单克隆抗体和重组治疗性蛋白质的聚体分析VIP

BT的聚合构造形式存在，在病毒样颗粒组织中间隔5-10nm，大小超出100kDa，能够克服对聚合进行多个类别的分组。下表1列出了生物制药中最常见的聚体类别。为了有助于理10nm，涉及高分子量20–50µm10kDa聚体除大小外，聚体随时间的大小变化率是一种有用的参数，能够提供聚体的功效特性，其中时间对应蛋白质产品的使用期。聚体最初能够小二聚体或碎片的形式存在，并朝（如果这种转变在热力学上温度变得快速在任何给定的时刻，蛋白质可能在有助于蛋白质单体或天然构型的热力学状态与有助于展开的天然蛋白质构型状态之间转变。在某些的条件下，未折叠的蛋白质可能与其它天然和非天然形式形成复合物，在获得足够的自由能以转变为可能成为新蛋白质实体而形成稳定状态的聚体。科学家LyEyring160溶液中蛋白质聚体的动力学转变，并在干扰素-γ聚集的状况下进一步转变为一级转变反映动力学。评定药品聚体总增加率的过程很复杂。单一药品产品普通含有不均匀的聚体混合（其生长速率很小。聚体的增加速度加紧的更加令人担忧，可能需要更主动的控制和聚体控制最小化方略。在培养物中会产生聚集的CHO细胞体现的单克隆抗体（MAb）的聚集状况，如果将硫酸白介素-1受体激动剂或冻干MAb制品以克制或减少聚体的形成。切实际。大量冷冻期间溶质浓度和pH的变化也可增进蛋白质聚集。大量的解冻也带来这基于聚体动力学模型，蛋白质聚体可能比其单体更具疏水性。这是由于当蛋白质转变为天然的、部分展开的状态并暴露其疏水残基时，可能会发生蛋白质聚集。研究表明，聚（DVF22尺寸排阻高压液相色谱法是对二聚体，LMW和HMW物等蛋白质聚体使用最广泛的在无法分辨或回收HMW物时低估了聚集物的存在。SEC的重要局限性可能是需要以低浓度（1mg/mL）100观范畴。另外，由于每种办法的局限性，可能需要正交实验来确认办法。例如，SEC成果可能需要使用其它正交办法（例如分析超速离心（AUC）进行确认。AUC能够用作确认数据分析困难的问题。DLS另外，根据美国药典（USP，普通使用显微镜和光遮盖法检测和计数亚可见颗粒（50已经指出表观球状直径约为0.5µm的聚集体没有得到常规跟踪和分析。F68制药品产品的pH值的变化也减少了异核的形成。在其它状况下，控制方略的重点是加强RemicadeHPLC对于蛋白质药品聚体的最大允许限量尚无共识，由于某些聚体水平，某些蛋白质仍可能在很大程度上稳定且安全，而对于其它蛋白质，聚体水平的很小变化可能会深刻影响蛋白质的稳定性甚至安全性。直到拿到申请许可证时，药品制造商将收集足够的数据来证明聚体的类型及其对产品安全性和质量的潜在影响。普通，允许进行正式分析，从而能够预测产品整个使用期内预期的聚体含量。聚体的最大可允许极限的唯一原则为P<78是基团亚可见粒子。某些制造商已开始努力优化评定亚可见颗粒的替代办法，以减少所需的样品量，以及P<7建议使用光遮蔽和显微镜办法分析高浓度，高粘度蛋白溶液时可能会碰到的限制。但是，USP对亚可见颗粒的测试旨在减轻与可注射溶液中外来颗粒的存在有关的风险，这些外来颗粒P可见颗粒仅含有定性规格，这表明注射用无菌溶液应基本不含可通过目测观察到的颗粒物质。由于外观检查的主观性，制造商在进行可见颗粒的常规分析时必须小心。Q5CQ6BQ1AR长久，压力，加速和光暴露（ICHQ1系列）期间稳定性计划的一部分，而可比性指南则（ICHQ5e评定聚体时，有某些重要的考虑因素。蛋