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./高中生物选修一学案1.1果酒、醋的制作一、果酒制作的原理1.酵母菌的生物学特征⑴属于生物。⑵新陈代谢类型:。在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,反应式为:。在无氧条件下,酵母菌能进行,反应式为:。⑶繁殖方式:酵母菌多以方式进行无性生殖,也可以通过形成孢子进行有性生殖。2.在葡萄酒的自然发酵过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮上的。3.果酒制作时需控制温度在。4.红色葡萄果酒的颜色成因:在发酵过程中,随着的提高,红葡萄皮的进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色。5.在缺氧、的发酵液中,可以生长繁殖,而绝大多数其他都因无法适应这一环境而受到。二、果醋制作的原理1.醋酸菌的生物学特性⑴属于生物。⑵新陈代谢类型:。与其呼吸作用有关的酶主要分布在细胞膜上。⑶繁殖方式:。2.果醋制作的原理⑴当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成。⑵当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为,再变为。反应式为。3.果醋制作时需控制的条〔1环境条件:充足。〔2温度:醋酸菌生长的最适温度为。〔3菌种来源:到当地购买,或从中分离醋菌。4.在变酸的酒的表面观察到的菌膜是在液面大量繁殖而形成的。溶液内部能形成菌膜吗?为什么?三、流程图葡萄四、实验步骤①对发酵瓶、纱布、榨汁机等实验用具进行清洗并消毒。先用温水反复冲洗几次,再用体积分数为_______擦拭消毒,晾干待用。②取葡萄500g,用清水冲洗1~2遍除去污物〔注意_____________。③去除葡萄枝梗和腐烂的子粒。④用榨汁机榨取葡萄汁后,将其装入发酵瓶中。〔如果没有合适的发酵装置,可用500mL的________替代。但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的_______。⑤将发酵瓶置于适宜的温度〔_________下发酵。⑥由于发酵旺盛期CO2的产量非常多,因此需要及时_________,以防止发酵瓶爆裂。〔如果是简易发酵装置,每天_______瓶盖2~4次。进行排气。⑦10天后,取样检验。例如,可以检验酒味、酒精的含量、进行酵母菌的镜检等工作。⑧当果酒制成以后,可在发酵液中加入醋酸菌〔或醋曲,然后移至_________条件下发酵,适时用气泵向发酵液中_________。〔如果没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶口上盖上_________,以减少空气中尘土等的污染。五、操作提示〔一材料的选择与处理选择______的葡萄,榨汁前先将葡萄进行______,并除去_____。〔二防止发酵液被污染1.榨汁机要清洗_________,并_________。2.发酵瓶要清洗_________,用体积分数______的酒精消毒。3.装入葡萄汁后,_________充气口。〔三控制好发酵条件1.葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约_________的空间。2.制作葡萄酒过程中,将温度严格控制在_________,时间控制在_________左右,可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。3.制作葡萄醋的过程中,将温度严格控制在_________,时间控制在_________左右,并注意适时通过充气口_________。六、课题延伸果汁发酵后是否有酒精产生,可以用_________来检验。在________条件下重铬酸钾与酒精反应呈现_________。检测时,先在试管中加入发酵液2mL,再滴入物质的量的浓度为3mol/L的_________3滴,振荡混匀,最后滴加常温下___________3滴,振荡试管,观察颜色的变化。七、旁栏思考题1.你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?答:应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时。2.你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?答:需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。例如,。3.制葡萄酒时,为什么要将温度控制在18~25℃?制葡萄醋时,为什么要将温度控制在30~35答:温度是。20℃左右最适合酵母菌繁殖,因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为30~35℃,因此要将温度控制在30~35℃4.制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?答:。5.发酵装置的设计讨论请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接?结合果酒、果醋的制作原理,你认为应该如何使用这个发酵装置?〔1充气口是;〔2排气口是;〔3出料口是。〔4排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是。〔5使用该装置制酒时,;制醋时,。6.为什么在酒精发酵过程中往往"先通气后密封"?"通气"的目的是;"密封"的目的是。7.酒精发酵过程中发生"先来水后来酒"现象,其原因是什么?。8.在实际生产中,还要对发酵液进行煮沸处理,其目的是什么?。9.在醋酸发酵过程中需要向发酵液中补充氧气,最经济实用的方法是?。1.2腐乳的制作一、腐乳制作的原理 1.参与豆腐发酵的微生物有、、、等多种,其中起主要作用的是。2.毛霉是一种,分布广泛,常见于、蔬菜、谷物上,具有发达的。3.毛霉等微生物产生的能将豆腐中的蛋白质分解成小分子和,产生的可将脂肪分解为和。在多种微生物的作用下,普通的豆腐转变成风味独特的腐乳。二、制作腐乳的实验流程<一>毛霉的生长1.豆腐块表面长满菌丝,温度应控制在<此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长,而适于毛霉慢慢生长>,并保持一定的湿度,约后,毛霉开始生长,天后,菌丝生长旺盛,天后,豆腐块表面布满菌丝。2.豆腐块上生长的毛霉来自空气中的。现代的腐乳生产是在的条件下,将优良直接接种在豆腐上,这样可以避免其他菌种的污染,保证产品的质量。<二>加盐腌制1.将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中,同时逐层,随着层数的加高而增加盐量,接近瓶口表面的盐要。2.加盐①可以,使豆腐块变硬,后期制作时不会过早酥烂;②能够,避免豆腐块腐败变质。3.注意控制盐的用量。盐的浓度过低,;盐的浓度过高,。<三>配制卤汤1.卤汤直接关系到腐乳的、、。卤汤是由和各种配制而成。2.卤汤中酒的含量一般控制在左右,酒精含量越高,对的抑制作用也越大,使腐乳;酒精含量过低,的活性高,加快的水解,杂菌繁殖快,豆腐易腐败,难以成块。加酒可以,同时能使腐乳具有。3.香辛料可以,也具有的作用。〔四防止杂菌污染1.用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用〔煮沸消毒法。2.装瓶时,操作要。整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后,要用胶条将瓶口。封瓶时,最好将瓶口通过,防止瓶口被污染。三、思考与讨论1.王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?盐在该过程中起什么作用?2.豆腐坯用食盐腌制,其作用是什么?〔①渗透盐分,析出水分②给腐乳以必要的咸味③防止毛霉继续生长和污染的杂菌繁殖④浸提毛霉菌丝上的蛋白酶A.①②③B.①②④C.②③④D.①②③④3.你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事?4.我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?5.吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的"皮"。这层"皮"是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?1.3制作泡菜并检测亚硝酸盐含量一、乳酸菌代谢类型为,在情况下,将葡萄糖分解成乳酸,反应式为:常见的种类有和。常用于生产酸奶的是。在、土壤、、人或动物的内等均有分布。二、亚硝酸盐粉末、易溶于。在食品生产中常用作食品。膳食中的亚硝酸盐一般不危害人体健康,当人体摄入总量达时,会引起中毒;当摄入总量达时,会引起死亡。绝大多数亚硝酸盐随排出,但在特定条件下,即适宜的、和一定的作用,会转变成致癌物质。三、泡菜腌制过程1.泡菜坛的选择应选用无砂眼、无裂纹等的合格的泡菜坛。不合格的泡菜坛容易引起。检查时,可将坛口压入水中,看坛内有无现象。2.腌制〔1过程:将清水和盐以的质量比例配制盐水。将盐水后备用。将蔬菜装至时加入香辛料,装至时,加入盐水,要使盐水,盖好坛盖。将坛盖边沿的水槽中注满水,以保证坛内的环境〔2条件:控制腌制的、和。温度、食盐用量,腌制时间,容易造成,含量增加。一般在腌制10天后,亚硝酸盐的含量。四、亚硝酸盐的测定1.原理:〔1在条件下,亚硝酸盐与发生反应后,与结合形成色染料。〔2将显色反应后的样品与已知浓度的进行目测比较,可以大致出泡菜中亚硝酸盐的含量。计算公式为:中亚硝酸盐含量〔mg∕〔40mL滤液的质量,kg。2.测定步骤:→→→〔1配制溶液配置的溶液有、、、、、、。其中需要避光保存的溶液是;。〔2配制标准显色液①用吸取体积0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5mL的溶液分别置于比色管中,另取1支比色管作为。②向各管加入2.0mL,混匀,静置3~5分钟。③向各管加入1.0mL溶液。④最后用定容到50mL。〔3制备样品处理液①榨汁得滤液。②取滤液倒入容量瓶,添加和,摇床振荡1h,再加,用蒸馏水定容到后,立即过滤。③将滤液移入容量瓶,加入定容后过滤,获得的滤液。〔4比色①将滤液移入比色管中,并编号。②分别依次加入和,并定容后混匀静置③观察颜色变化,并与比较,记录亚硝酸盐含量。④计算五、思考与讨论1.为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶?2.日常生活中不宜食用放置时间过长和变质蔬菜的原因是什么?3.经测定某样品滤液中亚硝酸盐含量为5.0µg,40mL滤液的质量为41.3g,则泡菜中亚硝酸盐含量为4.为什么泡菜坛内有时会长一层白膜?这层白膜是怎样形成的?2.1微生物的实验室培养一、培养基1.概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质叫培养基。可分为培养基和培养基。2.营养构成:各种培养基一般都含有、、和,此外还要满足微生物生长对、以及的要求。3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。思考1:从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?答:二、无菌技术<一>获得纯净培养物的关键是,具体操作如下:1.对实验操作的、操作者的和进行。2.将用于微生物培养的、和等器具进行。3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。<二>消毒和灭菌1.消毒是指。常用的方法有、、消毒法。2.灭菌是指。常用的方法有:、、灭菌。分别适用于那些用具?思考2:无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?答:。思考3:利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?答:。思考4:物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是;随后关闭排气阀继续加热,气压升至,温度为,并维持min;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至时打开锅盖,其目的是防止。三、实验操作大肠杆菌的纯化培养〔一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.操作步骤是:、、、、。思考5:在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?答:;。思考6:牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质?答:。2.倒平板:待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:①在火焰旁右手拿,左手;②使锥形瓶的瓶口;③左手将培养皿,右手,立刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后,将平板。思考7:锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?答:思考8:倒平板的目的是什么?答:思考9:若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否培养微生物?为什么?答:思考10:配制斜面培养基作用是什么?,试管为什么要加塞棉塞?答:〔二纯化大肠杆菌微生物接种最常用的是法和法。还有和等。1.平板划线法是的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是:①将在酒精灯火焰上灼烧直至。②在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到的目的。④将冷却的接种环伸入。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙,把接种环,盖上皿盖,不要划破培养基。⑦灼烧接种环,冷却后从划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。⑧将平板放入培养箱培养。思考11:取菌种前灼烧接种环的目的是什么?为什么除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环?取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行,其目的是?最后灼烧接种环的目的是?在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是?答:2.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的,然后将进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的。系列稀释操作步骤为:①取盛有mL水的无菌试管6支试管,编号101、102、103、104、105、106。②用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101试管中,并吹吸3次使之混匀。③从101倍液中吸取mL菌液注入到编号为102试管内吹吸均匀,获得102倍液。依此类推。思考12:系列稀释操作的注意事项是什么?答:四、结果分析与评价1.培养未接种培养基的作用是什么?,若有菌落形成,说明什么?2.在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落颜色?形态?3.培养12h和24h后的菌落大小?;菌落分布位置?原因?思考13:在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因?思考14:频繁使用的菌种利用什么法保存?长期保存菌种的方法是什么?2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、课题背景1.尿素CO<NH2>2是一种重要的氮肥,农作物〔能,不能直接吸收利用,而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为,这是因为细菌能合成。2.以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象,要达到的两个主要目的是:⑴;⑵。二、研究思路<一>筛选分解尿素的菌株1.筛选思路:在寻找时,要根据他对的要求,到相应的中去寻找。[思考一]怎样寻找耐高温的酶呢?从热泉中把耐热细菌筛选出来,这是因为热泉的高温条件了绝大多数微生物,而使的Taq细菌脱颖而出。2.筛选原理人为提供菌株生长的条件〔包括等,同时其他微生物生长。筛选方法:选择培养4.选择培养基〔1概念:选择培养基是指允许微生物生长,同时其他种类微生物生长的培养基。目的菌株就是利用对微生物进行,从而获得所需的。〔2原理:根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。〔3方法:=1\*GB3①在培养基中加入某种〔不作为营养物质,对分离的微生物无害,其他微生物而选择所需微生物。如在基本培养基中加入可以抑制细菌和放线菌的生长,从而将酵母菌和霉菌分离出来。=2\*GB3②改变培养基中的。如缺乏氮源的选择培养基,可用来分离自主固氮微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存;以为唯一氮源的选择培养基,可用来分离分解尿素的微生物;=3\*GB3③改变微生物的,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。〔4实例:分解尿素的细菌的分离与计数的选择培养基[思考二]在分离分解尿素的细菌所用的培养基即为。其选择机制是的微生物才能在该培养基上生长。[思考三]在该培养基配方中,为微生物的生长提供碳源的是,提供氮源的的是,琼脂的作用是。只有能合成〔分解尿素的酶的微生物才能分解尿素。<二>统计菌落数目1.方法:常用来统计样品中菌数目的方法是。2.理论依据:即当样品的足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于。通过统计,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在的平板进行计数。另外,也是测定微生物数量的常用方法。3.计算方法:从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数,计算方法是4.注意事项:①一般来说,统计的菌落数往往比活菌的实际数目。这是因为当时,平板上观察到的只是。因此,统计结果一般用而不是活菌数来表示。②为使结果更接近真实值,要设,取其,可将稀释度的样品加到的平板上,经涂布,培养计算出菌落的。[思考四]比较教材中两位同学的操作方法,第位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进操作的是,需设置;第二位同学统计的三个菌落数相差太大,说明,如果某个平板的细菌数量与其他平板差别太大,应舍弃并分析产生差异的原因,。[思考五]利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是,直接影响平板上生长的。<三>设置对照设置对照的主要目的是排除对实验结果的影响,提高可信度。[思考六]请设计本实验的对照实验组:方案一:其他同学用A同学的进行实验,以证明同学是否有误或的配制是否有问题。方案二:A同学以不接种的作为空白对照,以证明培养基是否受到。三、实验设计1.实验设计的内容包括、、和等。2.实验流程:菌落计数菌落计数配制土壤溶液系列稀释涂布平板与培养3.实验过程:①土壤取样:土壤微生物主要分布在距地表cm富含近性的土壤中,约为细菌。土壤取样时,一般要铲除。土壤是微生物的。②样品的稀释:分离不同的微生物采用不同的,原因是不同微生物在土壤中含量。其目的是保证获得菌落数之间、的平板。细菌稀释度为,放线菌稀释度为,真菌稀释度为。第一次做实验时可以将稀释的范围一点。③涂布平板与培养:培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在下培养1~2d,放线菌一般在下培养5~7d,霉菌一般在25~28℃的温度下培养。④菌落计数:在菌落计数时,每隔统计一次菌落数目。选取菌落数目时的记录作为结果,以防止因而导致遗漏菌落的数目,使每个菌体都能形成肉眼可观察到的菌落。菌落的特征包括等方面。[思考七]土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么?4.操作提示:①取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都要。②应在旁称取土壤。将称好的土样倒入盛有无菌水的中,塞好棉塞。③在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在旁进行。④实验时要对作好标记。注明等。⑤为了提高效率,在操作时更加有条不紊,应当时间。[思考八]在研究未知微生物时务必规范操作,以防被感染,实验后一定要洗手。四、结果分析与评价1.对分离的菌种作进一步的鉴定,还需要借助的方法。2.在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱性,PH。因此,我们可以通过检测培养基变化来判断该化学反应是否发生。3.在以为唯一氮源的培养基中加入指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变,说明该细菌能够。思考九、测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后,将滤膜放到培养基上培养,大肠杆菌菌落呈现色,通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取个水样。2.3分解纤维素的微生物的分离一、课题背景纤维素是一种由首尾相连而成的高分子化合物,植物每年产生的纤维素能被土壤中的某些微生物分解利用,是因为它们能产生。对这些微生物的研究与利用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产,用处理服装面料等。二、基础知识〔一纤维素和纤维素酶1.纤维素为白色、无气味的纤维状结构物质,不溶于水,也不溶于一般;纤维素是地球上含量最丰富的类物质,植物根、茎、叶等器官都含大量的纤维素,其中是自然界中纤维素含量最高的天然产物。许多商品纤维素都是由天然纤维素制得的,如水溶性的〔、不溶于水的〔Avicel等;由于膳食纤维具有刺激胃肠蠕动,促进消化液分泌,有助于食物的消化和排便的功能,被称为"第七营养"。2.纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即、和,前两种酶使纤维素分解成,第三种酶将纤维素分解成,为微生物提供了。3.纤维素酶作用的实验验证在2支20mL的试管中,分别加入宽1cm,长6cm的,在分别加入pH为4.8、浓度为0.1mol/L的10mL、11mL。其中10mL的试管中加入1mL〔70~80U/mL,固定,摇床振荡反应1h,观察结果。一段时间后,的试管中滤纸条被分解。〔二纤维素分解菌的筛选纤维素分解菌的筛选方法是,这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。其原理是:刚果红〔CR是一种染料,它可以与形成,但并不和水解后的和发生这种反应。当纤维素被分解后,的复合物就无法形成,培养基中会出现以为中心的。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。三、实验操作分离分解纤维素的微生物实验流程:土壤取样→→梯度稀释→→。[思考]本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同?提示:课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一氮源的选择性培养基上,直接分离得到菌落。本课题通过选择培养,使纤维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在鉴别培养基上。其他步骤基本一致。土壤取样采集土样时,应选择的环境。若找不到合适环境,可将,如滤纸等,埋在中一个月左右,再从滤纸上筛选分解纤维素菌。[思考]为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌?由于生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。[思考]将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深?将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右的腐殖土壤中。〔二选择培养1.选择培养的目的:增加,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。2.制备选择培养基:参照课本29页旁栏中的比例配置,回答下列问题:〔1旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么?答:培养基,原因是配方中无。〔2这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,是如何进行选择的?答:选择作用,因本配方中的碳源主要是,所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。〔3你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用?答:用培养基与之对照。3.选择培养操作方法将土样加入装有30ml的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定下震荡培养1~2天,直至。吸取一定的培养液〔如5mL,转移至另一瓶新鲜的中,进行重复选择培养。稀释涂布到的培养基上。[思考]为什么选择培养能够"浓缩"所需的微生物?在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到"浓缩"的作用〔三梯度稀释按照课题1的稀释操作方法,将选择培养后的培养基进行等比稀释101~106倍。吸取适量的稀释后培养液,涂布到的培养基上。〔四将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上1.制备培养基:参照课本旁栏中的配方制备鉴别纤维素分解菌的培养基。〔1按照每200mL培养基加入1mL质量浓度为10mg/mL的CR溶液的比例配置培养基:将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1mL涂布到平板培养基上,30℃〔2不加CR溶液的培养基:将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1mL涂布到平板培养基上,30℃长出菌落后,在培养基上覆盖质量浓度为1mg/mL的,10至15min后倒去,再加入浓度为1mol/L的NaCI溶液,15分钟后倒去,此时,产生的菌落周围将会出现。〔五挑选产生透明圈的菌落[思考]两种刚果红染色法各有哪些优点与不足?方法一:缺点是操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二:优点是操作简便,不存在菌落混杂问题。缺点一是:由于培养基中〔纤维素粉、琼脂、土豆汁还含有淀粉类物质,可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应,产生模糊的透明圈;缺点二是:有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红,形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分。四、结果分析与评价〔一培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落?设置对照,若对照的培养基在培养过程中长则说明培养基制作合格。如果观察到产生的菌落,则说明可能获得了分解纤维素的微生物。〔二分离的结果是否一致如果不同,分析产生不同结果的原因。五、课题延伸本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选,但是这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行的实验,其方法有和两种。纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的进行定量的测定。3.1菊花的组织培养一、课题背景科学研究表明,当植物体细胞而处于时,在一定的、和其它的作用下,就可以表现出,发育成完整的。科学家用的方法,把许多种植物的培养成了完整的。二、植物组织培养的相关概念和基本过程〔一植物组织培养的相关概念1.细胞分化:在植物的过程中,细胞在_________、________和__________上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程就叫做。细胞分化具有普遍性、、稳定性和____。细胞分化的原因是的结果。思考1:细胞分化是一种持久性的变化,它有什么生理意义?;2.细胞的全能性:__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。3.愈伤组织:由植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织,就叫愈伤组织,愈伤组织的细胞排列,是一种__________的呈无定形状态的__________。4.脱分化:由_______的植物器官、组织或细胞产生__________的过程,称为脱分化,又叫。5.再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成__________,这个过程叫做再分化。5.外植体:。思考2:填表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同组织类型组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向根尖分生组织愈伤组织相同点〔二植物组织培养的基本过程组织培养组织培养〔组织培养〔人为使用〔控制移植——→试管苗———→完整的植物体三、影响植物组织培养的因素1.内部因素:不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。因此,植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料,__________,__________等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。思考3:一般来说,容易进行繁殖的植物容易进行组织培养。思考4:选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是。2.外部因素:〔1营养条件常用的是__________培养基,其主要成分包括:__________,如________________;__________,如__________________;__________,如__________________;以及__________等。在配制好的MS培养基中,常常需要添加。〔2植物激素植物激素中生长素和__________是启动、和的关键性因素。_________________、______________以及__________等,都会影响实验结果。常用的植物激素有:生长素类:、、、等。细胞分裂素类:、、等。赤霉素类:等。思考5:填表:激素使用的先后顺序及其用量比例对细胞分裂和分化的影响。生长素/细胞分裂素比值与结果生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时比值低时比值适中使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素先细胞分裂素,后生长素同时使用〔3环境因素__________、__________、__________等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养,一般PH控制在_________;温度控制在__________;每天用日光灯照射______小时。四、实验操作过程:配制培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培1.制备MS固体培养基:实验室一般使用保存的配制好的培养基母液来制备〔1配制各种母液。配制母液时,大量元素浓缩______,微量元素浓缩_______,常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/mL的质量浓度。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。〔2配制培养基。配制1LMS培养基时,将称量好的加入800mL蒸馏水,加热熔化,然后加入30g,取配制好的、、和的母液,依次加入,加蒸馏水定容至1000mL,__________,最后分装到锥形瓶中,每瓶分装__________。〔3灭菌:思考6:MS培养基中各种营养物质的作用是什么?肉汤培养基相比,MS培养基有哪些特点?2.外植体消毒:选取菊花茎段时,要取____________________。对培养材料进行表面消毒时,一方面要考虑_______________;另一方面还要考虑植物材料的__________。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。旺盛旺盛嫩枝<流水>冲洗刷洗,冲洗20分钟左右<无菌吸水纸>吸干表面水分<70%的酒精>摇动2-3次6-7秒<无菌水>清洗<无菌吸水纸>吸干表面水分<氯化汞>溶液浸泡1~2分钟<无菌水>清洗3次3.接种接种前,用体积分数将工作台擦拭,然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在进行,并且每次使用器械后,都要用灭菌。4.培养:接种后的锥形瓶最好放在__________中培养。培养期间定期消毒。5.移栽6.栽培3.2月季的花药培养一、课题背景1.1964年,印度科学家首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的单倍体植株。这充分说明和一样,在离体条件下也具有的潜能。2.育种工作者可以采用的方法,使发育为,在经过人工诱导〔常利用或使,重新恢复到。这样的植株不仅能够正常生殖,而且每对染色体上的成对的基因都是,自交产生的后代不会。单倍体育种不仅,也为新品种的培育开辟了新途径。二、基础知识〔一被子植物的花粉发育1.被子植物的花粉是在中由经过分裂形成的。2.结合教材内容填下列示意图:小孢子母细胞〔小孢子母细胞〔2n〔时期〔n单核〔期〔n双核期〔细胞核〔n〔细胞核〔n〔细胞〔n〔细胞〔n〔个精子<n>〔分裂〔分裂单核〔期〔n〔分裂思考1:被子植物的花粉的发育经历时期,期和期等阶段。思考2:一个小孢子母细胞可以产生个精子;在一枚花药中可以产生个花粉。〔二产生花粉植株的两条途径1.产生花粉植株〔即单倍体植株一般有两种途径:一是花粉通过阶段发育为植株,二是花粉在上先形成,再将其诱导分化成植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中的及其。2.填写培育花粉植株的途径图解:〔〔〔〔〔3.胚状体〔又称的结构与合子发育成的胚的结构非常相似,它的发育过程也与合子胚类似,、、等结构完整。〔三影响花药培养的因素1.影响花粉植株的主要因素:和。2.材料的选择:①从花药来看,应当选择的花药;②从花粉来看,应当选择的花粉;③从花蕾来看,应当选择的花蕾。思考3:除此之外,、以及等对诱导成功率都有一定影响。二.实验设计<一>材料的选取1.选择花药时一般通过确定花粉发育时期,此时需要对花粉细胞核进行染色,最常用的染色剂是和,它们分别可以将细胞核染成色和色。〔二材料的消毒花蕾花蕾〔无菌水清洗〔无菌吸水纸吸干水分〔无菌水冲洗〔三接种和培养1.剥取花药:消毒后的花蕾,要在条件下除去花萼、花瓣。要尽量不损伤花药,否则,同时还要彻底去除花丝,因为。2.接种花药:剥取的花药要立刻接种到上。每个培养瓶接种个花药。3.培养:花药培养利用的培养基是在培养基配方中添加、和,调节pH至,温度为℃,幼苗形成之前光照。4.培养20~30d后,花药开裂,长出或形成。将前者还要及时转移到上,以便进一步分化出再生植株;后者要尽快并转移到新的培养基上。5.通过愈伤组织形成的植株,常常会出现的变化,因而需要鉴定和筛选。思考4:为什么通过愈伤组织形成的植株会发生染色体倍性的变化?思考5:为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?6.1植物芳香油的提取一、基础知识〔一课题背景早在古代,人类将具有芳香气味的植株花卉制成干品后,可当做和使用。19世纪,人们合成了人造香料,但对天然植物芳香油依然情有独钟。如今,植物芳香油广泛地应用于、、和等方面。〔二植物芳香油的来源1.天然香料的主要来源是和。香料种类来源动物香料麝、灵猫、海狸、抹香鲸等植物香料玫瑰油〔玫瑰花、橘皮油、樟油〔樟树树干等注意:〔1栏旁资料:不同植物的根、茎、叶、花、果实、种子都可以提取芳香油。〔2微生物中的也可以产生芳香化合物。2.芳香油的性质:强,比较复杂,且易溶于,以及其衍生物为主。〔三植物芳香油的提取方法1.植物芳香油的提取方法有、、等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。1.1常用方法:原理:利用将的植物芳香油携带出来,形成,冷却后,混合物又会重新分出和。方法:根据蒸馏过程中的位置,可将水蒸气蒸馏法划分为:原料放在中加热蒸馏;:原料加热蒸馏;:利用外来加热蒸馏。不足之处:有些原料不适用于水蒸气蒸馏法中的水中蒸馏法,如柑橘、柠檬。这是因为水中蒸馏会导致和等问题。1.2压榨法〔详见橘皮精油的提取:有些不适用于水中蒸馏法原料〔如柑橘、柠檬可用此法。1.3萃取法:不适用于水蒸气蒸馏的原料可以考虑使用此法〔详见课题2胡萝卜素的提取原理:芳香油易溶于〔如石油醚、酒精、乙醚等,去除后得到芳香油。方法:将、的植物原料浸泡在中→使植物溶解在中,得到浸泡液→蒸发出→芳香油。注意:用于萃取的有机溶剂必须,除去,否则会影响芳香油的品质。二、实验设计〔一玫瑰精油的粗提取1.实验流程示意图2.实验方法:因玫瑰精油的,,,,故采用水蒸气蒸馏法进行提取。3.实验装置〔略4.实验步骤〔1采集玫瑰花:采集5月上、中旬的玫瑰花,清水,沥干水分。〔2装入蒸馏原料:称取50g玫瑰花放入500mL蒸馏瓶,添加蒸馏水。〔3安装蒸馏装置〔4加热蒸馏:在蒸馏瓶中加几粒沸石,防止。打开水龙头,缓缓通入冷水,然后开始加热。蒸馏完毕,应先撤出热源,然后停止通水,最后拆卸蒸馏装置,拆卸的顺序与安装时相反。〔5分离油层:收集锥形瓶中的乳白色的乳浊液,向锥形瓶中加入[促使油水混合物〔乳浊液中油和水的分离],使乳化液分层。然后将其倒入分液漏斗中,用将油层和水层完全分开。〔6除去水分:向油层中加入,24h后过滤除去固体Na2SO4,得到玫瑰油。注意事项:蒸馏时间不能,温度不能。否则,产品品质就比较差。〔二橘皮精油的提取1.橘皮精油:无色透明,具有诱人的橘香味,主要成分为,是、和的优质原料。2.实验流程示意图3.实验步骤〔1浸泡橘皮①,用清水将橘皮冲洗干净,沥干水分后,将橘皮摊放在干燥通风处。②将晾干的橘皮浸泡在pH大于12、质量分数为7%~8%的中〔破坏,分解,在压榨时不易,出油率高;压榨液的黏稠度不会,过滤时不会堵塞筛孔。,时间为16~24h,中间翻动2~3次。〔2提取橘皮精油①将浸泡后的橘皮,用流动的水漂洗,洗净后捞起、沥干。然后将橘皮粉碎至3mm大小,放入家用榨汁机或手动压榨机中粉碎。粉碎时加入与橘皮同质量的质量分数为0.25%的和质量分数为5%的溶液,并调节pH为7~8〔目的使水和油分开。②在榨出的油水混合液中加入明矾,使之沉淀并变澄清,然后用,除去糊状残渣。再将得到的混合物,用6000r/min~8000r/min的转速进行高速离心。③分离出的香精油往往带有少量和等杂质,为了进一步除去杂质,可以将分离的产品放在5℃~106.2胡萝卜素的提取一、课题背景1.胡萝卜素的概念及分类:从胡萝卜中提取出的包括多种,统称为胡萝卜素。胡萝卜素的化学分子式中包括多个,根据其数目的多少可以将胡萝卜素划分为、、三类,其中是最主要的组成成分。2.β─胡萝卜素的作用:〔1一分子的β─胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器被氧化成两分子的,因此,β─胡萝卜素可用来治疗因缺乏而引起的各种疾病;〔2常用的,用作、、饲料的添加剂;〔3具有使恢复正常细胞的作用。二、基础知识1.胡萝卜素是,化学性质比较,不溶于,微溶于,易溶于等有机溶剂。与β-胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素约有100多种,它们大多存在于中。等蔬菜是提取天然β-胡萝卜素的原料。2.工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一是从中提取〔目前人们已研究培育出β-胡萝卜素含量,并且能够的胡萝卜新品种,二是从中获得,三是利用生产。本课题所提供的方法只能提取胡萝卜素的,若要获得β-胡萝卜素,还需要进一步的。三、实验设计1.实验流程示意图2.提取方法的选择根据胡萝卜素的特点,可以考虑的方法。3.萃取剂的选择有机溶剂分为和两种。和能够与水混溶,是有机溶剂;、乙酸乙酯、、苯、等不能与水混溶,称为有机溶剂。萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有,能够胡萝卜素,并且不与混溶。此外还要考虑、对人的、、有机溶剂是否能、会不会影响等问题。综合考虑,最佳萃取剂应选择。4.影响萃取的因素萃取的效率主要取决于和,同时还受到、、、和等条件的影响。一般说来,、,,需要提取的物质就能充分的溶解,萃取效果就好。因此,萃取前,要将胡萝卜进行和〔温度太高,时间太长会导致胡萝卜素。萃取时,要控制好温度,适当地延长。5.提取装置的设计〔1萃取过程应避免加热,采用加热,这是因为,直接使用加热容易引起燃烧、爆炸。〔2为了防止加热时有机溶剂挥发,还要。〔3萃取液的浓缩可直接使用。〔4再浓缩之前,还要,除去萃取液中的。四、结果分析与评价1.鉴定胡萝卜素的方法是。2.注意事项〔1点样时A、D为样品,B、C为样品;点样斑点不能太大;如果用吹风机吹干,温度不宜过高,否则斑点会变黄。〔2层析时选择干净滤纸,为了操作时,尽量避免用手直接接触滤纸以避免污染之。〔3将滤纸卷成筒状时,滤纸两边,以免因导致滤纸两边溶剂移动的,溶剂前沿不齐,影响结果。〔4不用普通烧杯盛装石油醚,而是用盛装,并且用盖好。高中生物选修一学案〔答案1.1果酒、醋的制作一、1.⑴真核⑵异养、兼性厌氧无氧呼吸⑶出芽生殖2.酵母菌3.18—254.酒精度数色素5.呈酸性酵母菌微生物抑制二、1.⑴原核⑵异养、需氧⑶二分裂2.⑴醋酸⑵乙醛醋酸3.⑴氧气⑵30—35℃⑶4.醋酸菌不能。因为内部氧气不足,醋酸菌无法生存三、挑选冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵四、①70%②不能反复冲洗④塑料瓶2/3⑤18—25℃⑥排气拧松⑧30—35℃充气纱布五、㈠新鲜冲洗枝梗㈡1.干净晾干2.干净70%3.封闭㈢1.1/32.18—25℃10—3.30—35℃7—六、重铬酸钾酸性灰绿H2SO4重铬酸钾七、1.引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会2.榨汁机、发酵装置要清洗干净;每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等3.酵母菌生长和发酵的重要条件4.葡萄醋是好氧菌,在将酒精变为醋酸时需要氧的参与,因此要适时向发酵液中充气5.⑴在醋酸菌发酵时连接充气泵进行充气用的⑵在酒精发酵时用来排出二氧化碳的⑶用来取样的⑷防止空气中微生物的污染,其作用类似巴斯德的鹅颈瓶⑸应该关闭充气口应将充气口连接气泵,输入氧气6.使酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖使酵母菌无氧呼吸产生酒精7.酵母菌首先有氧呼吸产生水,无氧呼吸产生酒精8.消灭发酵液中的杂菌9.向发酵液中充入无菌空气1.2腐乳的制作导学案答案一、青霉酵母曲霉毛霉丝状真菌土壤水果白色菌丝蛋白酶肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸协同二、让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制〔一15-18℃毛霉孢子严格无菌毛霉菌种〔二加盐铺厚一些析出豆腐中的水分抑制微生物的生长不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败变质会影响腐乳的口味〔三色香味酒香辛料12%蛋白酶成熟时间延长蛋白酶蛋白质抑制微生物生长独特的香味调制腐乳的风味防腐杀菌〔四沸水消毒迅速小心密封酒精灯的火焰三、〔1因为盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败〔2加盐可以析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬,在后期的制作过程中不会过早酥烂;同时盐能抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质。D豆腐上生长的白毛使毛霉的白色菌丝,严格说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。含水量为70%左右的豆腐适于做腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳不易成形。"皮"是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝〔匍匐菌丝,它能形成腐乳的"体",使腐乳成形。"皮"对人体无害。1.3制作泡菜并检测亚硝酸盐含量一.异养、厌氧性无氧乳酸链球菌乳酸杆菌乳酸杆菌空气植物体表肠道二.白色水添加剂0.3-0.5g3g尿pH温度微生物亚硝胺三.1.蔬菜腐烂向上渗水2.〔14:1煮沸冷却八成满没过全部材料乳酸菌发酵所需的无氧〔2时间温度食盐用量过高过低过短细菌大量繁殖亚硝酸盐开始下降四.1.〔1盐酸酸化对氨基苯磺酸重氮化N-1-萘基乙二胺盐酸盐玫瑰红〔2标准显色液估算样品取样量2.配置溶液制备标准显色液制备样品处理液比色五.1.酸奶制作依靠乳酸菌的发酵作用,抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长。2.亚硝酸盐含量过高3.5×10-3/41.3×10-3=0.12mg/kg4.白膜是由于产膜酵母的繁殖,酵母菌是兼性厌氧性微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌繁殖。2.1微生物的实验室培养一、1.营养物质生长繁殖液体固体2.水碳源氮源无机盐PH特殊营养物质氧气3.维生素,酸性,中性或微碱性,无氧〖思考1〗:C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素,约占原生质总量的97%以上。二〔一防止外来杂菌的入侵2.空间衣着手,清洁和消毒3.器皿接种用具培养基灭菌4.酒精灯火焰5.周围的物品〔二1.使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物〔不包括芽孢和孢子煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法2.用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌干热灭菌高压蒸气灼烧灭菌适用于:微生物的接种工具,如接种环,接种针或其他金属工具,试管口或瓶口;干热灭菌适用于:耐高温,需保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具;高压蒸汽灭菌适用于:普通培养基,生理盐水,手术器械,玻璃容器等。〖思考2〗:防止感染实验操作者。〖思考3〗避免妨碍热空气流通。〖思考4〗有利于锅内温度升高100kPa121℃15~30零容器中的液体暴沸三.〔一1.计算→称量→溶化→灭菌→倒平板思考5:防止牛肉膏和蛋白胨吸收空气中水分;防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。〖思考6〗糖、维生素和有机氮2.50锥形瓶拔出棉塞迅速通过火焰打开一条缝隙将培养基倒入培养皿倒过来放置〖思考7〗消灭瓶口的杂菌,防止杂菌感染培养基。〖思考8〗防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面,也可避免培养基中的水分过快挥发。〖思考9〗不能。空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖,并污染皿内培养基。〖思考10〗增大接种面积;保持通气并防止杂菌感染。〔二平板划线稀释涂布平板斜面接种穿刺接种通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线①接种环烧红③消灭试管口杂菌④菌液中,沾取一环菌种⑥迅速伸入平板内划3~5条平行线⑦最后一区的划线与第一区划线⑧倒置〖思考11〗操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。2.梯度稀释不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面单个菌落①9mL灭菌②1③1〖思考12〗移液管需灭菌,操作中试管口和移液管应在离火焰1~2cm处。四.1.对照;培养基灭菌不彻底。2.呈白色,为圆形,光滑有光泽,边缘整齐。3.大小不同;菌落分布位置相同。原因是时间越长,菌落中细菌繁殖越多,菌落体积越大;菌落的位置不动,但菌落数增多。〖思考14〗有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。〖思考15〗临时保藏法和甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基培养后,保存在4℃冰箱中,每3~6个月转种培养一次,缺点是保存时间较短,容易发生污染和变异;后者将菌种与无菌等量体积的甘油混合后保存在-20℃冷冻箱中。2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、不能氨脲酶〔1从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
〔2统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌二、〔一目的菌株生存环境环境淘汰有利于目的营养、温度、PH抑制或阻止4.〔1特定种类的抑制或阻止选择培养基筛选微生物
〔3化学物质淘汰青霉素营养成分尿素培养条件选择培养基只有能够以尿素作为氮源葡萄糖、尿素尿素凝固剂脲酶〔二活稀释涂布平板法稀释度样品稀释液中的一个活菌平板上的菌落数30-300显微镜直接计数法〔C÷V×M〔C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数;V:代表涂布平板时所用的稀释液的体积〔ml;M代表稀释倍数低两个或多个细胞连在一起一个菌落菌落数重复组平均值同一三个或三个以上平均数2第一位同学重复实验组操作有误,需重新实验重新实验恰当的稀释度菌落数〔三实验组中非测试因素实验结果土样实验操作培养基培养基杂菌污染三、实验方案所需仪器、材料、用具和药品具体的实施步骤时间安排3.3-8有机质中表层土天然培养基稀释度不同30-300适于计数104、105、106103、104、105102、103、104放宽30-37℃25-284.灭菌火焰10g90ml锥形瓶火焰培养皿培养基类型、培养时间、稀释度、培养物事先规划致病微生物四、生物化学增强升高PH尿素酚红红分解尿素伊红美蓝鉴别性黑三2.3分解纤维素的微生物的分离一.葡萄糖纤维素酶酒精纤维素酶二、㈠1.有机溶剂多糖棉花羧甲基纤维素〔CMC-Na微晶纤维素2.C1酶Cx酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖营养3.滤纸条醋酸-醋酸钠缓冲液加入纤维素酶㈡刚果红染色法像纤维素这样的多糖红色复合物纤维二糖葡萄糖纤维素分解菌透明圈三、选择培养将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落㈠纤维素丰富富含纤维素的物质土壤已腐烂㈡1.纤维素分解菌的浓度2.⑴液体琼脂⑵有纤维素粉⑶完全3.选择培养基温度培养液变浑浊选择培养基鉴别纤维素分解菌㈢鉴别纤维素分解菌㈣⑴透明圈⑵CR溶液纤维素酶明显的透明圈四、㈠无菌落生长透明圈五、发酵产纤维素酶液体发酵固体发酵葡萄糖3.1菊花的组织培养导学案答案一、脱离了原来所在植物体的器官或组织离体状态营养物质激素外界条件全能性植株植物组织培养离体的组织或细胞植物体二、1.个体发育形态结构生理功能细胞分化持久性不可逆性基因选择性表达思考1:使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化;有利于提高各种生理功能的效率。2.已经高度分化完整植株3.高度分化脱分化疏松而无规则高度液泡化薄壁细胞4.高度分化愈伤组织去分化5.根或芽等器官6.用于立体培养的植物器官或组织片段思考2:组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向根尖分生组织受精卵正方形无液泡紧密分化成多种细胞组织愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成新个体相同点都通过有丝分裂进行细胞增殖〔二组织培养组织培养脱分化离体的植物组织或器官〔外植体愈伤组织组织培养再分化胚状体〔根、芽人为使用植物激素控制移植——→试管苗———→完整的植物体三、1.材料的年龄保存时间的长短未开花植株思考3:无性思考4:嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化。2.〔1MS大量元素N、P、S、K、Ca、Mg微量元素Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co有机物甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素蔗糖植物激素〔2细胞分裂素细胞分裂脱分化再分化植物激素的浓度使用的先后顺序用量的比例2,4-DIAANAAIBAKT6-BAZTGA3思考5:使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时促根分化,抑芽形成比值低时促芽分化,抑根形成比值适中促进愈伤组织生长〔3PH温度光照5.818-22℃12四、1.4℃〔110倍100倍单独配制成母液〔2琼脂蔗糖大量元素微量元素有机物植物激素调节PH50ml或100ml
〔3高压蒸汽灭菌法思考6:大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,维持
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