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细菌ESBL酶与耐药性

主讲人：华耀？青霉素发现者、英国科学家弗莱明〔1928〕粘肽〔构成细胞壁〕〔－〕胞浆内细胞膜细胞膜外细胞壁合成受阻，细胞壁缺损，外环境水分渗入到菌体，菌体膨胀裂解而死。丝氨酸的结构式克拉维酸〔1〕主要是有质粒介导ESBLs基因由质粒介导,可通过接合、转化和转导等形式在细菌间扩散。〔1〕TEM型ESBLs〔2〕SHV型ESBLsSHV型ESBLs是由SHV-1衍化而来。SHV家族中第一个SHV型ESBLs是SHV-2。SHV-2发生了Gly-238-Ser位点的突变,这增加了对氧亚氨基类抗生素的亲和力和水解能力。比照其它的SHV型ESBLs氨基酸序列分析发现,氨基酸的突变主要集中在179,238,240,205位点。

〔三〕ESBLs的检测方法

1、标准纸片扩散法头孢他啶\克拉维酸头孢他啶2三相水解试验区分菌株为产ESBLs或产头孢菌素酶〔AmpC酶〕ESBLs和AmpC酶同时产生的情况。①号槽：酶粗提物；②号槽：酶+CA；③号槽：酶+氯唑西林〔CLO〕；④号槽：酶+CA+CLO单产ESBLs菌株①号槽：酶粗提物；②号槽：酶+CA；③号槽：酶+氯唑西林〔CLO〕；④号槽：酶+CA+CLO联合产ESBLs和AmpC菌株3、E-test法4、分子生物学检测聚合酶链式反响(PCR)参照GenBank已发表的TEM、SHV、CTX-M和OXA各亚型的基因序列，分别设计特异性引物5、总结ESBLs的检测方法表型初筛试验初步判断表型确证试验最终确认三相水解试验确认菌株是否只产ESBLsE-test法分子生物学检测〔四〕ESBLs的防治按作用分为三类：〔1〕可逆性竞争性抑制剂：邻氯西林、双氯西林等〔2〕不可逆竞争性抑制剂：克拉维酸、舒巴坦等〔3〕非竞争性抑制剂：甲氧西林等克拉维酸不可逆竞争性抑制药物分解，细菌存活酶失活，药物起作用邻氯西林

+邻氯西林可逆性竞争性抑制

(三)合理使用抗生素有报道显示抗生素尤其是第三代头孢菌素的应用与ESBLs的感染流行有关。敏感菌因抗生素的选择性压力而被大量杀灭后，耐药菌得以大量繁殖而成为优势菌，同时抗生素的选择性压力也加快了细菌突

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