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技术支持|浏览次数:416|时间:-2-PriCells-免疫荧光技术technique)免疫荧光技术(Immunofluorescencetechnique)异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC):FITC异构体Ⅰ型在效率、稳定性与蛋白质结合力等方面都更优良。FITC389.4,490~495nm,520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。FITC570nm,595~600nm,呈现橘红色荧光。(tetramethylrhodamineisothiocynate,TRITC):TRITC620nm,FITC3(Eu3)、铽(藻红蛋白(P-phycoerythrin,PE):PE564nm,488nm576nm,对于多甲藻叶绿素蛋白35kD,490nm488nm677nm。FL3PerCP。碘化丙啶(propidiumiodide,PI):可选择性地嵌入核酸DNA、RNA)DNARNaseRNADNA488nmFITC:黄色结晶粉末,吸取光:490~495nm,520~530nm,TRITC:550nm,620nm,o镧系:Eu、PE:490~560nm,595nm,红色荧光HRPHPA二聚体便形成含有强荧光的物质。例如,4-甲基伞酮-β-Dβ-半乳4450nm。其它如碱性磷酸酶的底物4根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。镧系螯合物某些3含有与蛋白质形成共价键的化学基团荧光效率高,标记后下降不明显荧光色泽与背景色泽对比鲜明标记办法简朴、快速CDC抗原的细胞,未损伤,不染色,为阴性反映。二.实验环节1.PBS5%PBS3-0-10%可疑阳性反映(±)11-20%21-50%阳性反映(++)死细胞占51-80%81-100%性反映。阐明CDC验必须要有抗原、抗体、补体共同参加。②.第②构成阴性的因素:实验中加入抗体、LC。由于无抗原和补,呈阴性反映。阐明CDC实验必须要有补体的参加LC,既无抗原抗体免疫复合CDC类反映称为凝集反映(agglutination)ug/mlγIg术3H、51Cr、32P、125I、HRP、1行。缺点:每检查一种抗原必须制备对应的荧光抗体。2性荧光容易增多。3(二)流式细胞术DNA、RNA、蛋白质和细胞体积等)进行多(三
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