【生化分析仪交叉污染的原因与解决方案7400字】

生化分析仪交叉污染的原因与解决方案目录TOC\o"1-3"\h\u15194摘要： 1281861.引言 250752.实验材料 252892.1仪器 2308032.2生化试剂盒 397932.3校准品. 3121332.4质控品 3169292.5人血清 327232.6清洗剂 4198223实验方法 453213.1试剂交叉携带污染的测试、评估方案 485653.11试剂交叉携带污染的测试方案 4239153.1.2确定携带污染的判定标准 494823.2试剂盒交叉携带污染的解决方案 5141643.2.1合理设置试验项目的测试顺序 5291703.2.2设置特殊的清洗程序 599393.3新标准及特殊清洗方法的普适性评价 6282734结果与讨论 6265004.1试剂交叉污染结果的评估 6175254.2试剂盒交叉携带污染解决方案的评估 8279934.3新标准及特殊的清洗方法的普适性评价结果 10109995结论 118942参考文献 111.引言临床生物检验通过对人体体液等检查掌握体内关键生物参数指标,可以为医师治疗患者提供有力的检查证据。检测结果需要保持极高的可信度、准确度,可以提高患者的临床有效治疗和合理诊断叫。全自动生化分析仪是生物指标分析的必备仪表,在世界各类医院中广泛应用。但怎样进一步提高检测的准确性、精密度和灵敏率,已变成当今必须克服的重大问题。因为全自动生化仪在分析的过程中必须完成对多个项目或多样本的高速数据处理,而且仪表还设计了与样品针头、试剂针、比色杯、搅拌棍等共同的机械操作部门,这样,各个服务项目的试剂及样品残留对另一个服务项目产生了不好负面影响,就很易于产生交叉环境污染,而且与试剂针相互交叉带来环境污染的产生机率很大的啊。对于评价仪器的交叉污染率,有一个相关工作在研究中八十三期认识到了交叉污染的复杂情形:如对试剂成份之间的直接影响,如上一个检测项目中使用试剂的残留存在,对下一种检测试剂中有负面影响的成份;试剂成份间的转弯抹角影响结果,即上一目的检测项目中剩余的测定试剂成份对下一目的底物有影响,造成结果时很难对测试结果进行评估。所以,设计一套合理普适的携带污染评价系统与方法,必不可少。另外,在生化.检查实验中可以发现,检验试剂之间的交叉污染现象也具有相当的隐藏性,如Mg在IG、CK、AMY检查时会出现交叉污染,致使检测值偏高,可以使医师误诊为该病人出现了肾脏病变,而在独立检测时检测值仍然是很正常的",因此测试人员用常规的Westgard多规则控制时,不容易出现问题四。这会严重影响生化检查的最后结论,进而影响临床医师对患儿疾病的评估,并造成更严重的结果。但是,在过去关于化学试剂间污染的隐蔽性问题,已经很少有研究成果提及,而且目前还没有看到合理的评价标准。本研制用雅培c16000全自动生物分析仪,经过设计以合理普适的携带污染检测实验方式,对试验中生试药的交叉污染状况做出评估,并给出了有效处理污染隐蔽化问题的方法,能在很大程度降低了环境污染所造成的结果错误观点问题,从而进一步提高了检验结论的准确度,为疾病的有效检测与处理提供了保证,同时也为厂家进一步提高仪器性能提出了有利的借鉴。2.实验材料2.1仪器雅培全自动生化分析仪c16000。2.2生化试剂盒选择在医院的常规检查项目中,如肾病、肝病、血糖、心脏疾病等检查项目中,一般采用的中生31套IVD检测试剂盒:丙氨酸氨基转移酶检查试剂盒方法(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒(AST)、乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH)、肌酸激酶检测试剂盒(CK)、γ-谷氨酰基转移酶检测试剂盒(GGT)、碱性磷酸酶检测试剂盒(ALP)、淀粉酶检测试剂盒(AMY)、甘油检测试剂盒(IG)、胆固醇检测试剂盒(CHO)、葡萄糖(抗氧化酶法)检测试剂盒(G1uHK)、葡萄糖(已糖激酶法)检查试药盒(G1uGOD)、总胆红素检测试剂盒方法(I.Bi1i)、直接胆红素检测试剂盒(D.Bi1i)、肌酐(苦味酸法)检验反应试剂盒(Cre苦味酸法)、肌酐(肌氨酸氧化分解酶法)检验反应试剂盒(Cre酶法)、血清尿素检验反应试剂盒(UreA)、尿酸检验反应试剂盒(UA)、白蛋白检验反应试剂盒(a1b)、总蛋白质检验反应试剂盒(IP)、铁检验反应试剂盒(Iron)、无机磷检验反应试剂盒(IP)、钙检验反应试剂盒(Ca)、镁检验反应试剂盒(MG)、高密度脂蛋白胆固醇检验反应试剂盒(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇检验反应试剂盒(LDL)、二氧化碳检验反应试剂盒(CO,)、免疫球蛋白g检验反应试剂盒(IgG)、腺苷脱氨酶检验反应试剂盒(ADA)、总胆汁酸检验反应试剂盒(IBA)、肌酸激酶MB同工酶检测试剂盒方法(CK-MB)、a-羟丁酸脱氢酶检测试剂盒方法(HBDH)。2.3校准品.中生生化多项校准品，批号:120031;中生DHDL-C(清除法)校准品，批号:110111;中生DLDL-C(清除法)校准品，批号:110121;中生C02(酶终点法)校准品，批号:110811;中生ADA(酶动力学法)校准品，批号:120271;中生IBA(酶循环法)校准品，批号:110292;KimiyaIgG(透射比浊法)校准品，批号:A206.2.4质控品中生生化多项质量控制品,批号:120041;中日本生积水医疗DHDL-C和DLDL-C质量控制品,批号:823RKI;中生C02(酶终点法)质量控制品,批号:120872;中生ADA(酶动力学法)质量控制品,批号:120271;朗道IBA(酶循环法)质量控制品,批号:729UN;KimiyaIgG(透射比浊法)质量控制晶,批号:H192;罗氏质量控制品,批号:168309.2.5人血清人血清由北京昌平区医院提供。2.6清洗剂雅培原装酸性清洗剂(Acid)、碱性清洗剂(Alkaline)、清洗剂A(DA)、清洗剂B(DB)、水浴添加剂。3实验方法3.1试剂交叉携带污染的测试、评估方案3.11试剂交叉携带污染的测试方案将中生的三十一种试剂盒进行二十二混合。因为每一个试药作为受者或供者对检测结果的影响不同,如受者a与供者b结合和受者b与供者a结合所得的交叉污染检测结果也可能有所不同,所以,把每个检测试剂盒或当作受者进行混合检测,或当作供者进行混合检测,共计九百三十个组合。每个检测试剂盒对另一个检测试剂盒的交叉携带污染测试程序"1如表3-1给出。表3-1试剂交叉携带污染测试程序备注:"*"为受者被干扰的试剂盒,"△"为提供者干扰试剂盒对这九百三十个组合,每对组合按表一的序号一负五顺序进行了检测,并循环五遍,则每对组合总共检测了二十五遍。九百三十个组合中共测试23250个。3.1.2确定携带污染的判定标准已有广泛使用的携带污染的判定标准为:|污染率|≥5%为有携带污染，|污染率|<5%为可接受实验。污染率计算公式:已有且广泛采用的对携带污染物的评价准则是:|污染率|≥百分之五即为有带污染物,|污染率|<百分之五则可进行试验。污染值(%)=C-Cr100%其式2-1中C,为接触者携带污染物后的检测值:C,为接受者的靶值。而由实测数据可以看出,当某些项目中,如:接受者-提供者依次是IP-G1uGOD、A1b-CA、TP-CO等,时,它的污染概率依次为-百分之二点六零、2.08%、4.55%。虽然上述综合得出的|污染物率|<百分之五,然而,与《现代临床生化检查常规项目分析质量指数》"一样,上述综合还是直接产生或相互交叉携带污染物的。这就意味着,基于常规的携带污染物判断准则,尽管某些试剂组成的|污染物量|值低于百分之五,但它们之间也可以形成交错携带污染物,这就是现有的研究成果中极少提及的现象,且缺乏合理的诊断准则.而根据传统的污染物诊断准则,这种试剂之间的污染物存在着隐秘性。由于交错携带污染物造成了检测结果的不正确,会导致对临床诊断治疗的错误观点,并最后给病人生命带来了严重威胁。考虑到系统-如果使用了|环境污染率|≥百分之五这-常规准则时,会完全忽视了上面所介绍的环境污染状况,所以,在|环境污染率|<百分之五的情形下,就需要其它准则来进行并作出评估。为此,论文中给出了对环境污染量判别的新规范:当|环境污染量|≥百分之五且接受者的精密度为(CV)≤百分之五时即可判别形成环境污染;|环境污染率|<百分之五时,需根据《现代临床生化检测常规项目综合分析质量指数》判别。3.2试剂盒交叉携带污染的解决方案3.2.1合理设置试验项目的测试顺序在试验操作过程中,可以看到测定试剂盒的开盖稳定性对试验结果负面影响较大。例如:用Mg检测试剂盒方法开盖的稳定性十二天,在开盖满十三天后的测量值比第一天测量值偏差-百分之五。所以,考虑到试药的开盖稳定程度差异,必须按照试药稳定程度的持续时间由短至长设置检测次序,使稳定程度持续时间较短的试药优先检测,才能减少试药稳定程度对试验结果的负面影响。同时利用试药交叉带污染试验方法,摸索出了测定试剂之间的干扰状况。利用在交叉污染的测定试剂盒之间加入非干扰项的检测试剂盒,来降低交叉带污染。另外,c16000仪器中有二个试剂仓,依次是R一仓和R2仓,每仓又包括了内圈和外环。每个试剂仓装有二根针头,分开作用于其内外圈的检测试剂。但考虑到已有大量研究表明药物试剂用针带入药物试剂时会对检测试剂盒形成交叉带污染",因此建议在检测试剂带污时将可能有污染的检测试剂组分开置于试剂仓的内外圈上,以降低对检测试剂盒的交叉带污染。3.2.2设置特殊的清洗程序首先筛选可以减少携带污染物的清洁剂。传统上要根据样品中化学污染物的种类,以及雅培清洗剂的种类选用截然不同的清洁剂。如用"酸去金属离子及其盐、碱去蛋白、胶乳粒子、粘性物质与相似相容原理"的洗涤基本原则,可以正确选用洗涤剂。但考虑到医院或临床常规生化检查的试剂品种很多而且材料繁杂,在操作时并负不可能充分了解各种试剂的特点。为减少耗费大量时间去检查实验试剂的性质,浪费时间,甚至对实验试剂特性判定有误所带来的环境污染,而造成检测结果不正确,因此结合仪器设备的常规清洁常采用Acid和DA清洗剂,对实验试剂之间的相互交叉带来环境污染也有相应减少的效果,但有时候常规清洁并无法有效地减少交错带来环境污染,因此建议在产生相互交叉带来环境污染的实验试剂组之间增加特殊清洁设备,并选择使用合适的清洁剂。选择方式为先用DA和0.5%Acid冲洗R1,以确定能否去除污染物。如还未能去除污染物,则可再选用10个%DB冲洗R1。如还不能彻底去除污染,则可进一步选择用DA和0.5%Acid同时清除R一和R2。该办法也有助于判断特殊清洁用的清洁剂种类。然后,再决定清洁剂用量和洗涤次数。清洁剂用量的比色杯最大承载量三千四百五十一L,在清洁效果一致的情形下,即清洁后受到的污垢量一致,尽量采用清洁频次为一次的清洁剂,试验证实这样情况可以节省清洁剂,同时又不会明显降低仪器的检测速度。根据以上设定的清洁剂类型、洗涤剂数量和清洁次數,在c一万六千机上安装SmartWash清洁软件,完成清洁。最后证实了上述清洁功能,也是减少了交叉带入污染物的功效。当清洁完毕后,再重复3.1.1的试剂交叉带来污染物的检测步骤,并重新计量污染物率和CV。如果污染物率、CV都不高于交叉污染国家标准,则意味着减少了交错带来的污染物。3.3新标准及特殊清洗方法的普适性评价为考查所提出的水污染诊断的最新标准和特殊的冲洗方式是否有通用性,在日立7180、AU480临床生化测试仪上,对以上标准规定和特殊冲洗方式做出了进一步的检验。4结果与讨论4.1试剂交叉污染结果的评估对九百三十个组成所进行的交错便携污染物测试结果显示,虽然某些试剂组成的|污染物率|<百分之五,但同样也可以形成交错便携污染物。为此,本文给出了对试剂盒中交错便携污染物判定的最新规范。分为以下三种情形加以判定:国际标准一,当|污染物率|≥百分之五时,并且CV≤5%,说明组合式形成了交错便携污染物:国际标准二,当|污染物率|<百分之五且|污染物率|≥容许位移,并且受者的CV≤容许CV,说明组合式也形成了交错便携污染物:国际标准三,当|污染物率|<百分之五且|污染物率|<容许位移,并且受者的CV≤容许CV时,说明组合式并不形成了交错便携污染物。关于交叉携带污染判定的新准则见下表4-1。表4-1交叉携带污染判断新标准当受者CV>5%或受者CV>允许CV时，表明试剂盒或仪器的性能不能满足标准需要，无需进行交叉携带污染测试。允许偏移是指同一实验室用同种方法，在多次独立检验中，分析同一样品所得结果的均值与靶值之间的差异。而允许CV是指同一实验室用同种方法，在多次独立检验中分析同一样品所得结果的离散程度。CV的计算方法见式:式中:sD为受者的标准偏差值:是所有受者的平均值。基于标准一的判断,在九百三十个检测试剂盒组成中出现了交叉携带污染物的组合比例(见表4-2)。上述组合比例均为接受者CV≤百分之五且|污染率|≥百分之五,说明了检测试剂盒之间出现的交叉携带污染物情形。表4-2存在交叉携带污染的组合-1对其他约九百二十个选择,参照标准二作进一步的评价。结果显示,另有五个组成,其中的|污染率|<百分之五,在百分之二~百分之五之间,但由于受者CV≤允许CV,|污染率|≥容许偏移,继续判定为有污染物的组成(见表4-3).表4-3存在交叉携带污染的组合-2表中污染率数值,-百分之三点六零说明IP遭受GluG零D污染后的实际测量值下降,其余2.08%4.55%、百分之二点三一和百分之二点一九则说明A1b、TP遭受污染后的实际监测数值上升。从上述结论可以看出,用标准的污染率≥百分之五作为评估准则,在三十一种试剂盒的九百三十个组合中,有十个组合被评价为存在过交叉携带污染,而按照我们所给出的最新的交叉污染评估准则,共有十五个组合交叉携带污染物。这五个额外发现存在过交叉携带污染物的组合就是.IP-G1uGOD、A1b-Ca、A1b-GGT、TP-C0.和TP-HBDH。以IP-GIuGOD为例,假如以传统标准,则会导致人们忽略了这种污染物的存在。然而用最新的判定准则却表明,G1uGOD对IP产生负面影响(污染率为-百分之三点六)(见表4-2),即该污染物最终会造成IP测值的偏低。另外,按照传统准则来看,也会忽略A1b-CA.A1b-GGT、TP-CO2、TP-HBDH污染的存在。但如果用我们提出的新准则发现,CA和GGT都会对a一b形成正影响(见表2-4),C0.和HBDH对TP会有正效应,亦即也会造成A一b和TP的计算结果较实际数值偏高。已知A一b和IP的降低与肝病的严重程度成正有关,而测值偏高将可能导致患者肝病逐渐转好的假象,并造成医师对疾病的判断有误!"。4.2试剂盒交叉携带污染解决方案的评估对已判定的交叉携带污染物的十五个组合,根据标准二点三.二中设定的正确的检测顺序和特定的洗涤流程,最终设定了提供者携带污染物的试剂针(R1、R2)、洗涤剂种类、清洗剂用量和洗涤频次等参数。将已确定的所有参数根据接受者在相同的时间加以排序,结论见表4-3。表4-3清洗参数设置结果表明,某些试剂仅受R一或R二的影响,而某些试剂不但受R一的影响,同时也受R二的影响,例如MG同时受供者G一uHK的R一和R二影响,而ADA也同时受供者Mg的R一和R二影响。为了对以上方法清洗的有效性进行进一步检验,可以通过将产生了交叉携带污染物的试药组合,再次进行二点一的试剂对交叉携带污染物的检测过程,最后算出了污染率、CV,具体结论见表4-4。表4-4清洗效果的验证图中环境污染率数据为-百分之零点五七,-百分之零点零二和-百分之一点三三,说明受者收到供者污染物后的现实检测值明显下降,而其他环境污染率数据均为正值,说明受者收到供者污染物后的现实检测值明显上升。由图二负六的结论中可以发现,已经产生了交叉携带污染物的十五套检测试剂盒,在进行了特定的清除过程后,减少环境污染的作用已经非常明显。15个组合的|环境污染率|全部明显下降,均<5%。经过对比表4-4与表4-1与表4-2,可以发现,|环境污染率|降低程度最为明显的是TBA-TG组合,其环境污染率从以前的百分之四十七点五五降低至百分之三点二五。但另外十四个组合的|污染率|则已经明显降低,甚至全部减少到<百分之三点二五。因此按照我们所给出的最新的交叉携带危害评价准则,在|污染率|<百分之五之后,就必须同时按照标准二和标准三做进-步评估,才能在最后判断上述组合是不是真的减少了交叉携带危害。从表四负四可以看出,最终1~15组合的|污染度|全部低于百分之五,接受者CV也全部都低于允许CV,|污染值|也全部低于允许偏移,表明这十五个组合都达到标准三,也表示这十五个组合的污染情况都得到消除。4.3新标准及特殊的清洗方法的普适性评价结果在日立7180、AU480临床生化检验仪上,对提出的新国家标准和特殊洗涤方式进行了的检验,结果显示新国家标准科学上可行,而且该洗涤技术疗效也不错。在7180、AU480上可以设置特殊清洗,洗涤效率见表四负五和表四负六。由表4-5和表4-6中的结论便可发现,在七千一百八十和AU四百八十仪器上产生交叉携带污染物的九组检测试剂盒中,在设置了特定的清除程序之后,减少污染物的效应非常明显。九个组合的|污染物率|值全面大幅下降,均低于百分之五且低于允许偏移。所以本文提供的污染物判断的新标准,和更特殊的清洗方式同样适合于七千一百八十和AU480全自主生化分析仪。表4-57180仪器特殊清洗效果表4-6AU480仪器特殊清洗效果5结论针对试药之间的交叉携带污染产生了一定的隐蔽性,首先给出了对交叉携带污染判定的新准则,然后根据检测试剂盒间存在的交叉携带污染,给出了独特且合理的清除程序:根据检测试剂盒的开盖稳定性和对试药之间的相互影响状况,对试药加以顺序:首先分别用DA、0.5%Acid清除R1,然后再选用10个%DB清除R1,最后继续选取用DA和0.5%Acid共同清除R一和R2;最后再明确了清除剂用量和清除时间等方法后。将按照最新标准发现的十五个产生了交叉携带污染的试药组合予以清除后,对它们重新开展了检测试剂间交叉携带污染的检测。最后,通过在日立7180、AU480临床生化测试仪.上,对上述新标准规定及特别洗涤方式过程实施的检验,结果显示该新标准规定科学合理,该特别洗涤方式效果不错。参考文献[1]陈娟,颜巍,周竞,王书侠.POCT血糖仪和生化分析仪对血糖检测的比对研究[J].检验医学与临床,2019,16(02):171-173.[2]龙伟清,陈渡波,詹晓霞,徐鸿绪,邓婉萍,黄桂贤.即时检测血糖仪与全自动生化分析仪血糖检测结果的比对研究[J].中国卫生检验杂志,2017,27(15):2140-2142.[3]王群峰,李新兰.三款血糖仪与全自动生化分析仪检测末梢血和静脉血血糖及二者线性回归分析[J].中国医学装备,2017,14(08):21-24.[4]徐含青,刘跃平,府伟灵,黄君富,黄庆.国产自动生化分析仪的发展和应用[J].医疗卫生装备,2017,38(09):112-115.[5]赵笔辉.应用日立7180全自动生化分析仪的检测时序处理交叉污染[J].检验医学,2019,31(02):140-143.[6]卢旭.贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析仪性能验证[J].医疗卫生装备,2019,37(05):107-110.[7]宋国威,李立新,秦英军,万玲玲,杜鸿飞.多种品牌便携式血糖仪与大型生化分析仪血糖检测结果的比对分析[J].河北医药,2019,38(13):1983-1985.[8]王志伟,倪蓝,魏军.全自动生化分析仪校准存在的问题[J].检验医学,2019,29(12):1260-1262.[9]梁剑琦,王欣汝.POCT血糖仪与全自动生化分析仪检测血糖结果比对分析[J].实用预防医学,2020,22(07):877-879.[10]杨艳,袁蓉,唐旭,金丹,李蓬秋.便携式血糖仪与生化分析仪血糖检测结果的比对及其质量控制分析[J].实用医院临床杂志,2020,12(05):144-147.[11]孔琳.浅谈自动生化分析仪的发展趋势及在医学检验中的应用[J].世界最新医学信息文摘,2020,15(59):29+32.[12]朱小艳,姚全良,黄淑英.44台POCT血糖仪与生化分析仪检测血糖结果比对分析[J].实验与检验医学,2019,32(02):169-171.[13]李延斌,孙志华.全自动生化分析仪的分类、结构和选购[J].中国医疗器械信息,2020,(03):34-40.[14]张婉琳,叶惠艺,黄飞龙,邹志杰.全自动生化分析仪与快速血糖仪检测血糖的临床效果比较[J].中国现代药物应用,2018,12(18):69