生物化学教学课件：血糖和血脂的测定

实验一：激素对血糖浓度的调节[目的与要求]

（1）掌握测定血糖的原理与方法；（2）通过对实验家兔在激素注射前、后血糖浓度的测定，了解激素对血糖浓度的影响。[实验原理]血糖：是血液中的葡萄糖（glucose）。正常范围:3.89—6.11mmol/L

高糖血症：＞7.1mmol/l

低糖血症：＜2.8mmol/l2.血糖测定的方法：（1）葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法（GOD-POD，酶法）原理：利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。临床检验上常用此法，以及葡萄糖脱氢酶法和己糖激酶法。特异性高，但价格较贵。酸中加热邻甲苯胺（2）邻甲苯胺法（化学法）

原理：葡萄糖

羟甲基糠醛

醛亚胺（蓝色，Schiff氏碱的一种）该法特异性较高，价廉。葡萄糖在酸中加热与胺类生成的有色化合物（3）Folin-Wu法（化学法）原理：葡萄糖氧化还原铜，之后还原磷钼酸，生成有色化合物(蓝色）。该法特异性差，已趋淘汰。3.临床检验血糖方式：静脉抽血（静脉血浆）快速血糖仪（毛细血管动脉全血）全血与血浆：血浆血糖值>全血血糖值(红细胞)静脉血与毛细血管血不同:一般在空腹8小时以上时两者血糖值无大差异。但进食后，动脉血糖值比静脉血糖值高。神经系统（下丘脑）激素4.血糖的调节

（1）方式2）降血糖激素：胰岛素（insulin）机制:增强葡萄糖去路（氧化、糖原合成），减少来源（糖原分解、糖异生）通过关键酶实现;

升血糖激素：胰高血糖素（平时调节）

机制:

减弱葡萄糖去路（氧化、糖原合成），增加少来源（糖原分解、糖异生）通过关键酶实现糖皮质激素、肾上腺素（应激调节）[操作步骤]

家兔2只，空腹12小时，体重约2kg/只。抗凝剂湿润注射器和试管，心脏取血2ml，标明胰1和肾1。注射激素：肌肉注射胰岛素0.2ml,1h后取血。肾上腺素约0.4ml，0.5h后取血。4.抗凝，心脏取血2ml，标明胰2和肾2。5.3000rpm/min,5min分离血浆备用。6.试剂（ul）空白管

胰-1胰-2肾-1肾-2标准血浆葡萄糖标准液（0.2mg/ml）蒸馏水

10101010-----1010血糖检测试剂100010001000100010001000[结果计算]

血糖浓度

=测定管吸光度标准管吸光度×标准液浓度[目的与要求]掌握血浆脂蛋白分类，了解各类脂蛋白的临床意义。血浆所含脂类统称血脂，包括：甘油三酯、磷脂、胆固醇及其酯以及游离脂酸。血脂与血浆中的蛋白质结合，以脂蛋白(lipoprotein)形式而运输。血浆脂蛋白主要由蛋白质、甘油三酯、磷脂、胆固醇及其酯组成。实验二：血浆脂蛋白的电泳分离电泳法

♁CM

前血浆脂蛋白的分类根据不同脂蛋白的表面电荷不同,在电场中具有不同的迁移率各种脂蛋白因所含脂类及蛋白质量不同,其密度、颗粒大小、表面电荷、电泳行为及免疫性均有不同α-脂蛋白相当于α1-球蛋白的位置前β-脂蛋白相当于α2-球蛋白的位置β-脂蛋白相当于β-球蛋白的位置超速离心法：CM、VLDL、LDL、HDL乳糜微粒chylomicron(CM)极低密度脂蛋白verylowdensitylipoprotein(VLDL)低密度脂蛋白lowdensitylipoprotein(LDL)高密度脂蛋白highdensitylipoprotein(HDL)分别相当于电泳分离的CM、前β-脂蛋白、β-脂蛋白及α-脂蛋白疏水性较强的TG及胆固醇酯位于内核。具极性及非极性基团的载脂蛋白、磷脂、游离胆固醇，以单分子层借其非极性疏水基团与内部疏水链相联系，极性基团朝外。脂蛋白的结构CM:运输外源性甘油三酯（TG）及胆固醇。VLDL：运输内源性TG。LDL：转运肝合成的内源性胆固醇。HDL：主要是参与胆固醇的逆向转运(reversecholesteroltransport,RCT)，即将肝外组织细胞内的胆固醇，通过血循环转运到肝，在肝转化为肝汁酸后排出体外。脂蛋白的生理功能：——血脂高于参考值上限。诊断标准：血浆脂蛋白代谢异常导致血脂异常或高脂血症（一）高脂蛋白血症(hyperlipoproteinemia)成人（空腹14~16h）

TG>2.26mmol/l或200mg/dl；胆固醇>6.21mmol/l或240mg/dl儿童胆固醇>4.14mmol/l或160mg/dl

①按脂蛋白及血脂改变分六型②按病因分：分类：原发性(病因不明)继发性(继发于其他疾病)（二）动脉粥样硬化动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）指一类动脉壁的退行性病理变化，是心脑血管疾病的病理基础，发病机理十分复杂。1.LDL和VLDL具有致AS作用As的病理基础之一是大量脂质沉积于动脉内皮下基质，被平滑肌、巨噬细胞等吞噬形成泡沫细胞。血浆LDL水平升高往往与AS的发病率呈正相关。2.HDL具有抗AS作用

血浆HDL浓度与AS的发生呈负相关。（1）肝外组织的胆固醇转运至肝，降低了动脉壁胆固醇含量；（2）抑制LDL氧化的作用