化学品 沉积物-水系统中河蚬毒性试验 征求意见稿

1GB/TXXXXX—XXXX化学品沉积物-水系统中河蚬毒性试验本文件规定了化学品沉积物-水系统中河蚬毒性试验的术语、定义、受试物信息、试验原理、试验系统、仪器设备、试验程序、质量保证与质量控制、数据与报告。本文件宜采用河蚬作为受试生物，在不改变本标准基本试验条件的情况下，其它合适的淡水贝类双壳纲生物也可作为试验物种。本文件适用于淡水水体沉积物中化学品对河蚬的毒性效应测试。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。HJ/T153化学品测试导则HJ/T155化学品测试合格实验室导则HJ494水质采样技术指导第4.4条底部沉积物采样3术语和定义《化学品测试导则》（HJ/T153）和《化学品测试合格实验室导则》（HJ/T155）界定的以及下列术语和定义适用于本文件。上覆水overlyingwater在试验容器中位于沉积物上的水。空隙水或孔隙水interstitialwaterorporewater占据沉积物或土壤颗粒物空间的水。人工沉积物formulatedsediment由多种材料组成的用于模拟天然沉积物成分的混合物，又叫再造或合成沉积物。加标沉积物spikedsediment添加了受试物的沉积物。半数致死浓度50%oflethalconcentration,LC50引起一组受试实验生物半数死亡的浓度。半数效应浓度50%ofeffectiveconcentration,EC50引起一组受试实验生物半数出现某种生物效应的浓度。2来源、理化性质(例如水溶解性、蒸气压、pKa值、在水中和沉积物中的稳定性、正辛醇/水分配系数)等。受试物在沉积物、上覆水、孔隙水中的定量分析方法(包括检出限和准确度),非生物降解和生物选取大小一致、生理状态相近的河蚬，暴露于含有一系列浓度毒物的沉积物-入经曝气48h的除氯水，并连续曝气。水体pH6.5～8.0,水温18℃~25℃,DO大于等于6mg/L,采用自然光照(16h光照，8h黑暗),驯养周期2周以上。根据一般水生生物实验操作规范，建议每周换水1次～2次，并且每天清除排泄物。驯养初期河蚬会吐出泥沙并且对水质敏g～0.2g。在驯养期间及时挑出死亡个体。河蚬驯养2周以上且死亡率小于10%,可以用于实验。3GB/TXXXXX—XXXX在驯养成功、自然死亡率达标(河蚬群体死亡率小于10%)后，从死亡率达标成功驯养的河蚬群体总有机碳(TOC)、粒度分布(砂、淤泥和黏土含量)和含水率。配制沉积物的组成见附录B,也可以直接深度范围为1.5cm～3cm,加入上覆水使得沉积物-水深度比为1:到分配平衡，稳定时间过长会导致很多化合物发生4在本标准规定的试验条件下，以加标沉积物中最大受试行试验，试验周期96h。试验结束时如果河蚬死亡(96h)没有发生，则不再进行下一步试验。试验结10mg/kg、100mg/kg、1000mg/kg,也可根据需要选定其每个容器(1000mL烧杯)中放8只河蚬，调节并保持实验温度为19℃~23℃,根据受试终点的不同，设置试验时间96h(死亡率),10d(存活率)或视情况而定。每天测定一次溶解氧浓度。试验开始后每隔12h观察并记录河蚬的挖洞行为直到24h,之后每天观察河蚬挖洞行为，统计下潜个数。每天根据试验结果确定受试物96h的无死亡和最高死亡率浓度范围，以设计以死亡率毒性正式试验浓度范围。根据试验结果确定受试物10d最高和最低存活率浓度范围，以设计以存活率作性质(pH、电导率等)和溶解氧状况，以保证毒性试验的可靠性。生物数量。每隔7d补充一次上覆水，保证沉积物和上覆水的体积比一致。试验中应设置对b)急性毒性试验期间不喂食，慢性毒性试验期间可每5d喂食一次；c)加入河蚬后对试验上覆水进行温和曝气，并持续整个试验过程以保证溶解氧浓度不低于饱和溶氧的60%。而测试挥发性物质时，则应该考虑不对沉积物-水系统曝气。在曝气过程中要避d)在预试验和正式试验开始时测定上覆水pH值和电5暴露期结束后，对上覆水和沉积物进行受试物的浓度分析。9质量保证与质量控制试验结束时，对照试验中的生物不表现出显著的毒性效应和死亡。试验结束时，对照组存活率必须至少为80%。试验结束时，各实验容器中温度、溶解氧和pH应保持在可接受的范围内。溶解氧至少应为所用温度下空气饱和值的60%,所有容器中上覆水的pH值应为6～9。水温变化不超过±1℃。10数据与报告10.1试验数据本试验的目的是测定供试品在96h、10d试验对河蚬死亡率及下潜率的影响。10.1.1死亡率测定每个容器中存活的河蚬个数m,除以引入的河蚬个数M。见式(1): (1)m——每个容器中存活的河蚬个数；M——每个容器中引入的河蚬个数。10.1.2下潜率 (1)a河蚬钻入沉积物中的河蚬个体数量；b——引入沉积物中的河蚬个体数量。10.2试验数据处理毒性试验报告结果为LC₅₀、EC(以下潜率作为观察指标),NOEC、LOEC(以致死作为观察指标)。通过剂量-反应模型计算LC₀、EC₅₀、NOEC、LOEC,常用的方法有概率单位法、直线内插法等。10.2.1概率单位图解法用半对数坐标，以浓度对数为横坐标，死亡百分率对数概率单位为纵坐标绘图。将各实测值在图上画一条相关直线，从直线中读出LC值。10.2.2直线内插法采用线性刻度坐标，绘制死亡百分率对受试物浓度的曲线，从引起50%死亡率和下潜率的内插浓度6GB/TXXXXX—XXXX10.2.3软件算法采用合适的计算机软件计算LC50、EC50值、NOEC和LOEC值。结果报告试验报告应至少包括以下内容：a)受试物信息——名称、结构、纯度、来源、理化性质（水溶性、蒸气压、Kow、稳定性）等。b)受试生物信息——名称、来源、驯化和培养等。c)试验程序——试验系统：受试生物、试验用水，沉积物；——试验方法：静态试验；——试验设计：受试实验生物数量，受试物加标浓度和实测浓度；——试验条件：暴露的时间和条件；——测定方法：受试物浓度测定方法和生物效应测定方法。d)试验结果——试验浓度，加标浓度和实测浓度；——受试生物产生效应（死亡率，下潜率等）的情况；——试验终点（LC50、EC50、NOEC、LOEC）及统计方法。7GB/TXXXXX—XXXX（资料性）试验用水的化学特征作为试验中沉积物上覆水的试验用水应保证受试生物正常的存活、生长和繁殖，不使受试生物出现任何异常的外观和行为。8GB/TXXXXX—XXXX（资料性）配制沉积物的组成试验中使用配制沉积物，能够最大限度地降低试验条件的变异程度，并且避免引入其它生物。使用的沉积物应保证受试生物正常的存活、生长和繁殖，不使受试生物出现任何异常的外观和行为。配制沉积物的组成：a)4%～5%（干重）泥炭：使用粉末状、中等分散度、磨细（小于等于0.5mm）、风干的泥炭；b)20%±1%（干重）高岭土：高岭石含量高于30%；c)75%～76%（干重）石英砂：细砂，粒度小于等于2mm，50%以上的颗粒粒度在50μm～500μm；d)去离子水：加入沉积物干组分中，占最终沉积物重量的30%～50%；e)化学纯CaCO3：调节最终沉积物pH值为7.0±0.5；f)2%±0.5%（干重）总有机碳（TOC）：根据a)和c)用适量泥炭和石英砂调节；g)0.4%～0.5%（干重）食物：以粉末状加入干沉积物中。9GB/TXXXXX—XXXX参考文献[1]环境保护部化学品登记中心等(2013).化学品测试方法（第2版）生物系统效应卷.中国环境出版社[2]US-EPA(2000).MethodsforMeasuringtheToxicityandBioaccumulationofSediment-associatedContaminantswith