分子生物学专题试题题库

《分子生物学》专题题库专题一分子生物学总论一、名词解释重组DNA技术：将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译的过程，以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程。gene:生物体携带和传递遗传信息的基本单位。产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。二、单项选择题证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是：()从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂DNA突变导致毒性丧失生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代1953年Watson和Crick提出：()多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋DNA的复制是半保留的，常常形成亲本一子代双螺旋杂合链三个连续的核苦酸代表一个遗传密码遗传物质通常是DNA而非RNA分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变第一个用实验证明“基因”学说的科学家是()。T.H.MorganB.GregorMendelC.WatsonD.Griffith证实DNA是遗传物质的实验描述正确的是()A、Avery利用灭活S型肺炎链球菌完成的转化实验和Hershey的噬菌体侵染细菌实验B、Griffith的肺炎链球菌感染实验C、Morgan的果蝇染色体实验D、烟草花叶病毒重建实验生物分类学中，将地球生命分成“五界”在分子生物学中，常将生命分成“三域”(domain),“三域”是指:A、动物B、细菌C、真核D、古细菌E、植物三、填空题请写出以下简称的英文全称DNA：deoxyribonucleicacidRNA：ribonucleicacidmRNA：messengerRNAsiRNA：smallinterferingRNA四、简答与论述题1．分子生物学的主要研究内容有哪些？分子生物学的主要研究内容包括以下4个方面：DNA重组技术，基因表达调控研究，生物大分子结构功能研究，基因组、功能基因组与生物信息学研究。重组DNA技术和基因工程技术的定义？重组DNA技术：将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。基因工程（geneticengineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。简述孟德尔、摩尔根和沃森等人对分子生物学发展的主要贡献。孟德尔:经典遗传学创始人，提出遗传单位——遗传因子（现在遗传学称为基因），并揭示遗传学的两条基本规律（统一规律和分离规律），使人们对性状遗传有了理性认识。摩尔根:第一个用实验证明“基因”学说;提出遗传性状的连锁规律，又称连锁遗传，第一次将代表某一特定性状的基因，与某一特定的染色体联系起来，使科学界普遍认识了染色体的重要性并接受了孟德尔的遗传学原理，是现代遗传学的奠基石。沃森和克里克:提出DNA双螺旋模型，揭示了遗传信息的传递规律，使人们对于基因的理解具体化，也促进了分子生物学的崛起及快速发展。早期主要有哪些实验证实DNA是遗传物质？写出这些实验的主要步骤。1928年，英国科学家Griffith进行了肺炎双球菌转化实验。1944年，Avery用致病细菌的分离提取物证明遗传物质是DNA，而不是蛋白质。1952年,Hershey和Chase的T2噬菌体侵染细菌实验。肺炎双球菌转化实验主要步骤:将活的S型细菌注射到实验小鼠体内，小鼠迅速死亡;将经烧煮灭活的S型细菌注射到小鼠体内，小鼠保持健康将活的R型细菌注射到小鼠体内，小鼠也保持健康;而将烧煮灭活的S型细菌和活的R型细菌一道注射到小鼠体内却能导致小鼠死亡。分离被杀死的S型细菌的各种组分并分别与活的R型细菌混合，注射小鼠后发现，只有S型死细菌的DNA能使R型细菌发生转化，获得致病力。证明遗传物质是DNA的实验主要步骤:将平滑型肺炎球菌的主要细菌结构去除。然后，在剩余下来的物质中加入了蛋白酶，以促进蛋白质的分解。将粗糙型的肺炎球菌加入平滑型肺炎球菌的DNA中后，粗糙型的肺炎球菌被转化成了平滑型的肺炎球菌，并稳定地进行了几代的自我复制。表明DNA才是真正的遗传物质。专题二核酸生物学一、名词解释1•半保留复制：每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种复制方式被称为DNA的半保留复制。origin：复制起点复制叉：replicationfork复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以这个复制起始点呈现叉子的形式，被称为复制叉。复制子（复制单位）：replication把生物体内能独立进行复制的单位称为复制子。端粒：（telomere）是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构，它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体。其DNA序列相当保守，一般有多个短寡核苷酸串连在一起构成。具有保护线性DNA的完整复制、保护染色体末端和决定细胞的寿命等功能。SOS修复：是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。卫星DNA和高度重复序列的微卫星DNA:高度重复序列---卫星DNA，只在真核生物中发现，占基因组的10%〜60%,由6〜100个碱基组成，在DNA链上串联重复成千上万次。用CsCl密度梯度离心将卫星DNA与其他DNA分开，形成两个以上的峰，即含量较大的主峰和高度重复序列小峰，后者又称卫星区带（峰）。中等重复序列与单拷贝：中度重复序列这类序列的重复次数在101~104之间，占总DNA的10%〜40%，各种rRNA、tRNA以及某些结构基因如组蛋白基因等都属于这一类。中度重复序列往往分散在不重复序列之间。单拷贝基因：指基因组中拷贝数目少，只有1个或几个的基因，大多数是属于生物体内组成性表达持家基因（管家基因）。基因家族：（genefamily），是来源于同一个祖先，由一个基因通过基因重复而产生两个或更多的拷贝而构成的一组基因，它们在结构和功能上具有明显的相似性，编码相似的蛋白质产物，同一家族基因可以紧密排列在一起，形成一个基因簇，但多数时候，它们是分散在同一染色体的不同位置，或者存在于不同的染色体上的，各自具有不同的表达调控模式。真核细胞中许多相关的基因常按功能成套组合（课本上的）。semidiscontinuousreplication:（半不连续复制）:在DNA复制中，DNA合成按5'——3'方向，与复制叉移动方向一致的链称前导链，与复制叉方向相反的链称后随链。前导链的合成是连续的，后随链在合成中，以与复制叉移动相反的方向合成一系列的冈崎片段，再把它们连接成完整的后随链。这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制在生物界是有普遍性的，称为双螺旋DNA的半不连续复制。Transposon转座子：存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。冈崎片段：在DNA半不连续复制中产生的长度为1000-2000bp的短的DNA片段，能被连接成一条完整的DNA链。C值矛盾：C值反常现象（C-valueparodox）:C值通常指一种生物单倍体基因组DNA的总量，其往往与种系的进化复杂性不一致的现象，即基因组大小与遗传复杂性之间没有必然联系某些较低等的生物C值反而更大。退火:当变性的DNA溶液缓慢降温时,DNA的互补链可重新聚合形成规则的双螺旋，这一过程称DNA的复性。Tm值：检测DNA溶液的紫外吸光度变化可以监控DNA的变性过程，DNA的吸光度增加到最大值的一半时的温度称为DNA的解链温度或熔点。19、SNP:基因组DNA序列中由于单个核苷酸（ATCG）的突变而引起的多态性。20、组蛋白：组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体。组蛋白含有大量的赖氨酸和精氨酸。组蛋白和DNA的含量之比接近1:1.。组蛋白的特性O1进化上的极端保守性；02无组织特异性；03肽链上氨基酸分布的不对称性。碱性氨基酸集中分布在N端的半条链上。04组蛋白的修饰作用:包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化以及ADP核糖基化等。修饰作用只发生在细胞周期的特定时间和组蛋白的特定位点上。05富含赖氨酸的组蛋白H5。21、染色质由DNA、RNA,组蛋白和非组蛋白组成。22、核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bpDNA组成的。是由DNA和组蛋白形成的染色质基本结构单位。23、DNA变性：DNA双螺旋的两条链间通过非共价键结合在一起，当DNA溶液接近沸点或pH较高时，互补的两条链分开，称为DNA的变性。（denaturation）DNA的复性：当变性的DNA溶液缓慢降温时,DNA的互补链可重新聚合形成规则的双螺旋，这一过程称DNA的复性。（退火）二、选择题双链DNA中的碱基对有：（）A.A-UB.G-TC.C-GD.T-AE.C-ADNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述：（）哺乳动物DNA约为45°C，因此发烧时体温高于42°C是十分危险的依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值可通过碱基在260nm的特征吸收蜂的改变来确定就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度DNA的变性：（）包括双螺旋的解链可以由低温产生是可逆的D.是磷酸二酯键的断裂包括氢键的断裂在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成：()基于各个片段问的互补，形成反向平行双螺旋依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基DNA分子中的超螺旋：()仅发牛于环状DNA中。如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后(即增加缠绕数)才闭合，则双螺旋在扭转力的作用下，处于静止在线性和环状DNA中均有发生。缠绕数的增加可被碱基配对的改变和氢键的增加所抑制可在一个闭合的DNA分子中形成一个左手双螺旋。负超螺旋是DNA修饰的前提，为酶接触DNA提供了条件是真核生物DNA有丝分裂过程中固缩的原因是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的总和DNA在10nm纤丝中压缩多少倍(长度)？()A.6倍.B.10倍C.40倍D.240倍E.1000倍⑴10000倍DNA在30nm纤丝中压缩多少倍?()A.6倍B.10倍C.40倍D.240倍E.1000倍⑴10000倍DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍?()A.6倍B.10倍C.40倍D.240倍E,1000倍(f)10000倍DNA在中期染色体中压缩多少倍?()A.6倍B.10倍C.40倍D.240倍E.1000倍(f)10000倍组蛋白的净电荷是：()A,正B.中性C.负核小体的电性是：()A.正B.中性C.负当新的核小体在体外形成时，会出现以下哪些过程?()核心组蛋白与DNA结合时，一次只结合一个—个H32—H42核形成，并与DNA结合，随后按顺序加上两个H2A—H2B二聚体核心八聚体完全形成后，再与DNA结合13.1953年Watson和Crick提出：（）

A.多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋DNA的复制是半保留的，常常形成亲本—子代双螺旋杂合链三个连续的核苦酸代表一个遗传密码遗传物质通常是DNA而非RNA最常见的DNA二级结构是（）A.A-DNAB.B-DNAC.C-DNAD.Z-DNA一个物种同另一个物种DNA的区别在于（）A、核糖B、磷酸集团C、碱基顺序D、以上都对人类基因组包括的基因数目为（）。A.5千〜6千B.5万〜6万C.十几万D.100万构成染色体的基本单位是（）.ADNAB.核小体C.螺线管D.超螺线管在组装核小体时，彼此形成二聚体的组蛋白是：（）A、H3-H4B、H3-H3C、H4-H4D、H2A-H2A以下有关染色质的叙述不正确的是：（）A、原核生物无染色质结构，真核生物才有B、染色质由DNA、RNA、组蛋白和非组蛋白组成。C、染色质的基本结构单位是核小体。D、组蛋白与DNA含量之比接近1：1关于一种真核生物的基因组的最佳定义是：（）A、这种生物所有的编码蛋白质的基因B、这种生物细胞核的所有DNAC、这种生物所有的遗传物质D、这种生物单倍体细胞所具有的所有染色体E、这种生物所有的基因原核生物DNA复制不需要A、DNA聚合酶IB、DNA旋转酶C、DNA解链酶D、DNA连接酶E、端粒酶大肠杆菌染色体DNA复制所需要的DNA聚合酶有：（）A、DNA聚合酶IB、DNA聚合酶IIC、DNA聚合酶IIID、DNA聚合酶I和IIIE、DNA聚合酶II和III乙酰化三、填空题乙酰化在细胞周期的特定时间，有些组蛋白的特定位点会发生修饰作用，这些修饰包括甲基化磷酸化；泛素化等。这些修饰作用主要与基因激活和沉默、DNA修复拼接复制、染色体组装、细胞信号转导等有关。DNA复制时，DNA聚合酶按5'—3'方向进行复制。染色体上的蛋白质主要包括组蛋白和非组蛋白。前者是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体。转座子是存在于染色体DNA上可以自主复制和位移的基本单位，根据转座子的复杂程度大致可分为插入序列（IS）和复合型转座子两类。四、简答与论述题简述同位素标记、密度梯度离心技术在分子生物学研究中的应用（复制的半保留N15和半不连续H3标记—连接酶突变核酸序列特点研究等）。⑴1卞-标记研究DNA的半保留复制，把细菌放在含的培养液中培养若I代,分离出的DNA是含勺的“重"DNAt密度比-般含“的亦人高口用密度梯度离心法,''N-D^A形成的致密带位干普通"N-DXA所形成的致密带的下方.把含］\-DNA的细菌放回含普通的丽心培养液中培养口细菌在营养条件充足时，20分钟就可以生长成新一代。提取子一代的1AA再作密度梯度离心分析，发现其致密带介于重带与普通帯之间.看不到有单独的重带或普通DNA实验结果说明：子…代DNA双链中有一股是卞单链，而另」股是HN单链.前者是从亲代接受和保留下來的+后者则是完全新合成的口密度梯度离心实验，完全支持半保留复制的没想B含L5N-DNA的细菌在普通培养液中继续培育岀子二代，ItDNA则是中等密度的DNA与普通DNA各占T这也进步证明SZ制是采取半保昭式的.实验还可按了3代、子4代……进存下去宀_DNA则按1伍1/16的儿何级数逐渐股“稀（2rtl-标记研究DNA的半不连续复制T即连接酶突变核酸序列特点研究等；用脉冲标记大肠杆菌培养物，优先标记的是新合成的恥新合威的人名数是…些含有1000核首酸的短片段.若再将菌放>到不带II的培养基屮保温，发现怕出现在大片断中了。若用ma连接酶突变的菌株作以上测试，Il-am现在小片段中，说明D旨的复制是不连续的"举例说明染色体外遗传元件的不同复制机制。（如：e式、D型、滚筒式、）有些病毒（如腺病毒、©29噬菌体等）及线粒体DNA的复制是单向进行的，滚筒式属单向复制。质粒整合前为e式或滚筒式复制，整合后为一个复制子，质粒为双向复制e式。真核细胞内线粒体DNA的复制方式为D-环复制（D-loop复制）形式。D-环复制特点是两条链的不同步复制。DNA复制中都包括那些酶系统和蛋白因子，这些酶在复制中的各自作用是什么？是通过那些试验现象发现的？（1）解旋酶:DNA复制时，解旋酶在ATP的作用下可促使DNA母链不断解开形成单链；•DNA拓扑异构酶：能够消除解链造成的正超螺旋的堆积，消除阻碍解链进行的这种压力，使复制得以延伸。•解链酶：能够通过水解ATP获得能量来解开双链DNA，大部分DNA解链酶可沿后随链模板的5'----3'方向并随着复制叉的前进而移动，只有另一种解链(Rep蛋白)是沿前导链模板的3'----5'方向移动。•SSB蛋白(单链结合蛋白)：保证被解链酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构，它以四聚体形式存在于复制叉处，待单链复制完成后才离开，重新进入循环。所以SSB的作用是保持单链的存在，并没有解链的作用。稳定解开的单链，以保证该局部结构不会恢复成双链。DNA聚合酶I的功能：a.5'-3'聚合作用，b.3'-5'外切酶活性(校对作用)，c.5'-3'外切酶活性(切除修复作用)；DNA聚合酶III的功能:主要是合成新的DNA链；DNA聚合酶II的功能:主要与修复有关；DNA连接酶：借助ATP水解提供的能量，催化DNA单链nick的5'-端与3'-端生成磷酸二酯键。(2)DNA聚合酶I:可以用dNTP合成DNA链，并且该酶突变使菌易受环境影响而突变；DNA聚合酶III:DNA聚合酶I的合成速度不能满足菌生长的需要，并且DNA聚合酶I突变的菌仍然可以复制DNA;引物酶:通过以a-"p-NTP标记+未标记dNTP为底物，引发合成后用稀碱处理，水解DNA和RNA的连接处，使RNA.上的”p转移到了DNA上，证明RNA为引物，从而发现引物酶。通过什么实验证明DNApolIII合成以RNA为引物。以a-^p-NTP标记+未标记dNTP为底物,弓I发合成后用稀緘处理,水解DNA和RNA的连接处，使RNA上的勺转移到了IMA上*证明R7A为引物“生物体内哪些机制保证了DNA复制的保真性。DNA聚合酶的校对作用；RNA引物起始复制可减少复制错误；修复系统有多种机制(光修复、切除修复、错配修复、易错修复、SoS修复)和酶。什么叫端粒？说明端粒复制的特点？端粒位于真核生物染色体DNA的末端特定的序列结构。端粒是由简单而串联重复的序列组成的。端粒DNA序列有取向性，可以与由蛋白质和RNA组成的端粒酶结合配对，以RNA为模板进行类似逆转录合成DNA，向5'-3'延伸端粒至模板RNA末端后，延长的DNA末端与RNA模板解离，端粒酶移动，重新定位于延长后的DNA3'端，开始下一轮延长过程，如此反复可达数百次，以对抗DNA复制过程中5'引物消后无法补齐造成的染色体逐渐缩短，维持染色体的长度。端粒酶在生殖细胞中起作用，在体细胞中无活性或活性低。简要说明沉默突变、致死突变、渗漏突变、进化突变的原因。沉默突变:主要因为密码子的简并性，点突变不引起氨基酸的变化；或者个别氨基酸改变为结构和性质相似的氨基酸，则不影响表形，即基因型(genotype)改变，表现型(phenotye)不变。致死突变:关键氨基酸改变，如酶的活性中心突变，或者发生无义突变，使编码的蛋白质功能丧失，影响生物存活。渗漏突变:某个氨基酸改变，但基因产物并无重大改变，如酶的Km和Vmax改变。可使生物适应环境或丧失某些功能，可产生新种。（4）进化突变:发生了有利于物种生存的结果，使生物进化。对比引物酶和引发体DNApolIII和DNApolI碱基对间在生化和信息方面有什么区别?在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的百分含量？真核基因组的哪些参数影响C0tl/2值？12•请问哪些条件可促使DNA复性（退火）？1）低温；容易理解,温度高,分子运动快,容易解链；2）有机溶剂，二甲酰胺等可促进DNA分子保持双链状态。3）DNA的组成，如GC含量比较高,DNA更容易形成双链。为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要？（1）大沟中的分子表面提供了特异性信息，为和蛋白质等大分子的互作提供了结构基础。（2）由于A-T/C-G配对时，两个核糖磷酸连接的碱基的主轴并不成180°所致，因此DNA在磷酸骨架距离较近的一侧形成小沟，而对侧形成大沟；大肠杆菌染色体的分子量大约是2，5xlOOOOOOOOODa,核苷酸的平均分子量是330Da。邻近核苦酸对之间的距离是0.34nm；双螺旋每一转的高度（即螺距）是0.34nm,（1）该分子有多长⑵该DNA有多少转？曾经有一段时间认为，DNA无论来源如何，都是4个核苷酸的规则重复排列（如ATCG.ATCG，ATCG,ATCG…），所以DNA缺乏作为遗传物质的特异性。第一个推翻该四核苦酸定理的证据是什么？现在对人类基因组的主要研究工作是进行基因组的序列测定。然而，有人根据人类基因组是由重复序列组成为由，认为反复对同一种DNA进行测序是不明智的。你能否拟定两份计划，一份计划应保证仅仅单一序列DNA被测序，第二个计划应允许仅仅转录的单一DNA序列被测序。请简述你的两份计划。生物体内DNA重组的类型、各自的不同和生物学意义。何谓转座子，转座子有哪些类型，研究转座重组有哪些意义？转座效应的意义有哪些？1）转座引起插入突变；（2）转座产生新的基因；（3）转座产生的染色体畸变；（4）转座引起生物的进化何谓同源重组？同源重组的特点和机制。同源重组是指发生在非姐妹染色单体之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组的特点和机制：染色体具备哪些作为遗传物质的特征？分子结构相对稳定;能够自我复制，使亲、子代之间保持连续性；能够指导蛋白质的合成，从而控制整个生命过程：能够产生可遗传的变异。比较真核生物与原核生物DNA特征。答：（1）原核生物的DNA结构简练。原核DNA分子的大部分是用来编码蛋白质的，只有非常小的一部分不转录，这与真核细胞DNA冗余现象完全不同。不转录的DNA通常是控制基因表达的序列。.（2）原核生物存在转录单元。原核生物DNA序列中功能相关的基因（RNA和蛋白质基因），往往丛集在基因组的个或几个特定部位，形成功能单位或转录单元，它们可被一起转录为含多个mRNA的分子，叫多顺反子mRNA，受同一操纵基因调控。原核基因是多顺反子结构，是连续的，而真核生物为单顺反子。（3）原核生物的DNA有重叠基因。主要有三种情况:①一个基因完全在另一个基因里面;②部分重叠;③两个基因只有一个碱基对是重叠的。尽管这些重叠基因的DNA序列大致相同;但由于基因重叠部位一个碱基的变化可能影响后续肽链的全部序列，从而编码完全不同的蛋白质，而真核生物多为断裂基因。细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？错配修复，切除修复（碱基切除修复、核苷酸切除修复），同源重组修复和非同源末端连接，DNA的直接修复，跨损伤合成，S0S修复系统。专题三中心法则、名词解释1．编码和读码：DNA有意义链：与mRNA序列相同的DNA链称为编码链或称有义链。反意义链：把另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链或称反义链。DNA正链和负链：将碱基序列与mRNA相同的链定义为正链，将碱基序列与mRNA互补的核酸单链定为负链。启动子：是一段位于结构基因5'端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性，对于基因转录起始是所必需，是基因表达调控的上游顺式作用元件之一。增强子：能够强化转录起始的序列，也称为强化子。他们不是启动子的一部分，但能够增强或促进转录的开始。强终止子和弱终止子：终止子有强、弱之分，强终止子含有反向重复顺序，可形成茎环结构，其后面为polyT结构，富含GC,无需终止蛋白参与即可以使转录终止。弱终止子也有反向重复序列，但无polyT结构，GC少，需要有终止蛋白参与才能使转录终止。足迹法：又称足印法(footprinting)是一种用来测定DNA-蛋白质专一性结合部位及DNA具体序列的方法。hnRNA:核不均一RNA,即mRNA的前体，经过5'加“帽”和3'酶切加多聚腺苷酸，再经过RNA的剪接，编码蛋白质的外显子部分就连接成为一个连续的可译框，作为蛋白质合成的模板。SnRNA:核内小分子RNA,真核细胞核内富含尿嘧啶的小分子RNA,共有U1〜U10十种。常与蛋白质结合形成小分子细胞核内核蛋白颗粒(snRNP)，参与mRNA的剪接加工。mRNA前体剪接：从mRNA前体分子中切除被称为内含子的非编码区，并使基因中被称为外显子的编码区拼接形成成熟mRNA的过程。mRNA的修饰：外显子(exon)：是真核生物基因的一部分，它在剪接后仍会被保存下来，并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。内含子(intron):是一个基因非编码DNA片段，它分开相邻的外显子，内含子是阻挡基因线性表达的序列。阅读：阅读框：阅读框是基因序列中的一段无终止序列打断的碱基序列，可编码相应的蛋白。ORF：开放阅读框是由始于起始密码子并终于终止密码子的一串密码子组成的核苷酸序列。核糖体结合技术：核糖体：是普遍存在于各类细胞中的无被膜的颗粒结构,为细胞合成蛋白质的重要场所。多核糖体：在蛋白质合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合，同时合成若干条蛋白质多肽链，结合在同一条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体(polysome或polyribosomes).分子伴侣：细胞中一类能够识别并结合到不完全折叠或装配的蛋白质上以帮助这些多肽正确折叠、转运或防止他们聚集的蛋白质，其本身不参与最终产物的形成。密码子的通用性：无论原核细胞还是真核细胞,它们使用的遗传密码都是一样的。密码子的例外：无义突变:在DNA序列中任何导致编码氨基酸的三联密码子转变为终止密码子的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能或无意义的多肽。错义突变:由于结构基因中某个核苷酸变化使一种氨基酸的密码变成另一种氨基酸的密码。信号肽：在起始密码子后，有一段编码疏水性氨基酸序列的RNA区域，该氨基酸序列就被称为信号肽序列，它负责把蛋白质导引到细胞含不同膜结构的亚细胞器内。导肽：(leadingpeptide)又称导向序列(targetingsequence)，它是游离核糖体上合成的蛋白质的N-端信号。pribnnowbox:在细菌启动子结构中，从起点上游约-10处找到6bp的保守区域,其保守序列为TATAAT。SD序列：称“核糖体结合位点Shine-Dalgarno序列”mRNA起始部位的一段特殊核苷酸序列;是核糖体在mRNA上的结合位点。RNA编辑：指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。具体指基因转录产生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失,插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息现象。密码子的简并性：分子生物学中,同一种氨基酸具有两个或更多个密码子的现象称为密码子的简并性(degeneracy)密码子的偏爱性：有些氨基酸会有多个密码子，在进行蛋白质合成过程中，并不是所有的负载tRNA都能和mRNA互补结合运载氨基酸，而是这些tRNA中的几个会参与蛋白质的合成过程。二、单项选择题一段mRNA的序列是：5'-AUGCCGAUUCGCGAU-3'。指导这一段mRNA合成的DNA双链中，编码链是：()A、5‘-AUGCCGAUUCGCGAU-3'B、5‘-TAGCGCTTAGCCGTA-3'C、5‘-ATCGCGAATCGGCAT-3'D、5‘-ATGCCGATTCGCGAT-3'Nirenberg在遗传密码的破译中，使用了核糖体结合技术，在这项技术中的体外翻译体系不包括下列哪一项:A.人工合成的三核苷酸B.核糖体C.RNA聚合酶D.氨酰tRNA下列抗生素中既能抑制细菌生长，又能抑制真核生物生长的是()。A.青霉素B.四环素C.红霉素D.氯霉素TOC\o"1-5"\h\zmRNAisproducedby()A、replicationB、duplicationC、transcriptionD、translation4.转录需要的原料是：()A.dNTPB.dNDPC.dNMPD.NTPE.NMPtRNA能够成为氨基酸的转运体、是因为其分子上有()A.-CCA-OH3’末端B.3个核苷酸为一组的结构C.稀有碱基D.反密码环需要以RNA为引物的过程是A、复制B、转录C、逆转录D、翻译下列叙述中，哪一种是错误的A、真核细胞的转录是在细胞核中进行的B、线粒体和叶绿体内也可进行转录C、合成mRNA和tRNA的酶位于核质中D、原核细胞的RNA聚合酶存在于细胞核中参与转录的酶是A、依赖DNA的RNA聚合酶B、依赖RNA的RNA聚合酶C、依赖DNA的DNA聚合酶D、依赖RNA的DNA聚合酶启动子是A、基因起始所必需的一段RNA序列B、基因转录起始所必需的一段DNA序列C、基因转录起始所必需的一段cDNA序列D、基因转录起始所必需的一段氨基酸序列原核生物RNA聚合酶与启动子的相互作用包括A、启动子区的识别B、酶与启动子的结合C、。因子的结合与解离D、P因子的结合原核生物的-35序列A、有利于DNA局部解链B、与聚合酶对启动子的特异性识别有关C、又称Pribnow框D、保守序列为TTGACA三、填空题mRNA的英文全称为—messengerRNA。分子生物学中，把与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链,把另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA合成的链称为模板链。核糖体上有3个tRNA结合位点，分别为A位点，P位点，E位点，它们是_；和的结合位点。新生肽链每增加一个氨基酸单位都要经过进位，成肽和转位三步反应。TOC\o"1-5"\h\z真核生物的mRNA加工过程中,5'端加上，在3'端加上。现已发现大肠杆菌中存在DNA聚合酶I、II、III，其中是大肠杆菌DNA复制中链延长反应的主导聚合酶。真核生物的mRNA加工过程中,5'端加上，在3'端加上。翻译的时候肽链延伸的方向总是，而阅读mRNA模板的方向总是。原核生物和真核生物在翻译的时候第一个被掺入的氨基酸分别是—和。四、简答与论述题1．简述RNA前体的剪切（剪切位点有何特征、剪切机制、核酶、剪切特异性的意义）简述核酶的特征。举例说明三种RNA前体的剪切和成熟过程。？说明真核生物mRNA前体特异性剪接的机制及研究方法。？分别说明tRNA、rRNA和mRNA前体加工包括哪些内容？简述遗传密码表的特点几其生物学意义在分子生物学研究中，了解某一生物的偏爱密码子有重要意义，试说明。GUG是Vai的密码子，但有时也可作为起始密码子,说明其作为起始密码子和内部密码子在功能上有何不同。何谓抑制基因突变？有哪些类型？各自的生物学效应。说明影响mRNA寿命的因素有哪些？蛋白质合成后成熟和易位包含哪些内容和相应的机制（折叠—修饰—易位、分泌）？简述mRNA指导合成肽链的机制。蛋白质合成后加工包括那些机制，试就核定位、叶绿体和线粒体定位、溶酶体定位和膜定位蛋白的成熟、加工过程加以说明。保证翻译和准确形成有功能蛋白质的机制有哪些？简述原核生物和真核生物mRNA的区别。简述RNA的种类及其生物学作用。原核生物与真核生物基因的转录有哪些差异？专题四基因表达调控一、名词解释1．操纵子和操纵基因2.组成型合成和组成性蛋白3.衰减子与增强子4.强启动子与弱启动子5.顺式作用元件和反式作用因子；6.基础转录因子和上游转录因子；7.DNA结合结构域和活性结构域；8.同源异型域和同源异型基因；9.应答元件；10.螺旋-环-螺旋和螺旋-转角-螺旋；11.增强子和沉默子；12.启动子和增强子；转录本和转录因子；13.RNA编辑和RNA剪切；14.持家基因和奢侈基因15.miRNA16.乳糖操纵子17.色氨酸操纵子二、单项选择题原核生物的基因调控主要发生在（）。A.转录水平B.翻译水平C.转录后水平D.DNA水平原核生物与真核生物转录调控有如下异同（）。原核生物有启动子，真核生物没有两者的RNA聚合酶相同两者的调控方式相同，都以正调控为主在真核生物中已发现很多蛋白质因子是参与转录调控的真核生物基因组中没有（）。内含子B.外显子C.操纵子D.高度重复序列下列化合物中，哪些能结合到乳糖操纵子的启动子附近的DNA上，促进RNA聚合酶的转录：（）A、诱导物B、cAMP-CRPC、激活剂D、ATP色氨酸操纵子的调控作用受两个独立系统的控制。其中一个需要前导肽的翻译。下面哪个调控这个系统？（）A、色氨酸B、cAMPC、色氨酸-tRNAtrpD、以上都不是三、填空题转录因子通常具有特定的结构域分别与DNA或其他调节蛋白相互作用,这些结构域包括转录因子通常具有特定的结构域分别与DNA或其他调节蛋白相互作用，这些结构域包括_、_及—结构域。原核生物基因表达的“默认”状态是___,因此基因表达调控的方式主要是___；而真核生物基因表达的“默认”状态是___,故其基因表达调控的方式主要是___。操纵子一般由___、___和___三种成分组成。参与基因表达调控的调节蛋白分类___和___两种,操纵子上与调节蛋白结合的核苷酸序列通常称为___,在正调控中起作用的是___。大肠杆菌的乳糖操纵子表达受到___和___两种机制的调节,而色氨酸操纵子受到___和___两种机制的调控。四、判断题原核细胞和真核细胞的基因表达调控的主要水平都是转录。操纵子结构并不是原核细胞特有的。某些蛋白持不仅可以作为阻遏蛋白还可以作为激活蛋白参与基因表达的调控。转录因子都具有与DNA结合的模体结构。真核细胞核的三种RNA聚合酶负责的基因转录都受到增强子的调节。调节基因一般都位于操纵子的附近,这种构造有利于调节基因对操纵子的控制。五、简答与论述题设计实验证明某一突变是调节基因突变或操纵基因突变简述lac操纵子的正负调控。说明gal操纵子的特点。说明ara操纵子和其调控蛋白C的操纵子的正负调节。说明葡萄糖对糖利用型操纵子的调节。说明色氨酸操纵子的正负调节。简述氨基酸合成型操纵子的共同特点。说明半乳糖操纵子有两个启动子的调控意义。转录水平调控是生物基因表达调控的主要机制,这一水平调节是否是唯一的途径。真核生物基因表达调控的不同层次。试述真核生物DNA水平调控与遗传稳定性的关系。（DNA扩增，基因丢失，基因修饰，基因重排）什么叫基因沉默（现象,实验）,引起基因沉默的原因有哪些？

简述转录因子的DNA结合结构域和活性结构域的结构特点。说明上游元件形式的多样性对真核表达调控的意义。什么叫应答元件，证明其特点和作用原理。说明真核中多种蛋白因子（转录因子）对基因特异性表达的意义。简述转录水平调节和转录后调节。在生物中存在一个基因可编码（表达出）多种蛋白的原因（转录水平剪切，可变剪切和翻译剪切）。举例说明mRNA前体剪切的意义和机制。说明基因序列变异但功能未变的可能原因简述真核生物基因表达调控的不同层次。从基因和蛋白质数量及互作说明真核生物基因表达调控的复杂性。人类基因组计划原预计人类至少可能有10万个基因，但全序列测定后发现仅有3万个，甚至比某些两栖类基因组还小，你能否就此作出解释。分子生物学与你所学专业有什么关系，请具体说明。简述乳糖操纵子模型。专题五分子生物学研究方法一、名词解释基因组文库：是由一种生物的所有基因组DNA构建而成的。转录组：广义上指某一生理条件下，细胞内所有转录产物的集合，包括信使RNA、核糖体RNA、转运RNA及非编码RNA；狭义上指所有mRNA的集合RNAi技术：cDNA文库5.acomplementation6.cosmid7.YAC8.基因治疗9.基因敲除10.噬菌体展示DNA芯片12.酵母双杂交13.蛋白质工程14.cDNA末端快速扩增15.SNP16.RNA干扰17.基因组编辑二、单项选择题下列实验证据中，哪一项不能说明染色质中的DNA与蛋白质分子是相互作用的（）。A．DNA的Tm值比自由DNA高DNA酶I对染色质DNA的消化远远慢于对纯DNA的作用DNA的Tm值比自由DNA低在染色质状态下，由DNA聚合酶和RNA聚合酶催化的DNA复制和转录活性大低于在自由DNA中的反应从提取的动物总RNA中纯化与富集mRNA常使用结合在磁珠上的（）。A.polyA.B.poly(T)C.polyC.D.poly(U)A.polyA.B.poly(T)C.polyC.D.poly(U)）。在聚合酶链式反应中，除了需要模板DNA外，还必须加入）。A.DNA聚合酶B.dNDPC.RNA引物D.Mn2+下列哪项技术不能应用于蛋白-蛋白相互作用（）A、酵母双杂交B、FRETC、RNA-seqD、免疫共沉淀原位杂交：（）是一种标记DNA与整个染色体杂交并且发生杂交的区域可通过显微观察的技术表明卫星DNA散布于染色体的常染色质区揭示卫星DM位于染色体着丝粒处PCR实验不需要的成分是：（）A.RNA引物B.耐热的DNA聚合酶C.DNA模板D.dNTP不能作为DNA变性的指标是：（）A、增色效应B、浮力密度升高C、黏度下降D、生物功能丧失E、解链没有引物，DNA聚合酶不能复制DNA，这是因为：（）A、DNA聚合酶需要单链DNA模板B、没有引物，DNA聚合酶3'外切酶活性太高C、所有RNA聚合酶和DNA聚合酶需要引物提代游离的3'羟基D、需要引物装配好滑动钳结构E、需要引物解开DNA双链，以暴露模板链有人在研究一种新的限制性内切酶，其识别的碱基序列是GCGCNNNNNGCGC。如果这种酶消化鼠的基因组DNA，得到的消化产物的平均大小约是：（）A、250bpB、1kbC、4kbD、64kbDNA的浓度和纯度可以通过测定其OD280和OD260来判断。OD260/OD280低于1.8，表示：（）A、DNA纯度较好B、DNA有降解C、DNA样品中有蛋白或酚污染D、DNA浓度较低在DNA提取中，破碎细胞后用苯酚和氯仿分离各种细胞组分，溶解在水相中的主要是：（）A、蛋白质B、糖类C、酚类D、DNA顺反子的概念与下面哪个名词最接近：：（）A、操纵子B、基因C、调节子D、多聚核苷酸PCR实验不需要的是：（）A、RNA引物B、耐热的DNA聚合酶C、DNA模板D、dNTPE、变性和复性循环如果要用PCR扩增以下DNA模板中的基因1,需要的一对引物序列是：（）5'CTTCGAAATTC—(基因1)-TCTCCCGATCGG-基因2)-AAGATCAAATCCTTTGCTCT3A、正向引物是TTCGAAATTC,反向引物是GATCGGGAGAB、正向引物是CCTTTGCTCT，反向弓I物是TCCCGATCGGC、正向引物是GAATTTCGAA,反向引物是TCTCCCGATCD、正向引物是GATCGGGAGA,反向引物是TTCGAAATTCE、正向引物是TCTCCCGATC,反向引物是GAATTTCGAA实时定量PCR与常规的定量PCR之间的差别在于：()A、实时PCR使用凝胶电泳的手段确定扩增产物水平B、常规定量PCR不能定量C、实时PCR不使用凝胶电泳D、实时PCR使用荧光染料，而常规的定量PCR不使用如果制备插入片段平均大小为20kb的E.coli的基因组文库，其基因组大小为4.6X106,那么，要达到高于99%的可能性从文库中获得一个特定克隆所需要的最低克隆数目是：()A、110B、1100C、10000D、20000酵母单杂交技术可以用于以下哪项研究：()A、DNA与DNA之间的相互作用B、蛋白质与蛋白质之间的相互作用C、蛋白质与DNA之间的相互作用D、蛋白质与RNA之间的相互作用如果DNA模板的序列为5'-AGCTAGGCT-3；该模板转录产生的RNA序列为：A、5'-AGCCTAGCT-3'B、5'-TAGGATCGA-3'C、5'-AGCCUAGCU-3'D、5'-UAGGAUCGA-3下列技术中，可以将变异遗传给下一代的动物中的是A、基因组文库构建B、RNA测序C、基因敲除D、基因组编辑三、填空题人们常通过检测DNA溶液的紫外吸光度监控DNA的变性过程，吸光度增加到最大值一半时的温度称为DN