人绒毛膜促性腺激素测定SOP

1检测原理HCG检测方法是根据“夹心”原理建立的两步法酶免疫分析法。样本与包被CGa-亚单位特异性单克隆抗体的二氧化铬颗粒孵育，颗粒磁化分离，除去上清液。第二步，颗粒hCG复合物与共轭试剂(B-半乳糖苷酶标记的特异,性hCGB-亚单位的单克隆抗体))孵育形成颗粒/hCG/共轭物夹心。磁化分离未结合的共轭物，洗涤。夹心结合的B-半乳糖苷酶与发色底物氯酚红-B-半乳糖苷酯(CPRG)结合，催化底物水解形成氯酚红(CPR)。病人样本中hCG的浓度与因CPR形成而引起的在577/700nm测定的颜色变化成正比。hCG+CrO-Ab ►CrO-Ab-hCG+CrO-Ab222CrO-Ab-hCG+CrO-Ab CrO-Ab-hCG-F(ab‘)-B-gal+CrO-Ab22 222+F(ab')2-B-半乳糖苷酶 +F(ab')2-B-半乳糖苷酶CrO-Ab-hCG-F(abz)-B-gal+洗涤 CrO-Ab-hCG-F(abz)-B-gal+22.22CrO-Ab+F(ab')-B-半乳糖苷酶 CrO-Ab(转移到比色管)222CPRG(在577nm处不吸收) CrO-Ab-hCG-F(abz)-B-galCPR(在577nm处吸收)222标本采集与处理2.1采血方法不抗凝静脉血2〜3ml。2.2标本保存室温保存，及时送检和检测。在2-8°C下可冷藏保存48h，若不在48h内检测样品，应将样品在-20C下冷冻保存。只能冷冻样品一次，并在样品融化后充分混匀。2.3注意事项推荐选用血清。收集的血液中存在草酸盐可引起铬颗粒聚集，不应使用。抗凝剂不足的冷冻血浆样本可能引起个颗粒聚集，不应使用。标本应避免严重脂血、溶血。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~2孔为hCGAb-B-半乳糖苷酶，液体；3〜4孔为抗体-CrO2O.75mg/ml,片剂；4〜6孔为CPRG23.6mM，片剂；7孔为底物稀释液缓冲液175mM,液体；8孔为铬稀释缓冲液105mM,液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2〜8°C保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD质控液。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500〜3000r/min,离心6〜lOmin,分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏与2-8C的冰箱内。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在PatientName处选择性输入病人名字，按enter,在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存页码：第页共页直接使用，2〜8°C保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PR0CESSCTRL-F1:CALIBRATION，按enter-F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN-F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为1〜1000mIU/mL,对于超过测定线性范围的结果，用样本稀释液进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间未妊娠女性：0〜6mIU/mL成年男性：0〜62mIU/mL妊娠期：0.2-1周5〜50mIU/mL1-2周50~500mIU/mL2-3周100〜5000mIU/