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文档简介
各类鼻咽癌细胞株特性及来源CNE1为鼻咽高分化鳞状细胞癌细胞系;CNE2、HNE1、HNE2、HNE3、HONE1为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系;5—8F为鼻咽低分化鳞状细胞癌,细胞系SUNE—1亚株,具有高转移、高成瘤能力;6-10B为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系SUNE-1亚株,具有高成瘤潜能,不转移特性。C666-1为长期携带EB病毒基因的低分化鼻咽癌细胞株;HK-1为携带EB病毒基因的高分化鼻咽癌细胞株・NP69为永生化鼻咽上皮细胞系,于1XKsFM(keratinoeyteserum-freemedium,KSFM)培养基中,37C、5%CO2、饱和湿度条件下培养,呈现鳞状上皮样、贴壁生长,具有正常鼻咽上皮的特性。CNE11癌组织来源病人王某某,女,58岁,,籍贯吉林省,,中国医学科学院日坛医院住院号:2382248.1975年8月13日患者因头痛耳鸣、鼻衄等症状来院就诊。临床检查鼻咽部有菜花样肿物,肿瘤已侵犯颅底和颅神经(川,IV,区刘),双颈淋巴结转移,诊断为鼻咽癌。X光诊断为鼻咽后壁软组织肿物符合鼻咽癌,颅底象见左侧翼状突外板可疑骨质破坏,鼻咽部肿物作活检,病理诊断为高分化鳞癌。培养过程在第12代时(培养后的6个月),在上皮样细胞培养中发现有少量梭形细胞。在有的培养瓶中,梭形细胞逐渐增加。在接种少量细胞的培养瓶中,有的全为上皮样细胞,有的全为梭形细胞。选择全为上皮样的细胞传代,称CNE细胞株;全为梭形的细胞传代,称CNF细胞株CNE细胞株容易形成空泡,不传代的老细胞,在显微镜下可见到有些细胞的胞浆突出,然后脱落成死细胞,还有多核巨细胞。在这二株细胞,特别是CNF细胞的单层或多层细胞上有很多圆形细胞,核大,浆少。在培养液中也有大量圆的脱落细胞。将培养液中的悬浮细胞接种于培养瓶,细胞仍能贴瓶,生长出原来的上皮样细胞或梭形细胞。将CNE,CNF细胞和这二株细胞的脱落细胞培养成单层后,不传代,每周换液二次,继续培养7个月,未能得到类淋巴母细胞株,在培养过程中未见到肿瘤组织培养中常见到的成纤维细胞生长。特性CNE-22组织来源和培养方法组织取自鼻咽癌(W期)患者,林XX,63岁,男性,广东籍,活检组织病理检查为慢性鼻咽炎,但同时负压吸引的鼻咽脱落细胞为低分化鳞状细胞癌(图1)・病人血清的EB病毒抗体和鼻咽脱落细胞的EBNA检测,病人血清的各种抗EB病毒抗体的滴度分别为:VCA/IgG1:320,EAIgG1:160,VCA/lgA1:40,EA/lgA<1:5,抗EBNA抗体为1:160=鼻咽脱落细胞中发现成团的癌细胞呈EBNA阳性细胞株的EB病毒抗原用抗补体免疫荧光试验检查CNE-2细胞中各种EB病毒抗原。体外培养第3代细胞可见2谷淑燕,赵文平,曾毅,唐慰平赵明伦邓惠华,李昆.从低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮细胞株[J].癌症,1983,02:70-72+129-130・EBNA阳性,胞核呈颗粒状明亮的荧光,细胞传至第11代后进行多次检查,EBNA均呈阴性。经ludR或巴豆油、丁酸激活的细胞,检查EA、VCA也呈阴性。将细胞与类淋巴母细胞株HK-1共同培养,观察EB病毒对上皮细胞的再感染,6天后上皮细胞的EBNA仍呈阴性。HNE1、HNE2,HNE3和HONE1324组织细胞培养及建株肿瘤组织取自4倒男性鼻咽癌初诊患者,分别命名为HNE1、HNE2,HNE3和HONE1,其中HNE1和H0NE1为EBV阳性,HNE2和HNE3为EBV阴性。病理诊断均为低分化鳞癌。EBV抗原及EBV基因组分析EBNA检测结果发现.HNE£和HONE1细胞30代以前均为EBNA阳性,HNE2和HNE3则为阴性。晚代HNE1和HONE1细胞的EBNA也逐渐转为阴性,而从HONE1第5代细胞中克隆出来的CL40亚株的EBNA则非常稳定,传至52代其EBNA阳性率仍高达85—90%,VCA结果示HNE1、HNE2、HNE3,均为EA/VCA朗性.HONE细胞中只有0.1%为阳性。3人体鼻咽癌上皮样细胞株和梭形细胞株的建立[J].中国
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