ASCOCAP乳腺癌HER2检测指南的学习体会和困惑-聂秀

ASCO/CAP乳腺癌HER2检测指南

的学习体会和困惑武汉协和医院病理科聂秀主要内容1、IHC判读标准的学习和困惑2、实践中需要重视的几个问题3、接受亮视野ISH检测4、对组织处理的要求IHC检测流程和判读标准2007版ArchPatholLabMed.2007;131(1):18-43IHC检测流程和判读标准2013版2007版：30%ArchPatholLabMed.2013Oct7.[Epubaheadofprint]IHC检测流程和判读标准2013版2007版：30%2007版：任何比例ArchPatholLabMed.2013Oct7.[Epubaheadofprint]IHC检测流程和判读标准2013版2007版：30%2007版：任何比例2007版：无染色ArchPatholLabMed.2013Oct7.[Epubaheadofprint]主要内容1、IHC判读标准的学习和困惑2、实践中需要重视的几个问题3、接受亮视野ISH检测4、对组织处理的要求对肿瘤医生的推荐要点必须要求对乳腺癌患者的每个浸润性原发灶和转移灶（若为Ⅳ期肿瘤，且可获得标本）进行HER2检测，以指导HER2靶向治疗的决策。同组织病理学特征的不一致性如果发现下述组织病理学特征，初始HER2检测结果为阳性，则应当要求新的HER2检测。组织学1级的下列类型腺癌：浸润性导管或小叶癌，ER和PgR阳性小管癌（至少90%为纯小管癌）粘液癌（至少90%为纯粘液癌）筛状癌（至少90%为纯筛状癌）腺样囊性癌（至少90%为纯腺样囊性癌）ArchPatholLabMed.2013Oct7.[Epubaheadofprint]对浸润性微乳头状癌判读3+不再强调完整的闭环膜染色至少判2+即使存在异质性，只要扩增细胞连续、均质，且占浸润癌10%以上，就应明确报道为ISH阳性。推荐：切片超过6周不再用于HER2检测IHC检测流程和判读标准2013版

如因技术问题导致无法将单一或双重检测（IHC和ISH）报告为阳性、阴性或不确定时，必须报告HER2检测结果为无法确定（indeterminate）。情况可能包括：样本处理不当人为原因（人为挤压或边缘效应）导致判读困难检测失败应要求对另一样本进行检测以确定HER2状态应在报告的备注中注明检测结果无法确定的原因。ArchPatholLabMed.2013Oct7.[Epubaheadofprint]主要内容1、IHC判读标准的学习和困惑2、实践中需要重视的几个问题3、接受亮视野ISH检测4、对组织处理的要求亮视野ISH检测2013版指南：

“可接受的（IHC和ISH）检测……应优先使用FDA批准的IHC，亮视野ISH，或FISH检测”“在进行亮视野ISH检测时，首先必须与FDA批准的FISH检验进行对比验证”

“对于亮视野ISH，计数时应对正常乳腺细胞和肿瘤细胞中的着色模式进行比较，因为可能会观察到难以判读的人为原因造成的着色。如果肿瘤细胞的着色模式既非正常也非明显的扩增，应寻求专家意见。”图2单探CISH×400（原放大倍数）A：信号点＜4，HER2无扩增；B：信号点＞6而＜10，HER2低拷贝扩增；C：信号点融合成大簇，HER2高拷贝扩增。单探CISH双探CISH图8A:双探CISH×400,B:双探CISH×400（原放大倍数）A:箭头标记处为原位癌，箭末标记处为正常小导管，中间为淋巴细胞；B:箭头标记处为浸润癌，箭末标记处为原位癌。IHC+单探CISHIHC+双探CISH乳腺SISH无扩增扩增胃SISH无扩增扩增主要内容1、IHC判读标准的学习和困惑2、实践中需要重视的几个问题3、接受亮视野ISH检测4、对组织处理的要求对组织处理的要求2007版：组织获取至固定的时间应尽可能短；用于HER2检测的标本应在10%中性缓冲福尔马林中固定6-48小时；细胞学标本必须固定在福尔马林中。2013版：

“应确保所有用于HER2检测的标本（细胞学标本、穿刺活检或切除标本）都尽快开始固定流程（离体后在1小时内开始固定），并于10%中性缓冲福尔马林中固定6至72小时”冷缺血时间：外科医师切除肿块到肿块进入固定液的时间。理想的时间应该少于30分钟。冷缺血时间直接影响蛋白、RNA、DNA等成分的降解速度，从而影响对这些成分的准确检测。防止组织自溶甲醛浸透组织的速度大约1mm/h,不是简单的化学固定反应，需要甲醛对蛋白和核酸进行交联。固定时间至少6-8h，最好24h。小组织需要与大组织同样的充分的固定时间。固定不及时，组织自溶,形态无法观察HE检测固定较差