶，玻棒，滤纸，循环水真空泵，水浴箱。4．实践步骤或环节操作：水提酸沉法TLC铺板：硅胶G（H）-CMC板薄层板的制备：湿法铺板：用硅胶1.5g或2g和0.3%-0.5%CMC水溶液1:3-4的比例调成均匀状，倒于5cm×15cm的玻板上或载玻片商，铺均，放于水平处，在空气中晾干后105oC-110oC活化30min或1h活化板置于干燥器保存备用。若有气泡，可加1-2滴乙醇约研1min后倒于玻板上，硅胶板5g硅胶1块。5．教学方式板书和演示相结合6．考核要求578

实验报告与操作表现综合考虑7．实践教学报告要求预热布氏漏斗，溶解后的粗品趁热过滤。析晶时，静置勿搅动。第三次实验甙的水解、分离，甙元和糖的鉴定1．本次实验的目的和要求通过芦丁结构的检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。2．实践内容或原理云香甙的甙键为半缩醛结构，对酸不稳定，对碱较稳定，易被酸催化水解，并且云香甙键是一个酚甙键，由于p-π共轭作用，酚甙的甙元在甙键原子质子化时芳环对甙键原子有一定的供电子作用，更易水解。3．需用的仪器、试剂或材料等试剂：芦丁，2%硫酸，乙醇，BaCO3细粉，葡萄糖标准品乙醇液，鼠李糖标准品乙醇液，-邻苯二甲酸试剂，镁粉，酸，ZrOCl2，2%柠檬酸甲醇液，甲醇，10%α-萘酚醇溶液，1%三氯化铁水溶液，1%铁氰化钾水溶液。正丁醇，醋酸，苯胺浓盐仪器：圆底烧瓶开缸，毛细管，新华牌中速层析滤4．实践步骤或环（一）操作，研钵，电热套，铁架台，铁夹，冷凝管，抽滤瓶，布氏漏斗，玻棒，展纸。节称取甙纯品0.5g研细，置于圆底烧瓶中，加2%H2SO450mL，加热，微沸1h，稍冷后抽滤，滤纸取20mL，加入BaCO3（约10g），调pH值至中性，过滤，滤液浓缩后至2mL左右。抽滤所得沉淀用水洗至中性，用50%乙醇（约25mL）重结晶，得槲皮素。（二）把甙元重结晶物滤出，溶于无水乙醇Mg+HCl反应：显红色ZrOCl2/H+反应：不退色Molish反应：两液面交汇处无紫色环（三）甙与甙元的鉴别（四）甙元乙酰化物的制备甙元0.2g，置于1滴振揺使完全溶解，接空气冷凝干燥圆底烧瓶中，加醋酐6mL和浓硫酸管，90oC水浴30min，放冷，搅拌下倾入100mL冰水中，搅拌至油滴消失，有灰白色粉末析出，579

过滤洗涤用95%乙醇重结晶，得无色针晶，测熔点，为192oC-194oC。称重，计算产率。5．教学方式板书和演示相结合6．考核要求实验报告与操作表现综合考虑7．实践教学报告要求汉防己中汉防己甲素、乙素的提取、分离和鉴定第一、二次实验汉防己中汉防己总碱的提取与亲脂性叔胺生物碱的分离1．本次实验的目的和要求掌握生物碱的一般提取方法；掌握亲脂性叔胺生物碱的分离。2．实践内容或原理3．需用的仪器、试剂或材料等仪器：圆底烧瓶，冷凝管，电热套，铁架台，试管，蒸馏头，真空弯接管，抽滤瓶，真空泵，蒸发皿，恒温水浴箱，研钵，烧杯，天平，250mL分液漏斗，布氏漏斗，旋转蒸发仪，铁圈。试剂：汉防己粗粉，95%乙醇，10%盐酸，5%盐酸，11%盐酸，环己烷，乙酸乙酯，无水硫酸钠，碘化铋钾，碘化汞钾，碘化碘钾，硅钨酸，浓氨水。4．实践步骤或环节1）预试：预试液的制备：取汉防己粗粉2g，加蒸馏水20mL，用10%盐酸调pH<=3，60oC水浴加热15min，冷却过滤。碘化汞钾：滤液1mL+2滴碘化汞钾碘化铋钾：滤液1mL+2滴碘化铋钾碘化碘钾：滤液1mL+2滴碘化碘钾④硅钨酸：滤液1mL+2滴硅钨酸2）汉防己汉防己粗粉50g，置250mL圆底烧瓶中，用85%乙醇抽滤，减压浓总提起物。总生物碱的提取缩至小体积，得糖浆状3）亲脂性叔胺生物碱和水溶性胺生物碱的分离将乙醇提取物转移至大烧杯中，加入80mL11%盐酸溶解（分三次30mL，30mL，20mL加580

入使其充分溶解）50C水浴促溶，抽滤，除去树脂，沉淀以11%盐酸洗涤，沉淀弃。o合并滤液和洗涤液，用浓氨水（NH3·H2O）调pH=9-10，用环己烷并有机层减压回收溶剂，得亲脂性叔胺总碱。4）铺板-乙酸乙酯萃取3次，合5．教学方式板书和演示相结合6．考核要求实验报告与操作表现综合考虑7．实践教学报告要求1、药材的量为烧杯容量的1/3～1/2，再加溶剂使其浸过药面1～2cm2、浴蒸馏液装至烧瓶体积的1/2～2/3，应加沸石。第三次实验汉防己甲素、乙素的分离1．本次实验的目的和要求汉防己甲素、乙素分离纯化的原理和方法；复习巩固结重晶的基本操作。2．实践内容或原理根据生物碱溶解度差异进行分离。3．需用的仪器、试剂或材料等烧杯，抽滤瓶，铁架台，铁圈，旋转蒸发仪，锥型瓶，展开缸，毛细管。试剂：1%盐酸，浓氨水，氯仿，1%NaOH水溶液，无水硫酸钠。4．实践步骤或环节1）汉防己素的分离2）汉防己甲素、乙素的薄层鉴定将分离得到的晶体1，2与汉防己展开剂：环己烷-乙酸乙酯-二乙胺（6:2:1）显色剂：改良碘化铋钾试剂（在喷显色剂之前应在80oC）左右完全挥干展仪器：大甲素、乙样品：甲素、乙素的标准品做对照。开剂。5．教学方式板书和演示相结合6．考核要求实验报告与操作表现综合考虑7．实践教学报告要求581

六、实践教学中应注意的问题1．组织管理的要求：（1）、实验进程表由教务处编制下发，作为实施、检查、考核的依据，若因客观原因不能按实验进程表规定的时间做实验，有关当事人应事前向教务处提出申请，经与实验室协商后另定时间。（2）、实验授课计划由任课教师根据实验教学大纲编制，与理论授课计划同时完成，力争开出大纲规定的全部实验2．对教师的要求：（1）、实验指导人员应预先做实验，试做实验报告，并检查学生实验所用之仪器、设备、药品、试剂等准备情况，以确保实验的顺利进行。（2）、实验时，指导人员不可擅离岗位，要认真指导，但不可包办代替。（3）、实验课与理论课一样，必须备好课、好写教案，无教案不准上实验课。（4）、实验结束后，要检查仪器设备、工具等是否缺损，检查学生实验数据或结论是否合理、准确。要指导学生做好整理工作。（5）、认真批改实验报告3．对学生的要求：（1）、实验课前应预习上课内容，并做好实验预习报告；（2）、实验过程中应按老师要求操作。如出现意外情况，需在带教老师或实验员的指导下处理相应事件，切勿盲目处理，以免造成更加严重的后果；（3）、实验完毕后，应该主动整理实验用具，清洗实验台，打扫实验卫生，经过带教老师或实验员的检查后同意方能离开；（4）、严禁将危险品带出实验场地。4．对教学基地、实验室和实验员的要求：（1）、实验员