DB43-T 959.4-2023 异种移植用无指定病原体DesignatedPathogen Free,DPF医用供体猪 第4部分：病理学诊断规范

ICS

70.080CCS

B

43湖南 省 地 方 标 准DB43/T

959.4—2023代替

.异种移植用无指定病原体（

Free,

DPF）医用供体猪第部分：病理学诊断规范Medical

grade

DPF

donorpig

for

xenotransplantationPart4:Specification

of

pathological

diagnosis2023

-

11

-

09

发布

2024

-

-

实施湖南省市场监督管理局

发

布DB43/T

959.4—2023 前言························································································································

Ⅲ引言························································································································

Ⅴ1

·····················································································································12

规范性引用文件······································································································13

术语和定义············································································································14

缩略语··················································································································15

检查规则···············································································································26

检查程序···············································································································37

临床病理学检查······································································································38

解剖病理学检查······································································································49

结果判定···············································································································510 检查结论··············································································································6附录

A（规范性）

异种移植用

医用供体猪的血液学指标正常值参考范围

···························

7附录

B（规范性）

异种移植用

医用供体猪的血液生物化学指标正常值参考范围

··················8附录

C（规范性）

异种移植用

医用供体猪组织病理学检查及标本取材规范

························

9DB43/T

959.4—2023本文件按照

GB/T

—《标准化工作导则 第

1

部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是

《异种移植用无指定病原体（Designated

Pathogen

Free,

DPF）医用供体猪》的第

4

部分。DB43/T

已发布了以下部分：——第

1

部分：遗传质量控制；——第

2

部分：微生物、寄生虫学等级与监测；——第

3

部分：配合饲料；——第

4

部分：病理学诊断规范；——第

5

部分：环境与设施。本文件替代

DB43/T

959.4—2014《异种移植用无指定病原体（Designated

Pathogen

Free,

）医用供体猪

第

4

959.4—2014

主要技术变化如下：a）

增加了“引言”一章；b）

1

5.2.2，2014

）；c）

1

异种移植用

6，2014

版的

5）；d）

8.1.1，2014

7.1.1）。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖南省科学技术厅提出并归口。本文件起草单位：中南大学湘雅三医院，湖南赛诺生物科技股份有限公司。本文件主要起草人：王维、周智君、胡鹏志、马小倩、李桑、徐畅、王佳、石兴勇。本文件及其所替代文件的历次版本发布情况为：——2014

年首次发布为

959.4—2014；——本次为第一次修订。IIIDB43/T

959.4—2023 异种移植用无指定病原体（Designated

Pathogen

Free,

）医用供体猪标准化能更好的促进异体系中，DB43/T

959《异种移植用无指定病原体（Designated

Pathogen

DPF）医用供体猪》是指导湖南省异种移植用无指定病原体医用供体猪培育的基础性和通用性的标准。DB43/T

旨在确立环境设施的准则，拟由五个部分构成。——第

1

——第

2

生物安全性。——第

3

部分：配合饲料。目的在于保障异种移植用无指定病原体医用供体猪饲料的安全和营养。——第

4

内容和方法。——第

5

设施建设。感染的可能性，并快速对感染猪进行处理，以杜绝疾病扩散风险。为了做好这项工作，湖南省在

2014年发布了有关异种移植用无指定病原体医用供体猪病理学诊断的地方标准。DB43/T

959.4

发布实施已确有必要修订完善

959.4，以提升异种移植用无指定病原体医用供体猪感染风险预警能力。病理学诊断需要充分考虑合理的抽样比例以及动物福利。本次对

的修订，重点考虑骤，减轻动物在采样过程中的痛苦，保证了动物福利。DB43/T

959.4—2023Designated

DPF

1

本文件规定了异种移植用无指定病原体（Designed

Pathogen

Free,

DPF）医用供体猪病理学检查本文件适用于异种移植用

DPF

医用供体猪的病理学诊断。2

规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3

术语和定义3.1

下列术语和定义适用于本文件。异种移植用

DPF

医用供体猪

grade

DPF

pig

for

月龄体重宜不超过

50

织（World

Health

Organization，WHO）指定供体动物应排除的潜在感染或条件致病和感染性人畜共患体、科学研究、教学、生产和质量控制鉴定以及其他科学实验的小型猪。3.2临床病理学 clinical

用化学、微生物学、血液学和分子生物学的方法对体液（血液和尿液）和组织等进行实验室分析，从而对疾病进行诊断的医学学科。3.3解剖病理学

pathology对疾病做出诊断的医学学科。4

缩略语下列术语、英文简写及全称适用于本文件。ALB（ALT（

AminotransferaseAST（Aspartate

Aminotransferase50

50-100

100-500

10

500

25

DB43/T

959.4—2023BUN（Blood

Urea

CRE（）：肌酐GLU（HCT（HGB（MCH（Mean

Corpusular

MCHC（Mean

Corpusular

Hemoglobin

MCV（Mean

corpusular

MPV（Mean

Platelet

PLT

（PlateletRBC（

Blood

CellRDW（

Cell

Distribution

WidthWBC（White

Blood

Cell

T-BIL（

Total

BilirubinT-CHO（Total

TG（TriglycerideTP（Total

Protein5

检查规则5.1检查频率无指定病原体级异种移植用

DPF

3

个月至少检查一次；解剖病理学检测每隔一年至少检查一次。5.2抽样要求5.2.1选择

3

月龄以上异种移植用

DPF

医用供体猪用于检测，随机抽样。5.2.2 根据群体大小，抽样数量见表

1。表

表

1 抽样数量DB43/T

959.4—20236

检查程序检查程序见图

1。图

1 异种移植用

医用供体猪检查程序7

临床病理学检查7.1外观检查7.1.1 检查项目精神状态、被毛、皮肤、天然孔、营养状况、运动状态、饮食情况、呼吸状态等。7.2血液学检查7.2.1 采样要求动物准备：空腹

12

h～

h。采血位置：耳静脉、前腔静脉或后肢外侧隐静脉。采血量：

mL，采用相应规格的

抗凝管。标本储存条件：室温条件下不超过

8

h。7.2.2 检测项目RBC、、MCV、HGB、、MCHC、、、MPV、WBC。DB43/T

959.4—20237.2.3 正常参考值异种移植用

DPF

医用供体猪血液学指标正常参考值参见附录

A。7.3血液生物化学检查7.3.1 采样要求动物准备：空腹

12

h～

h。采血位置：耳静脉、前腔静脉或后肢外侧隐静脉。采血量：

mL。标本处理：室温放置

30

～60

min，3000

5

，取血清用于检测。标本储存条件：血清标本密封、避光保存，室温条件下不超过

12

h，4℃条件下不超过

24

h。7.3.2 检测项目ALT、、CRE、BUN、TP、ALB、GLU、T-BIL、TG、T-CHO。7.3.3 正常参考值异种移植用

DPF

医用供体猪血液生物化学指标正常参考值参见附录

B。8

解剖病理学检查8.1 大体解剖8.1.1解剖程序麻醉→体表检查→皮下检查→剖开腹腔做一般视查→剖开胸腔作一般视查→摘出腹腔脏器并检查官并检查→剖开脊椎管，摘出脊髓并检查→肌肉、关节和淋巴结检查→骨和骨髓检查。8.1.2 检查内容体表：发育状态、营养状态、精神状态、感觉器官、呼吸系统、被毛、皮肤、睾丸。头颈部：口腔、鼻腔、大脑、小脑、脑干、垂体、扁桃体、甲状腺、甲状旁腺。胸腔：胸腔液、胸腺、肺和肺门淋巴结、心包、心包液和心脏、主动脉、气管和支气管。腹腔：腹腔液、脾脏和脾门淋巴结、肝脏、胆囊、肝门部位的血管、胆管和淋巴结、胰腺、肾脏、盆腔：膀胱、输尿管、前列腺、精囊腺、卵巢、输卵管、子宫、阴道。8.2组织病理学检查8.2.1 组织标本取材规范组织标本取材规范参见附录

C。8.2.2 检查内容心、肺、肝、脾、肾、胃、空肠、肠系膜淋巴结、睾丸/卵巢，以及大体解剖检查发现异常的器官DB43/T

959.4—2023和组织。9

结果判定9.1 临床病理学检查结果判定9.1.1 判定标准个群体，判定标准如下：a）

未见异常：动物外观无异常，同时血液化验指标均在正常参考值范围内。b）

轻微异常：动物外观无明显异常，但是血液化验指标有

1～2

项异常升高或降低，最大变异不超过正常参考值范围临界值的

c）

轻度异常：1）

2

考值范围临界值

20％～％；2）

2

常参考值范围临界值

20％-50d）

明显异常：1）

2

考值范围临界值的

2）

2

常参考值范围临界值的

％；3）

动物外观明显异常。9.1.2 结果确认为准。9.2 解剖病理学检查结果判定9.2.1 判定标准整个群体，判定标准如下：a）

未见异常：未发现病理形态学异常变化；b）

轻微异常：发现轻微的病理形态学变化，推测动物仍然能够表现正常的生理功能；c）

轻度异常：发现轻度的病理形态学变化，推测动物正常生理功能已经出现偏差；d）

明显异常：有明显的病理形态学变化，推测动物出现生理功能障碍。9.2.2 结果确认解剖病理学检查结果需要有同行复核，检查报告要求由病理专业高级职称的技术人员签署。DB43/T

959.4—202310

检查结论10.1 动物个体检查结论定为不合格。临床病理学与解剖病理学检查结果不一致时，依据解剖病理学检查结果做出检查结论。10.2 动物群体检查结论感染判定该屏障区域内异种移植用

医用供体猪不合格。

RBC

1210

/LHCT

MCV

fLHGB

g/LMCH

pg19.51-21.30MCHC

g/LRDW

fL36.36-39.97PLT

910

/L190.63-396.37MPV

fLWBC

910

/LDB43/T

959.4—2023附

录 A（规范性）异种移植用

DPF

医用供体猪的血液学指标正常值参考范围表

表

A.1 异种移植用

DPF

医用供体猪的血液学指标正常值参考范围

ALT

U/L30.72-83.53AST

U/L24.46-219.79CRE

µmol/L86.39-119.86BUN

mmol/L2.46-8.12TP

g/L69.35-80.85ALB

g/L34.60-47.52GLU

mmol/L3.49-5.45T-BIL

µmol/L0.80-2.35TG

mmol/L0.66-1.36T-CHO

mmol/L2.68-4.10DB43/T

959.4—2023附

录 B（规范性）异种移植用

DPF

医用供体猪的血液生物化学指标正常值参考范围表

表

B.1 异种移植用

DPF

医用供体猪的血液生物化学指标正常值参考范围DB43/T

959.4—2023附

录 C（规范性）异种移植用

DPF

医用供体猪组织病理学检查及标本取材规范C.1 总则C.1.1 一般用于组织学取材的动物剖杀前应先隔离检疫

d，并详细记录实验动物来源、种类、年龄、性别、原编号、体重、临床症状等，记录剖检时间、地点、麻醉方法、时间、麻醉者、处死方法、解剖者、记录人、温度、湿度。动物剖杀前禁食（不禁水）时间一致，为

h。C.1.2 病理标本应及时取材、及时固定。病理检查应分层次进行，先进行一般外观观察，然后剖检观察，再进行光镜详细检查。C.1.3 取材部位宜选择正常与病灶交界处、病变特别明显处以及眼观变化特殊处。适量包括与病变区皮质、髓质、肾盂粘膜及被膜。相同器官取材时，选材部位应尽量一致。C.1.4 大体积和分叶的器官，应视不同组织选取多个部位；小器官可整体取材并固定，如淋巴结、扁刮抹、压挤和冲洗（胃肠内容除外）。C.1.5

0.5

cm-1.0

cm，不宜太厚或太薄。C.1.6 组织块放入固定液时忌卷曲、互相粘贴和贴靠瓶壁，食管、胃、肠、胆囊及膀胱等空腔脏器应动物的同时进行固定液灌注后再取材，胃肠道组织的取材和固定应控制在动物死后

20

min

以内。C.1.7

4C.1.8如发现病变组织，在组织取材之前，应记录组织大小，质地性质及硬度，包膜的厚度和完整性以及与周围其他脏器之间位置关系，必要时称重。C.2 体表检查和取材C.2.1 体表检查病变，有无寄生虫和粪便粘着等变化。注意体表淋巴结有无肿大、硬结。C.2.2皮肤取材C.3皮下检查和取材C.3.1 皮下检查DB43/T

959.4—2023观察肌肉组织表面有无变异，皮下有无充血、炎症、出血、淤血、水肿（多呈胶胨样）等病变。C.3.2淋巴结取材

状况，必要时称其重量。C.4 腹腔及腹腔脏器的取材和检查C.4.1 膜及腹腔器官浆膜是否光滑，肠壁有无粘连，再沿肋骨弓将腹壁两侧切开，使腹腔器官全部暴露。C.4.2脾C.4.2.1脾脏检查

2

态，有无结节坏死梗死和脓肿等。C.4.2.2 脾脏取材以刀背刮切面，检查脾髓的质地。以

0.5

cm-1.0

间距对脾作多个平行横切面，检查每块脾脏薄片的局部形态。取材

1

块

块。记录脾脏的形态、色泽和切面的情况。C.4.3肝、胆囊和胰腺C.4.3.1 肝脏检查结构是否清晰，有无脓肿和坏死等。同时，应注意胆囊的大小，胆汁的性状含量以及黏膜的变化。C.4.3.2肝脏取材左外叶和右外叶各取

1

面经过病变中心，取病变组织

2

块。记录肝脏表面和切面情况，门脉做剖开检查。C.4.3.3 胆囊取材沿长轴剪开胆囊壁，取材

1

块。记录胆囊大小、色泽，以及胆囊壁和胆汁的情况。C.4.3.4 胰腺取材胰腺的头、体、尾各取

1

块。如有病变，应切出病变区域的最大截面，取

2

块。C.4.4 肾C.4.4.1 肾脏检查检查肾脏的形态、大小、色泽和韧度。注意包膜的状态，是否光滑透明和容易剥离。包膜剥离后，10DB43/T

959.4—2023容积，有无积尿积脓结石等，以及黏膜的性状。C.4.4.2 肾脏取材的不同部位切取

2

2

2

脏表面、皮质、髓质、肾盂和输尿管的情况。C.4.5 胃C.4.5.1胃检查数量、性状、气味、色泽等。最后检查胃黏膜的色泽，注意有无水肿出血充血溃疡肥厚等病变。C.4.5.2 胃取材

1

位

1

块-3

块。记录粘膜的色泽及有无异常。C.4.6 C.4.6.1 肠道检查从十二指肠、空肠、大肠、直肠分段进行检查。先检查肠系膜、淋巴结有无肿大、出血等，再检查肠管浆膜的色泽粘连生虫结节后剪开肠管查肠内容物数量状味，有无血液、异物等除去肠内容物，检查肠黏膜的性状，注意有无肿胀、发炎、充血、出血、寄生虫和其他病变。C.4.6.2 肠道取材

1

2

段的位置，以及肠腔内有无寄生虫或异物。C.5 胸腔及其胸腔脏器的取材和检查C.5.1 开胸腔离咽、喉头、气管、食道周围的肌肉和结缔组织，将喉头、气管、食道等一同采出。C.5.2 肺C.5.2.1 肺脏检查11DB43/T

959.4—2023有无病变，切面流出物的