工业药物分析03第4,5节 药物定量分析与分析方法验证

第四节、含量测定一、方法选择原料药-侧重方法准确性

中药材及其成方制剂-侧重方法专属性和灵敏度化学药物制剂

二、常用方法及含量计算一、容量分析法用原料药精制品(含量>99.5％)或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于0.2％；进行回收率试验。回收率一般在99.7～100.3％之间。

(一)容量分析法的特点

(二)容量分析法的计算问题

1．

滴定度

2．

滴定度（T）的计算

3．

百分含量计算

（1）直接滴定法

含量%=V×T´W×100%=V×T×FW×100%（2）回滴定法（剩余滴定法

）二、光谱分析法(一)UV-可见分光光度法用适当浓度的精制品进行测定，其RSD一般不大于1％。制剂的测定，回收率一般应在98％～102％之间。

线性：吸光度A一般在0.2～0.7，浓度点n＝5。用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程，r应大于0.999(n＝5)，方程的截距应近于零。三、色谱分析法(一)HPLC法：要求RSD<2％，回收率98％～102％之间。线性范围：用精制品配制一系列标准溶液，浓度点n应为5～7，用浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r应大于0.999，截距应趋于零。专属性：要考查辅料、有关物质或降解产物对主药的色谱峰是否有干扰，如有干扰应设法排除。第五节药品质量标准分析方法验证

一)目的证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草和修订说明中。

二)用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药物合成方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。三)需验证的分析项目1.鉴别试验；2.杂质定量或限度检查；3.原料或制剂中有效成分含量测定；4.制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；5.溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。

验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。四)验证内容

一、准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。

回收试验空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M

加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M

数据要求规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。1.含量测定方法的准确度

原料药可用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。

制剂可用含己知量被测物的各组分混合物进行测定，即采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法。如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，或与另一个已建立准确度的方法比较结果。中药分析的准确度一般用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在95～105%范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在90～110%范围内。RSD一般在3%以内。2．杂质定量测定的准确度

可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。二、精密度（precision）

精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。偏差（d）：测量值与平均值之差标准（偏）差（SD或S）相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）

1.重复性在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价。

2.中间精密度同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。

3.重现性不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。三、专属性（specificity）

指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。四、检测限（limitofdetection，LOD）

检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。是限度试验参数，无需定量测定。常用%、ppm、ppb表示。1．非仪器分析目视法

用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。

2．信噪比法用于能显示基线噪音的分析