白血病分子诊疗

分子生物学

在白血病中的应用2016-3-8融合基因实验室一、白血病相关基因改变的常见类型融合基因基因突变基因表达异常1.融合基因：

所谓融合基因，是指将两个或多个基因的编码区首尾相连．置于同一套调控序列（包括启动子、增

强子、核糖体结合序列、终止子等）控制之下，构成的嵌合基因。

概念Chr9Chr22ABLBCRBCR-ABL融合基因2.基因突变：

错义突变（点突变）插入突变缺失突变移码突变错义突变（点突变）：

DNA分子中一个碱基对被另一个不同的碱基对取代所引起的突变。

如：JAK2V617FJAK2基因

mRNA水平（cDNA水平）：第1849位点G突变为T蛋白水平：第617位氨基酸位点由缬氨酸（V）突变为笨丙氨酸（F）插入突变：较长片段的DNA的插入而发生突变，但不改变阅读框

如：NOTCH1H1590-L1592insFGPNOTCH1基因

mRNA水平（cDNA水平）：c.47754776ins(TGGGCC)

蛋白水平：H1590-L1592insFGP缺失突变：较长片段的DNA的缺失而发生突变，但不改变阅读框

如：JAK2N542-E543del

JAK2基因

mRNA水平（cDNA水平）：c.1624-1629del6bp

蛋白水平：N542-E543缺失N、E氨基酸

移码突变：DNA片段中某一位点插入或丢失一个或几个（非3或3的倍数碱基对时，造成插入或丢失位点以后的一系列编码顺序发生错位的一种突变。

如：CALRL367fs(46)突变CALR基因

mRNA水平（cDNA水平）：c.1179_1230del52bp

蛋白水平：第367位氨基酸（亮氨酸）位点发生移码，在367位点起后的46位氨基酸终止。癌基因或抑癌基因表达异常如：WT1定量3、基因表达异常二、白血病基因检测的临床意义1、辅助诊断2、指导治疗3、评估预后4、微小病变残留检测三、白血病相关基因分类BCR-ABLFLT3-ITDJAK2V617FC-KIT……PML-RARaNPM1RUNX1AML1-ETO……DNMT3ATET2ASXL1/ASXL2IDH1/IDH2……SF3B1SRSF2U2AF1……

Class1

增殖Class2分化Class3

表观遗传Class4

剪切因子四、白血病相关常见基因AMLCMLMPNALLCLLMDSAML相关基因异常融合基因：1、

PML-RARa:95%AML-M3分为三型L型、S型、V型

PLZF-RARaNPM1-RARa2、

AML1-ETO:40%AML-M2(主要为M2b)3、

CBFβ-MYH11：90%AML-M4Eo4、

MLL-AF17

MLL-AF6AML-M4/M5

MLL-AF9AML相关基因异常基因突变：FLT3-ITDNPM1（A/B/D型）c-KitIDH1IDH2ASXL2NRASKRASP53DNMT3A基因定量分析：WT1定量FLT3-ITD：AML-M3中发生频率较高c-Kit：50%AML1-ETO阳性AMLCBFβ-MYH11阳性AMLASXL2：AML1-ETO阳性AMLCML相关基因异常BCR-ABL:95%CMLCML特异marker

亚型：

cDNAProtein

b3a2、b2a2型P210e19a2型P230e1a2型P190MPN相关基因异常PV、ET、PMF的诊断BCR-ABL排除早期慢粒PV:JAK2V617F