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文档简介

1鹅星状病毒感染诊断技术规范临床症状、病理变化；实验室诊断包括样品的采集与保存、病毒分离鉴定、反转录-聚合酶链式反应GB/T27401实验室质量控制规范动物NY/T541—2016兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范4.1环境2熟悉RT-PCR、qRT-PCR与间接EL5.1仪器设备5.2试剂与材料），5.3样品采集与运送5.3.2组织样品：采集疑似鹅星状病毒感染死亡鹅的肝脏、脾脏和肾脏等组织样品。采集病料时，用5.4样品处理与保存5.4.1样品应在生物安全柜中进行处理，取10g～20g样品放入灭菌的研钵中磨碎。研磨充分的组织35.5检测要求47.2.1.1.3台式低温高速离心机（最大转速为15000r/min）。7.2.1.2.51.0%琼脂糖凝胶，见A.2。），7.2.1.2.11阴性对照标准品，为健康5染料溶液，混匀后倒入放置在水平台面上的凝胶盘中，胶板厚5mm左右。依据样品数选用适宜的梳子。6mol/L。0.4μL，探针P（10μmol/L）0.8μL，模板RNA2μL，加ddH2O至20μL。反应液混匀后置于7），鹅星状病毒间接ELISA检测方法阴性对照OD均值=（ODA1+ODA2）/2；阳性对8.4.2.3当样品0.17＜OD450＜0.219鹅星状病毒感染综合判定8A.1磷酸盐缓冲液（PBS，0.01mol/LpH7.NaClNa2HPO4.12H2OA.3.1配制0.5mol/L乙二胺四乙酸钠（EDTA-Na2）溶灭菌双蒸水氢氧化钠调pH至A.3.2配制50×TAE电泳缓冲液0.5mol/L乙二胺四乙酸钠（EDTA-Na2）A.5包被液（0.05mol/L9Na2CO3NaHCO3A.7样品稀释液（封闭液）水养物保藏中心（CCTCC其保藏编号为CCTCCNO:V201808。该病毒根据SDPY株ORF2基因序列设计一对特异性引物，序ORF2-R：5’-TGCGGCCGCAAGCTTGTCGACGTCGACTCATGTCCGCCCTT-3’，扩增片段长度为759bp，引物在0.1mmol/LIPTG浓度下诱导4h，进行蛋白表达。经SDS电泳后，

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