分子生物学 第五章 翻译

第五章蛋白质的合成，转运和加工第一节氨基酰-tRNA的形成及核糖体的作用位点一.氨基酰tRNA分子的形成氨基酸的活化活化：

aa+ATP+E*氨基酰-AMP-E+PPi

转移：氨基酰-AMP-E+tRNAaa-tRNA+AMP+E二．氨酰tRNA合成酶的鉴别功能动力学校对（Kineticprofreading）化学校对（Chemicalproofreading）三核糖体的作用位点⑴A位点（或称acceptorsite）可以进入氨基酰-tRNA(aminoacyl-tRNA)。⑵P位点(或称供位，donorsite)是被肽基酰-tRNA(peptidyl-tRNA)所占据。(3)E位点(Exitsite)脱酰tRNA(deacylated-tRNA)短暂地占据。第二节肽链的合成一.在细菌中翻译的起始⑴IF-3是30S亚基与mRNA起始位点的特异结合所必须的。⑵IF-2是特异地和起始tRNA结合并把它带到起始复合体中。⑶IF-1仅作为完整的起始复合物的一部分,与30S亚基结合。它结合在A位能阻止氨酰tRNA的进入。它的定位还阻止30S和50S的结合。2.起始复合物的形成(1)IF-3和核糖体30SrRNA结合使16SRNA和mRNA的S-D顺序结合a.使30S保持游离b.形成起始复合体I(2)IF-2+GTP+氨酰甲硫氨酸中间复合体。

(3)50S+30S复合体III，释放IF-1,IF-2。原核生物翻译起始因子二.起始tRNA的特点翻译时的第一个密码子是怎样被识别的呢？(一)小亚基上16SrRNA3′端的六核苷酸(3′-UCCUCC-5′）和Shine-Dalgarno顺序（5′-AAACAGGAGG-3′）互补，相互结合，使下游的AUG起始密码子定位在P位上。(二)核糖体结合位点也含有一个信号起始密码子（initiationcodon）－AUG。起始和延伸Met-tRNAs的区别⑴两种tRNA本身有差别；⑵氨基酸的状态不同。fMet-tRNA与Met-tRNA有什么不同？⑴Met-tRNAmMet在受体臂末端的一对碱基是GC，在fMet-tRNAfMet是CA，C可以和起始因子IF-2结合。⑵tRNAfMet在反密码子环的茎上有3对G-C,若发生突变将会阻止其进入P位点。⑶tRNAfMet的反密码子环上的是A，tRNAmMet是烷基化腺嘌呤。tRNAfMetTψC环端是A，tRNAmMet的相应位置是G，作用不清。三真核生物蛋白质合成的起始

四.起始时mRNA和rRNA的碱基配对(一)原核30S小亚基和S-D顺序的结合在细菌中被核糖体保护的DNA区域长35-40碱基长。有2个共同的特点:⑴含有起始密码子AUG；⑵有一个顺序和16SrRNA近3

端的顺序互补。(二)真核合成起始时小亚基和

起始位点的结合真核细胞质中的核糖体并不在编码区开始处直接和起始位点相结合。首先识别5

端甲基化的帽子结构。内部核糖体进入位点(internalribosomeentrysite,IERS)A最适合的邻接顺序是GCCCCAUGGG称为Kozak顺序第二节肽链合成的延伸和终止一肽链合成的延伸肽链的