临床检验标本正确的采集及临床意义

检验科·陈明2013-5-3临床检验标本正确的采集及临床意义检验质量保证血液标本采集尿液标本采集粪便标本采集体液标本采集微生物检验标本采集检验质量保证分析前分析中分析后准确的检验结果全程质量控制什么是分析前质量控制？检验申请患者准备样品采集标本运送标本实验室传递分析前分析前质量管理是最易出现问题、潜在因素最多、最难控制的环节。影响标本质量因素年龄性别运动空腹食物吸烟饮酒药物妊娠海拔高度季节时间体位采集操作检验质量保证血液标本采集尿液标本采集粪便标本采集体液标本采集微生物检验标本采集血液标本采集1血液标本类型2血液标本采集方法3血液标本采集质量保证患者准备采血操作标本运转及保存血液标本类型1血液标本类型全血：离体血液立即与适量抗凝剂混合，轻轻混匀，则可避免凝固，从而得到抗凝全血。血浆：将抗凝全血在一定条件下将其离心沉淀后的上层浅黄色的液体。血清：离体血液自行凝固收缩析出淡黄色透明的液体。血液标本类型血浆与血清的区别血清中缺少了凝血系统中的某些凝血因子（凝血过程中被消耗）如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、凝血因子Ⅱ（凝血酶原）、凝血因子Ⅴ（易变因子）、凝血因子Ⅷ（抗血友病球蛋白AHG）等。血清与血浆相比主要是缺乏纤维蛋白原。血液标本采集方法2皮肤采血法静脉采血法动脉采血法真空采血管介绍普通管（红头管）采血管内不含添加剂，用于常规生化，免疫和血清学相关检验。促凝管（橘红头管）采血管内有促凝剂，可激活纤维蛋白酶，使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多聚体，进而形成稳定的纤维蛋白凝块。快速血清管可在5min内使采集的血液凝固，适用于急诊血清生化试验。血清分离胶管（金黄头管）采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。标本在48h内保持稳定。促凝剂可快速激活凝血机制，加速凝血过程，适用于急诊血清生化试验和特殊患者的血标本分离，如肾衰透析病人。肝素抗凝管（绿头管）采血管内添加有肝素。肝素具有直接抗凝血酶的作用，有利于血液保持液体状态。适用于红细胞脆性试验，血气分析，血细胞比容试验，微量元素及普通生化测定，不适于做细胞凝集试验。过量的肝素会引起白细胞聚集，不能用于白细胞计数测定。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色，故也不适于白细胞分类。血常规管（紫头管）可以有效的螯合血液中的凝血因子IV,从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验，不适用于凝血试验和血小板功能检查，亦不适用于离子的检测如碱性磷酸酶，肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定和PCR实验。抗凝管（蓝头管）通过与血样中凝血因子IV螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验，抗凝剂与血液的比例1:9（200ul抗凝剂加入1.8ml血液)血沉管（黑头管）血沉试验要求的枸橼酸钠浓度是3.2%（相当于0.109mol/L)抗凝剂与血液的比例为1:4（400ul抗凝剂加入1.6ml血液）血液标本采集质量保证3患者准备采血操作标本运转及保存患者准备现代检验的高质量，强调标本采集的基本原则是保持当时生理或病理状态下立体标本质和量的完整性。事实上，机体中任何成分，一旦离开人体，则易受到环境的影响发生改变。生理变异：年龄碱性磷酸酶甲状腺激素水平红细胞、血红蛋白、白细胞总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇内生肌酐清除率糖耐受能力白介素6抗利尿激素生理变异：性别高密度脂蛋白胆固醇

总胆固醇

血清铁生理变异：妊娠与月经周期月经周期检验项目变化FSH，LH，孕激素，雌二醇胆固醇醛固酮肾素铁、磷在月经各期波动排卵期间血清水平最低黄体期水平高于卵泡期2倍黄体期水平升高月经期血清铁、磷水平降低生理变异：妊娠与月经周期妊娠检验项目变化平均血浆容量GFRCcr尿量雌激素，孕激素，催乳激素ApoAI，ApoAII，ApoBTC,LDL-CHCG促甲状腺激素T3,T4结合球蛋白ESRVII因子Fe,P，铁蛋白PAI－2升高升高升高（约50％）妊娠末第三个月增加约25％妊娠中后期升高升高升高升高下降升高升高升高升高下降升高生活环境:昼夜节律昼夜节律检验指标变化方向皮质醇清晨6AM左右达峰值，随后逐渐降低，午夜最低促肾上腺皮质激素，生长激素，催乳素清晨最高IL-1α，TNF-α，IL-12，INF-γ清晨最低，随后升高，午夜最高CD4＋T细胞清晨最低，随后升高，午夜最高新蝶呤（尿液）清晨最低，随后升高，午夜最高OGTT下午进行性升高生活环境：季节季节检验指标变化方向总甲状腺素三碘甲腺原氨酸促甲状腺激素释放激素总胆固醇甘油三酯维生素D，25-羟胆钙化（固）醇冬季偏高（较夏季高20%）冬季偏高冬季偏高冬季偏高（较夏季高约2.5%）冬季偏高夏季偏高生活环境：海拔海拔检验指标变化方向Hct，HbCRP肾素、转铁蛋白、雌三醇、Ccr升高升高下降生活习惯：运动检验项目变化（%）变化方向肾上腺素、去甲肾上腺素生长激素促肾上腺皮质激素>300>300>300+++肌酸激酶>300+丙酮酸激酶~150+皮质醇50~200+糖原~50+天冬氨酸氨基转移酶~50+胆红素~50+生活习惯：运动检验项目变化（%）变化方向肌酐、尿素~50+葡萄糖15~30+尿酸10~20+无机磷10~20+白蛋白10~20+钙10~20+碱性磷酸酶~5+钠~5胰岛素~5—生活习惯：饥饿饥饿14h：β-羟丁酸、乳酸、乙酰乙酸及丙酮酸开始升高。饥饿48h：β-羟丁酸浓度升高约30倍，胆红素升高约240%，游离脂肪酸、亮氨酸、异亮氨酸、胰高血糖素亦显著升高，胰岛素轻度升高，伴代谢性酸中毒，葡萄糖、白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白及补体3血浆水平下降。饥饿4周:γ-GT、TG及尿素显著下降（约20~50%），UA、CRE、AST显著升高。饥饿12h是多数国家推荐的标准程序，长期饥饿应当避免。生活习惯：抽烟急性影响

变化（%）变化方向游离脂肪酸游离甘油肾上腺素醛固酮皮质醇40-6040-6040-6040-6040-60+++++生活习惯：抽烟慢性影响

变化（%）变化方向CEA白细胞平均细胞体积血细胞比容胆固醇LDL-c血管紧张素转化酶HDL-c7030-50﹤5﹤5﹤5﹤5405++++++--生活习惯：酗酒检验指标15h36h60h100hAST下降4%下降10%下降13%恢复正常ALT--升高8%升高12%升高4%LDH下降2%下降3%下降4%恢复正常CPK----升高4%下降18%GGT升高8%升高18%升高25%升高5%ALP下降2%下降5%恢复正常--部分血浆酶在饮酒后15-100小时的变化生活习惯：咖啡血浆葡萄糖游离脂肪酸饮食影响以不同食物谱为例:

标准化饮食（2900焦尔,700千卡）后TG升高约50%、AST升高约20%、胆红素和葡萄糖升高约15%、ALT升高约10%，TP、ALB、TC升高不足5%。此外进食后血浆钾、血清碱性磷酸酶水平亦显著升高（最先升高的是肠型碱性磷酸酶）。普通食谱和高脂食谱餐后2-4h脂肪成分升高。

高蛋白饮食虽对血清肌酸水平影响不显著，但可导致血清尿素、氨、尿酸等浓度的升高。饮食影响

不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸高比例饮食导致血清胆固醇浓度下降(硬脂酸对LDL－C无显著影响，复合碳水化合物、多不饱和脂肪酸可降低LDL－C水平，棕榈酸则可增加血清胆固醇水平).

长期素食人群与杂食人群比较，血浆LDL－C及HDL－C分别低约37％及12％，而以乳品、蔬菜为主食人群血清LDL－C及HDL－C比长期素食人群分别高约24％及7％。

嘌呤饮食导致尿酸浓度升高。

5-羟色胺富含于香蕉、苹果、西红柿等水果中，食用上述水果可致尿5-羟吲哚乙酸排泄增加。药物影响●药物干扰大体可分为两大方面：体内生理性影响，即药物或其代谢物对被测物水平的影响；体外影响，即由于药物或其代谢物的部分物理、化学特性而对测定方法的干扰。●研究发现无论是健康人群或是疾病人群，均存在药物对相关检测指标的影响，这种影响不仅与剂量相关，亦存在较大的个体差异。药物影响如何降低药物对检测的影响？停药及停药时间.药物监测:应在血药浓度或治疗药物浓度达到稳态后采集血样。对于周期性用药应在前次用药后、下一次用药前采血，即在这种剂量及给药条件下所获得的最低血药浓度。药物监测:在血药浓度最高时采血，反映了药物的峰值水平。一般而言，肌肉注射、静脉内给药、口服给药分别在给药后1－2小时、15－30分钟、1－5小时内取血，所测血药浓度可反映该药的峰值浓度。药物监测:一般来说，药物经口服吸收的情况存在很大的个体间差异，所以口服药物一般监测其谷浓度；对于静脉给予茶碱、抗生素、抗心律失常药物时，采血监测其峰值浓度则更有意义。采血操作采血时间采血部位采血体位压脉带使用输液溶血混匀方法混匀次数采血顺序采血时间体内有些化学成分的浓度具有周期性变化。因此……采血时间尽可能在上午9点前空腹进行。1尽可能在其他检测检查和治疗之前进行。2根据药物浓度峰值期和稳定期特定进行，以检测药物浓度。3在检验申请单上注明采血的具体时间。4采血部位不同部位的血液样本中某些检测成分会有差异，甚至对检测结果产生严重影响，故应选择恰当的采血部位。采血不畅容易引起血小板破坏和凝血因子的消耗。采血体位体位影响血液循环。

门诊病人与住院病人差别。

受体位影响的项目：红细胞计数、白细胞计数、血细胞比容、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、清蛋白、免疫球蛋白、载脂蛋白、TG、LDH、醛固酮、肾上腺素、去甲肾上腺素和血管紧张素等。压脉带使用压脉带压迫时间过长可使多种血液成分发生改变：①压迫40秒：总蛋白可增加4%，AST增加16%；②压迫超过3分钟：AST、CHO等增高5%-10%，血钾增高更明显。压脉带使用建议：①采血时应尽量缩短压脉带的压迫时间，一般应小于1分钟；②在见到血液进入到采血容器后，立即解开压脉带；③采血时，嘱咐患者做反复握拳动作；④当需要重复采血时，建议采用另一只手臂。输液①输液不仅使得血液稀释，而且输液的成分会严重干扰检验结果，因此，应尽量避免在输液过程中采血；②最常见的干扰项目是：葡萄糖和电解质；③当输入碳水化合物、氨基酸、蛋白质或电解质的患者应在输液结束1小时后采血；④当输入脂肪乳剂的患者应在8小时后采血。输液×当必须在输液时采血检验，应避免输液同侧静脉采血。溶血溶血标本造成的检验差错可造成严重的临床错误判断结果，如血清钾离子浓度，故在采集、运送、保管和分离血清时应尽量避免溶血。混匀方法混匀次数采血顺序采血顺序为什么要讲究采集顺序？用头皮针采血时，头皮针的软连接处有0.2-0.3ml的空气，采血时这些空气进入采血管内，造成采血量比原来预置的少0.2-0.3ml。采第二管时就不存在这个现象。黄管（或红管）用的是血清检测，血量少0.2-0.3ml不会影响检测结果，而蓝管是用全血并且抗凝剂与血液是按比例添加的，采血量过少会影响检测结果。第一管采血，由于破损的组织和被激活的凝血系统物质进入试管中也会影响凝血系统的检测。考虑抗凝剂的交叉污染。采血顺序第一管：细菌培养组采血顺序第2，3管：多管采集组采血顺序采血顺序标本运转及保存标本保存和运送是保证检验质量的重要环节之一；

由于采集的标本受各种因素的影响，可使检验结果产生或大或小的误差；

标本保存时，血细胞的代谢活动，蒸发作用，化学反应，微生物降解，渗透作用，光学作用，气体扩散等，都可直接影响标本质量。采血完成后标明采血时间，尽快送到实验室。尤其是温度超过22℃时！标本放置适当，放置标本管震荡造成溶血。产生的气泡可使蛋白质变性，血小板激活。血液标本采集后血管必须加塞，管口向上，垂直放置，以减少管中内容物振动，促进凝血完全，防止标本蒸发、污染和外溅。国际血液学标准化委员会建议，在室温下（18-25℃），分离血浆和血清并在4h内完成。同一病人同时有多管血标本送检，最好表明采集先后顺序，以便结果不一致时可进行溯源。试管和专用试管架和有合适温度的容器转运。应避免对光线敏感的分析物暴露在人造光或有太阳光（紫外线）照射下。标本管道传送系统可加快标本传递速度和避免标本的错误传递。标本项目与要求血样送检时间2h以上立即送检0.5h内1-2h内血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养等。血糖、电解质、血液细胞学、体液细胞学、精液分析、涂片找细菌、真菌等。各种蛋白质类，色素类，激素类，脂类，酶类，抗原，抗体，尿液及粪便常规检测等。2h以上才能送检的标本应对标本采取必要保存手段。对血糖和乳酸可直接分离血清后冰冻保存；K必须分离血清后密闭2-8℃保存；ACP须加稳定剂分离血清冰冻保存；其它项目：加盖密闭后直接2-8℃保存，但是血沉和细胞学检查不能用此方法。溶血采血量不足或错误血液采集容器错误抗凝标本出现凝固血样拒收转运条件不当容器破损标本污染申请和标本标签不一致血样拒收检验质量保证尿液标本采集血液标本采集粪便标本采集体液标本采集微生物检验标本采集尿液检测目的尿液标本采集尿液标本运送与保存实验室接收标准实验室拒收标准尿液检验是临床上最常用的检测项目之一，主要用于泌尿生殖系统、肝胆疾病、代谢性疾病（如糖尿病）及其他系统疾病的诊断和鉴别诊断、治疗监测和健康普查。泌尿系统疾病的诊断和治疗监测其他系统疾病诊断安全用药检测职业病辅助诊断健康状况评估尿液检测目的尿液检验是反应泌尿系统生理功能、病理活动的一面“镜子”如肾病时，尿液就可能出现蛋白、细胞、管型等病理成分；泌尿系统发生炎症、结石、血管病变等，各种代谢产物可直接进入尿液，引起尿液成分的变化。肾通过尿液的生成与排泄活动，可清除机体代谢产生的废弃物(如尿素、肌酐和过多的水分等）以及进入机体的异物（如药物、有机物等）；通过调节细胞内外的液量和血液的渗透压，保持Na、CL、Hco3离子，排出过剩的H、K,维持机体水、电解质、酸碱平衡，使细胞内外环境相对稳定。因此，尿液检验可为泌尿系统疾病的诊断和治疗监测提供有价值的实验检查指标。泌尿系统疾病的诊断和治疗监测其他系统疾病的诊断尿液来自血液循环，任何系统疾病的病变影响到血液成分的改变时，均可引起尿液成分的变化。如糖尿病时尿糖增高、急性胰腺炎时尿淀粉酶增高、肝胆疾病时尿胆红素增高，尿液成分与精神活动有关，也受到饮食、内分泌等多种因素的影响，所以，尿液检验也有助于心血管、内分泌、消化、生殖、造血等系统疾病的诊断和鉴别诊断。安全用药检测临床上常用药物如庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素B、妥布霉素、磺胺药、抗肿瘤药等，对肾脏都有一定毒性，常可引起肾脏的损害。为此，如在用药前及用药过程中随时进行尿液检测，监测尿液成分的改变，可及时采取措施，确保用药安全。职业病辅助诊断某些重金属，如铅、镉、铋、汞等，可引起肾脏的损害，对经常接触重金属的职业人群，检测尿液中重金属以及发现异常成分，对职业病的诊断、预防及开展劳动保护，具有实用的价值。健康状况评估尿液检测是一种无创性检查，应用于健康检查，易取得满意的效果。尿液检查，可筛查出有无肾、肝胆疾病和糖尿病等，有助于发现亚健康人群，进行早期诊断和疾病预防。尿液标本采集尿液标本采集是尿液检验的基础。为了保证尿液检验的可靠性，必须坚持尿液检验过程的全面质量控制，主要包括3个阶段，即分析前、分析中、分析后的质量控制。分析前的质量控制涉及患者准备和标本容器准备，标本采集与处理，储存和运送等。特别是能否正确、合理、规范化标本采集和处理尿液标本，是尿液检验前质量保证的重要环节。1.清洁标本采集部位2.避免污染3.使用合格容器4.合理使用防腐剂5.采用特殊方式采集尿液的情况患者准备尿液标本收集尿液标本的容器收集尿液标本的容器多种多样，留取标本的最基本要求是使用清洁、干燥、方便的容器。无论采用何种容器，都必须满足下列要求：（1）送检尿标本容器上应用标签，并注明病人的姓名、科别、床号、收集标本的时间及检测项目。（2）容器仅限一次性使用、清洁，不含有干扰实验的物质，如做细菌培养应使用无菌瓶（3)所用容器至少可容纳12ml尿液，开口应大于4cm,底部要宽，以防止尿液溅出。（4）容器应方便运输，便于保存。（5）对于儿科患者，特别是新生儿，可使用小型、特殊的容器。收集尿液的方法(1）自然排尿法：适用于尿常规检查、细菌检查和细胞学检查。采尿时，注意防止尿道口的污染，特别是女病人尿道口易受阴道分泌物的污染。临床最常用的方法是采用中段尿。（2）膀胱导管或穿刺法：对于自然排尿困难的病人或为了避免女病人的尿液被阴道分泌物污染，可采用膀胱导管。为了获得单次尿标本，在耻骨弓上穿刺膀胱取尿有时被用来代替导管取尿。此法可用于婴幼儿尿标本的采集。尿液标本的种类（1）首次晨尿标本：收集早晨起床后的第一次尿液标本，此尿液最适合与尿液常规检查特别是细菌及亚硝酸盐、尿蛋白和细胞、管型等有形成分的显微镜检查。（2）随机尿标本：随机留取任一时间的尿液标本，不受条件的限制，此类标本容易获得，是尿常规检查最常用的方法，但受饮水、饮食和收集时间等多种因素影响，病理成分容易漏诊。仅适用于门诊、急诊病人的常规过筛检验。（3）空腹尿标本：即进餐前的尿液标本。此标本对于糖尿病患者的尿糖测定更为敏感。（4）餐后尿标本：即通常在餐后2h收集的尿液。对于病理性尿蛋白、尿糖检查更为敏感。午餐后尿对尿胆原检查特别有益。尿液标本的种类（5）3h尿标本：即收集上午3h的尿液标本。具体的做法是：嘱病人于留尿前一天多进高蛋白质食物，少饮水，使得尿液浓缩呈偏酸性，不含晶形或非晶形盐类。留尿日早晨5:00排空膀胱的尿液，然后卧床3h,至8:00收集所有尿液标本。此标本适用于测定病人每小时或每分钟细胞排泄率（6）12h尿标本：即患者正常进食，晚上8:00排空膀胱的尿液，再收集以后12h内所有尿液标本。常用于细胞、管型等有形成分的计数如尿Addis计数等，液可用于生化检验如微量白蛋白排出率的测定。（7）24h尿标本：病人于清晨8:00排空膀胱尿液再收集以后24h内所有尿液标本。此标本用于体内代谢产物的定量测定，如蛋白、糖、肌酐等。尿液标本运送与保存尿液化学物质和有形成分不稳定，排出后即开始发生物理和化学变化：

胆红素、尿胆原被氧化；

维生素C消失；

细菌生长导致尿液成分的改变；

尿素经细菌酵解生成氨，尿PH升高，使尿液有形成分破坏；

葡萄糖被细菌酵解，使病理性尿糖消失。尿液标本运送与保存建议：提倡常规检查在排尿后尽快送检，最好不超过2h,如不能及时送检和分析，必须采取保存措施，常用方法有两种：（1）冷藏法：冷藏可抑制微生物生长，维持尿液PH恒定，屎尿中有形成分的形态基本不变，但条件下冷藏不得超过8h，有时冷藏时无定形磷酸盐和尿酸盐可被析出形成沉淀影响尿沉渣检查。（2）化学防腐法。尿液标本运送与保存常用的化学防腐法有以下：

甲苯。与尿液表面加甲苯数滴，使成一薄层，可防止细菌污染，通常用于尿酮体等成分被保存

甲醛。每100ml尿液加40%甲醛0.5ml,可抑制细菌生长并固定尿中有形成分，但不适用于含有还原性醛基的化学成分（如糖、17--羟皮质类固醇）

盐酸。每1000ml尿标本中加入浓盐酸1ml即可使尿液PH维持在2.此标本主要用于17-羟皮质类固醇、17-酮类固醇、儿茶酚胺、丙酮的定量测定。实验室接收标准（1）实验申请单应清楚填写下列内容：病人姓名、性别、年龄、科别、床号、病案号、住院号、申请序号、标本类型、临床诊断或主要症状、应用的药物（如维生素C)、收集标本时间、实验室接收时间及申请检查的实验项目。（2）尿标本容器标签填写的内容应与实验申请单的内容完全一致。（3尿液标本种类、尿量应符合所申请实验的要求。（4）尿液及时送检并实施了相应的正确防腐措施。实验室拒收标准（1）实验申请单填写的内容必须与尿液标本容器标签填写内容完全一致，否则拒收。（2）尿液常规检查的标本必须在留取标本后2h内送到，否则拒收。（3）申请24h尿液定量检查的标本必须是24h全部尿液的混合液，并准确记录尿量，否则拒收。（4）常规尿液检查量少量为10ml;其他尿液检查的标本应5ml,否则拒收。（5）送检的申请单和容器应清洁卫生，不能溅有标本，否则拒收。检验质量保证粪便标本采集血液标本采集尿液标本采集体液标本采集微生物检验标本采集容器特点：常规检查标本，应使用一次性无吸水性、无渗漏、有盖，无污染物干净容器，容器大小应事宜，细菌培养标本容器应无菌，标志要明显。标本要求：根据检验目的选择最有价值的标本，如含有脓血、粘液或色泽异常的标本送检。选择适合采集寄生虫和虫卵检查的标本，送检量应尽量多，避免因标本量不足而漏检。寄生虫卵检查应尽量使用浓集检查法。送检时间：肠内原虫滋养体，应立即检查，冬天应保温送检；一般常规检查不应超过1h送检，寄生虫和虫卵检查不宜超过24h。患者准备：检测前告知患者停用影响检验结果的药物和食物。检验质量保证体液标本采集血液标本采集尿液标本采集粪便标本采集微生物检验标本采集脑脊液标本采集精液标本采集生殖道标本采集痰液标本采集脑脊液标本采集脑脊液标本采集脑脊液的主要功能是保护脑和脊髓免受外力损伤；调节颅内压力；提供中枢神经系统营养物质并运送其代谢产物；调节神经系统的碱储备，调节和维持酸碱平衡；通过转运生物胺类物质，参加神经内分泌调节。通过对脑脊液物理学检查、显微镜检查、化学和免疫检查及脑脊液病原学检查，可对神经系统疾病的诊断、治疗和判断预后提供依据。脑脊液检验的目的：脑脊液标本采集脑脊液采集注意事项：（1）脑脊液标本由临床医生进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延髓池或侧脑室穿刺获得。（2）穿刺后应有医生做压力测定，正常脑脊液压力卧位为0.78--1.76KPa;儿童为0.4--1.0KPa。(3)待压力测定后将脑脊液分别收集于3个无菌小瓶（或试管）中，每瓶1--2ml即可，第1瓶做细菌学检查，第2瓶做化学或免疫检查，第3瓶细胞计数。脑脊液标本采集脑脊液采集注意事项：（4）标本采集及后要立即送检，立即化验，一般不能超过2h，因为放置时间过久，其性质可能发生改变，影响检验结果：细胞破坏或沉淀，与纤维蛋白凝集成块，导致细胞分布不均而使计数不准确细胞离体后迅速变形乃至渐渐消失，影响分类计数；葡萄糖迅速分解，造成含糖量降低；细菌溶解，影响细菌（尤其是脑膜炎双球菌）检出率。采集的脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液。脑脊液标本采集脑脊液标本保存脑脊液中化学物质和有形成分不稳定，留取后即开始物理和化学变化，如细胞成分破坏；葡萄糖降解。因此采集后尽快送检，最好不超过2h,如不能及时送检或分析，必须保存措施。冷藏可抑制微生物生长，维持脑脊液PH恒定，是脑脊液中有形成分的形态基本不变，但4℃条件下，冷藏不得超过4h。脑脊液标本采集脑脊液标本拒收标准（1）实验申请单填写的内容必须与脑脊液标本容器标签填写内容完全一致，否则拒收。（2)脑脊液常规、生化检查的标本必须在取标本后2h之内送到，否则拒收。（3）常规脑脊液检查的标本最少量为0.5ml;其他脑脊液检查的标本应为1ml,否则拒收。精液标本采集精液标本采集精液由精子和精浆组成，精子由睾丸细胞生成，在附睾内成熟，通过输精管运输；精浆主要由精囊腺（占精浆的50%-65%）、前列腺（占精浆的30%-40%）和尿道球腺等附属腺（睾丸、输精管等，占精浆的3%-5%）分泌的混合液。精液标本采集精液检查目的精液检查的主要目的是评估男子生育功能，提供男性不孕症诊断和疗效观察的依据；辅助诊断男性生殖系统疾病，为临床治疗提供重要依据。精液检查包括常规检查（精液量、液化时间、PH、精子活力、精子密度和精子形态等）、生化检查（果糖、酶学检查等)、微生物学检查及免疫学检查（如抗精子抗体等）几个方面。精液标本采集精液采集方法及注意事项1.采集精液的最好方法是让患者本人手淫采集，如有困难可用取精器（电按摩法)采集。禁止用性交中断法采集精液，因为这种方法会失掉射精前的一部分，而开始射精的精液精子浓度最高，终末部分精子浓度最低。2.将一次射出的全部精液直接排入清洁、干燥容器内，不能用乳胶避孕套采集，因避孕套内含有滑石粉可影响精子活力。3.因精子生成日间变动较大，对于少精症患者，不能仅凭一次检查结果做诊断。一般应间隔1-2周检查一次，连续检查2-3次。精液标本采集精液采集准备工作1.向受检者讲清精液检查的意义、标本采集的方法和注意事项。2.标本采集室最好在实验室附近，室温应控制在20-35℃.室内必须清洁、肃静、无人打扰。3.采集精液标本前必须禁欲。一般情况下，25岁以下禁欲3d,25-35岁禁欲5d,35-45岁禁欲7d(禁欲亦包括无遗精或手淫）4.采集精液前应排净尿液。精液标本采集精液采集运送与接收1.精液标本留取后应立即送检（如送检时间过长，超过1h或有遗漏，均不能做精液检查）。2.精液标本采集后在实验室存放或运送过程中，其温度应保存在25-35℃；若低于20℃或高于40℃将影响精子活率（力）。在冬天送检标本时最好放在内衣口袋内，并防止瓶子倒置。3.检验人员接收标本时，应在瓶上注明编号、姓名、采集时间、禁欲天数等。精液标本采集精液标本实验室拒收标准1.精液检查的标本必须在留取标本后1h内送到，在冬天运送标本时注意保温，否则拒收。2.精液标本必须保持于干燥、洁净容器内，不能用乳胶避孕套采集，否则拒收。3.留取精液检查的标本必须是一次射出精液的全部量，不能混有尿液，否则拒收。生殖道标本采集生殖道标本采集男性标本1.如怀疑为奈瑟菌或其他化脓性细菌感染，应在清洗龟头部后，以碘伏或其他非粘液刺激性消毒剂消毒后，挤出分泌物，以无菌棉拭子采取，立即送检。2.前列腺液的正确采集方法是先做直肠指检，从直肠轻轻按压前列腺，在完全暴露尿道口的情况下采样。液量少时直接滴在已消毒的载玻片上及时送检，需注意防止标本蒸干；量多时收集在洁净干燥的试管内。若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液沉渣。生殖道标本采集女性标本阴道标本采集前24h应禁止房事、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等，取材所用器械必须洁净。一般用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材，制成生理盐水涂片后观察阴道分泌物标本，经期的女性患者不宜做此检查。标本采集后即刻送检，阴道滴虫在25-42℃下可活动，故标本应保温送检。痰液标本采集痰液标本采集1.采集痰液时先嘱病人将口内唾液吐出，并用力将咽喉分泌物咳出弃掉。若病人进食不久，则应先刷牙，以免食物残渣混入痰内，嘱病人从肺部深处用力咳嗽，若痰液从肺部咳出，咳嗽声音深沉，所得痰液较粘稠，可牵拉成丝。若所咳为唾液，则稀薄如水且无粘性。2.一般检查以清晨深咳后第1-2口痰为宜。咳出的痰液盛于干燥、清洁的容器内送检。3.做24h痰量和分层检查时，应嘱病人将痰吐在无色、开口大玻璃瓶内，加少许防腐剂（如苯酚）痰液标本采集4.做细胞学检查时，每次咳痰5-6口，总量5ml左右送检。或收集上午9:00--10:00的新鲜痰液5.幼儿痰液收集困难时，可用消毒棉拭子刺激喉部引发咳嗽反射，用棉拭刮取标本。6.对痰少而咳不出的病人，应鼓励病人咳嗽。可先漱口，在室内外做深呼吸或适当的运动，诱发咳嗽。7.有吸烟习惯的病人，咳嗽前可吸1-2支烟，促进咳嗽。检验质量保证微生物检验标本采集血液标本采集尿液标本采集粪便标本采集体液标本采集血液标本的微生物检测防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染时血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序时十分重要的。（1）75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。（2）用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1--2%碘酊作用30s或聚维酮碘作用60s,从穿刺点向外以1.5--2cm直径画圈进行消毒。（3）75%酒精脱碘对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。皮肤消毒程序培养瓶消毒顺序用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精作用60s在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液血培养瓶接种顺序抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。如果同时做需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶。血培养标本采集注意事项1.血培养采集的时间和频率（1）采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2--3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养）。因为研究已证实，2--3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。（2）入院前2周内接收抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份，可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。血培养标本采集注意事项（3）对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5---1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。（4）可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2---3份血培养。（5）不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先采集2--3份血标本，24--36h后估计体温升高之前，再采集2份以上。血培养标本采集注意事项（6）可疑为菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血培养方法，选在其他种类的培养瓶，如高渗培养瓶，中和抗生素培养瓶，结核菌培养瓶等，以获得罕见的或苛氧的微生物。（7）可疑为细菌性心内膜炎，在1--2h内多部位采集3份血标本，如果24h阴性，再采取3份以上的血标本。血培养标本采集注意事项2.采血量成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为5--10ml,血液和肉汤的比例为1:5--10（体积：体积）儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血1--5ml用于血培养血液量太多或太少都不利于细菌的检出，血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3--5%。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素，注入血液太多可能会抑制细菌生长。骨髓采血量一般为1--2ml。尿液标本的微生物检测尿液标本送检指征1.有典型的尿路感染症状2.肉眼脓尿或血尿3.尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性4.不明原因的发热，无其他局部症状5.留置导尿管的病人出现发热6.膀胱排空功能受损7.泌尿系统疾病手术前尿液标本采集方法1.清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洁会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排去，插入性接取中段尿约10ml于无菌容器中，立即送检于一小时内接种。该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌感染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。尿液标本采集方法2、耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但是有一定的痛苦，病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。3、直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可减少尿液标本的污染，准确的反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。尿液标本采集方法4.小儿收集包：对于无控制能力的小儿可应用收集包收紧尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复查。5.留置导尿管收集尿液：利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管，操作时应防止混入消毒剂，不能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者，应在更换新导管时留取尿标本。尿液标本采集注意事项标本采集前的注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素使用前采集。一般于晨起第一次尿液送检。粪便标本的微生物检测粪便标本送检指征1.急性腹泻：大便次数明显增多，腹痛，里急后重，往往伴有发热，大便性状为粘液便或脓血便。2.慢性腹泻：大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等症状。3.无痛性大量水样便或米泔样稀便。4.先吐后泻：恶心、呕吐、腹痛、腹泻。有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。5.抗生素治疗后腹泻：常发生于长期抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。6.高热惊厥：通常为中毒性痢疾，多见于婴幼儿和小儿。粪便标本采集方法1.自然排便采集法：自然排便后，挑取有脓血粘液部位的粪便2—3g，液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内或置于保存液或增菌液中送检。2.直肠拭子法：如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可采用直肠拭子法方法采集，取出后置于灭菌容器内送检。标本采集前的注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素使用前采集。采集时间：应在急性期采集，以提高检出率，最好在用药前。粪便标本采集注意事项送检：应立即送检，如不能立即送检，放入Cary—Blair运送培养基或PH7.0的磷酸盐甘油中送检和保存。痰液标本的微生物检测痰液标本送检指征1.咳嗽、咳痰：痰液可成脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。2.咳血：肺结核病人常痰中带血3.呼吸困难4.发热5.胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜，会发生胸痛肺部感染的患者有25—50%可能发生菌血症，应同时作血培养。痰液标本采集方法1.自然咳嗽法：咳嗽前，先用清水或漱口液反复漱口（为减少口腔正常菌群污染标本），然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器中。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10%使痰液易于排出。对于痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽。2.气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。痰液标本采集方法3.胃内采集痰标本：无自觉症状的肺结核病人尤其是婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分枝杆菌培养4.管穿刺法：主要用于厌氧菌培养5.小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。痰液标本采集注意事项

标本采集前的注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素使用前采集。痰液标本采集注意事项采集时间：（1）以晨痰为好。多数病人清晨痰较多，易于采集。且清晨痰含有的病理成分较多；会增加培养的阳性率。（2）最好在应用抗菌药物之前采集标本。痰液标本采集注意事项采集后应立即送检，以防止某些细菌在外环境中死亡。做结核分枝杆菌和真菌培养的标本如不能及时送检，可放4℃保存，以免杂菌生长。化脓和创伤标本的微生物检测局部症状红、肿、热、痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型特征。但随病程迟早、病变范围、位置深浅，五个症状不一定全部表现。病变范围小或位置较深时，局部症状可不明显。全身症状轻重不一。感染较重者常有发热、头痛、全身不适、乏力、食欲减退等，一般均有白细胞计数增加和核左移。病程较长时，可有水和电解质紊乱，血浆蛋白减少，肝糖原大量消耗，可出现营养不良、贫血、水肿等症状。全身性感染严重的病人可出现感染性休克。可疑疾病（1）软组织的急性化脓性（2）化脓性疾病炎症（3）脓肿（4）创伤感染化脓创伤标本送检指征化脓创伤标本采集注意事项标本采集前注意事项：应在抗生素应用前或在停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。标本采集后应立即送检。如不能送检，应放4℃保存。脑膜炎奈培养淋病奈瑟菌和瑟菌的标本除外。化脓创伤标本采集方法1.开放性感染和已溃破的化脓灶：先用灭菌生理盐水冲洗表面的污染菌，用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。注意尽量取化脓组织与正常组织交界处的脓汁，因为浓汁中心的细菌已大部分死亡，交界处的活菌较多，会提高阳性率。对于慢性感染，因污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织、研磨成组织匀浆接种于培养基。2.闭锁性脓肿：一般采用穿刺或手术引流的方法采取，采集前先用2.5—3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤。化脓创伤标本采集方法脑脊液标本的微生物检测脑脊液标本送检指征成人：发热、头痛、恶心、呕吐、颈强直和反射增强等症状，怀疑为脑膜炎的患者。脑脊液标本送检指征儿童：因儿童和新生儿的临床表现不明确，因此对于婴儿不明原因的发热，应怀疑为脑膜炎，采取脑脊液。脑脊液标本采集方法用腰穿的方法采集脑脊液，如果用于检测细菌或病毒，脑脊液量应大于或等于1ml,如果用于检测真菌或抗酸杆菌，脑脊液量应大于或等于2ml。脑脊液标本采集注意事项标本采集前的注意事项：应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素应在下次抗生素应用前采集。做脑脊液培养的患者建议同时做血培养。脑脊液标本采集注意事项采集时间：应立即采集，且最好于抗生素使用之前。送检：收集标本后，常温15min内送到实验室。脑脊液标本不可放冰箱保存，会使一些细菌死去（如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和嗜血杆菌）常温下可存放24小时。胆汁标本的微生物检测胆汁标本送检指征1.腹痛：具有上腹部或右上腹部持续性腹痛伴阵发性加重，并向右肩部放射，有时出现剧烈胆绞痛或上腹部疼痛。2.黄疸：90%左右急性重症胆管炎病人伴有不同程度的黄疸。3.墨菲征阳性：右上腹压痛、肌紧张、胆囊区深吸气时有触痛。胆汁标本送检指征4.伴随症状：常有恶心、呕吐和发热，尿少且黄5.中毒或休克：约有90%急性重症胆管炎患者表现为弛张高热，伴有寒战，少数病例体温不高，而在早期即发生感染性休克。怀疑为下列病例需送检：急性胆囊炎、急性重症胆管炎。胆汁标本采集方法1.先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。2.用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或无菌容器内。3.尽可能采取更多的液体，至少为1ml。胆汁标本采集注意事项标本采集前的注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素使用前采集胆汁采集注意事项：1.采集时间：怀疑感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集2.送检:应在常温下15分钟内送到实验室。常温下可保存24小时。如果做真菌培养，只能放4℃保存胸水标本的微生物检测胸水标本送检指征多伴有胸痛和发热。怀疑为下列疾病：结核性胸膜炎、细菌性肺炎引起的胸膜炎、肺部真菌感染引起的胸腔积液。胸水标本采集方法1.首先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。2.用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或小瓶内。为防止凝固，应在试管中先加入灭菌肝素。3.尽可能采集更多的液体，至少为1ml。胸水标本采集注意事项胸水采集前注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素使用前采集。胸水采集注意事项：1.采集时间：怀疑有感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停药后1-2日采集2.送检：应在常温下15分钟内送到实验室，在常温下可保存24小时。如果做真菌培养，只能4℃保存。腹水标本的微生物检测腹水标本送检指征1腹痛：可局限于炎症周围也可遍布全腹2.呕吐：常为早期症状之一,较轻。如发生麻痹性肠梗阻会出现持续性呕吐。3.腹部压痛、肌紧张、肠鸣音减弱或消失腹水标本采集方法1.先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。2.用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或无菌容器内。3.尽可能采取更多的液体，至少为1ml。腹水标本采集注意事项标本采集前注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次使用抗生素前采集。腹水采集注意事项：1.采集时间：怀疑感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。2.送检:应在常温下15分钟内送到实验室。常温下可保存24小时。如果做真菌培养，只能放4℃保存。心包液标本的微生物检测心包液标本送检指征1.全身症状：发冷、发热、心悸、出汗、乏力和精神症状。2.心前区疼痛、心包摩擦音：见于纤维蛋白性心包炎阶段。心包液标本送检指征3.渗出性心包炎：心浊音界向两侧增大，心尖搏动消失或在心浊音界左缘内侧，心音明显减弱。收缩期血压降低，舒张期血压无变化，故脉压差减小。有大量渗液时，可因液体压迫左肺底部而在左下肩部出现浊音及支气管呼吸音等肺实变体征。心脏压塞征象：一般见于心渗液产生迅速或有大量心包渗液时。4.心电图：普通导联ST-T改变或肢导低血压。心包液标本采集方法1.先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。2.用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或无菌容器内。3.尽可能采取更多的液体，至少为1ml。心包液标本采集注意事项标本采集前的注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素使用前采集。心包积液采集注意事项：1.采集时间：怀疑感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。2.送检:应在常温下15分钟内送到实验室。如果做真菌培养，只能放4℃保存。心包液标本采集注意事项关节液标本的微生物检测关节液标本送检指征1.关节肿胀，关节周围肌肉发生保护性痉挛。2.严重时有全身寒战与高热，局部温度增加。关节液标本采集方法1.首先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。2.用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或小瓶内。3.尽可能采集更多的液体，至少为1ml。关节液标本采集注意事项关节液采集注意事项：应在抗生素使用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素使用前采集。关节液标本采集注意事项关节液采集注意事项：1.采集时间：怀疑有感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停药后1-2日采集。2.送检：应在常温下15分钟内送到实验室，在常温下可保存24小时。如果做真菌培养，只能4℃保存。鞘膜积液标本的微生物检测鞘膜积液标本送检指征1.患者某侧睾丸急性发作的疼痛，并向腹股沟放射，自觉局部肿胀、发热。2.全身症状较轻，偶尔有发热者，有时体温可达40℃。3.无泌尿系统感染特征。鞘膜积液标本采集方法1.先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤2.用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或无菌容器内3.尽可能采取更多的液体，至少为1ml鞘膜积液标本采集注意事项1.采集时间：怀疑