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文档简介

实验一细菌的形态结构观察1病原生物学教研室涂增医学微生物学实验室规则2每次进入实验室必须穿白大褂，拒绝穿拖鞋者入内。不准携带食品、饮料和餐具入室，拒绝实验室内吃喝。上课前请不要动桌面上的实验器材，老师介绍完后才能开始实验。实验完成后统一下课。实验过程中发生意外时，应立即报告老师，不要私自处理。实验完成后要求洗手离开。服从班干部安排，做好实验室清洁，验收合格后签字离开。每次实验完成后书写实验报告。实验目的：了解革兰染色的原理.掌握并熟练操作细菌涂片的革兰染色.熟悉细菌的特殊染色法并观察细菌的特殊结构——荚膜, 鞭毛, 芽胞实验内容：制备细菌涂片，进行革兰染色并观察细菌的大小、形态、排列与染色性.观察细菌的特殊结构（示教镜）——荚膜, 鞭毛, 芽胞31、细菌的形态结构观察方法4常用染色方法：单染色法鉴别染色法革兰染色法（Gram

stain):最常用，1884年丹麦细菌学家革兰发明。其原理——“细胞壁结构学说”+“等电点学说”。特殊染色法：革兰氏阴性菌（G-）的细胞壁结构革兰氏阳性菌（G+）的细胞壁结构52、细菌涂片的制作:“有菌观念，无菌操作”3、用接种环刮取细菌在生理盐水中涂开，1-大肠杆菌，2-金黄色葡萄球菌（也可混合涂片）6步骤：涂片——干燥——固定1、讲台上取一张清洁载玻片2、用接种环取1-2环生理盐水在载玻片上，取2个位置点水点菌涂成薄膜122、细菌涂片的制作:“有菌观念，无菌操作”步骤：涂片——干燥——固定在空气中自然干燥或在火焰上方烘干（菌膜面向上，至少

20cm)72、细菌涂片的制作:“有菌观念，无菌操作”步骤：涂片——干燥——固定火焰上方，来回3次进行热固定83、革兰染色（

Gram

stain

）1初染2水洗

媒染3水洗

脱色4水洗 复染（结晶紫等量的碳酸氢钠3-5s）（碘液3-5s）（丙酮酒精3-5s）（稀释复红10-15s）水洗甩干油镜镜检94、油镜镜检油镜观察（100x）低倍镜（40x）找视野 滴1滴香柏油观察内容：1、染色性观察细菌被染成紫蓝色——革兰阳性（G+)菌细菌被染成红色

——革兰阴性（G-)菌2、单个细菌的形态：球菌（C），杆菌（b）3、细菌的排列：葡萄状排列；散在排列葡萄球菌G+大肠杆菌G-105.细菌特殊结构观察(示教镜)Capsule（特殊染色法，X1000)细菌的荚膜（capsule）11Sporeflagellum细菌的芽胞（spore）细菌的鞭毛(flagellum)(特殊染色法,x1000)12

荚膜

芽胞13鞭

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